新しいカルシウムシグナリングの分子機構に関する薬理学的研究

新型钙信号分子机制的药理学研究

• 批准号: 10877017
• 负责人: 田中 利男
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877017/
• 关键词: カルシウム; カルシウム結合蛋白質; EFハンド; ESTデータベース; in silico cDNAクローニング; 悪性腫瘍

近年、国際的ヒトゲノムプロジェクトの進展は著しいものがあり、特にEST(expressed sequence tag)プロジェクトにより、現在ではヒト発現遺伝子断片のほとんどがESTデータベースに登録されるようになった。我々は、かねてよりESTデータベースに注目し、サイバー上における新しいヒトカルシウム結合蛋白質のcDNAクローニングを試みた。独自に開発したデータ処理ソフトウェア、インターネット技術、シークエンスアッセンブラーソフトウェア、PCRテクノロジーを統合的に駆使することにより、現在までに全く報告されてない新しいカルシウム結合蛋白質のcDNAクローニング(ヒト、ウシ、ラット)に成功し、Calmedulinと命名した。この全く新しいカルシウム結合蛋白質は、いわゆるEFハンド蛋白質ファミリーであり、その分子構造が最も近いものは、centrinである。centrinは高等動物では中心体に局在し、細胞周期制御に関与していC驍アとが強く示唆されている。そこで今年度の本研究では下記の成果が得られた。(1) ポリクローナル抗体を作製しました。(2) その発現は全身に認められるが、特に胎児期での遺伝子発現が著明で成長とともに減少していることを明らかにした。(3) ほとんどのヒト癌において過剰発現が認められることを明らかにした。(4) 大腸菌を用いて組み換え蛋白質を作製・精製した。(5) 精製したcalmedulin蛋白質を用い、アフィニテークロマトグラフィーを行った結果、幾つかの結合蛋白質を見出した。その中の一つにreticulocalbinと高い相同性を有する蛋白質を認めた。今後、さらにその結合様式、結合定数、分子構造解析により、Calmedulinの生理的役割とカルシウムシグナル伝達機構を明らかにする予定である。

In recent years, the international ヒ ト ゲ ノ ム プ ロ ジ ェ ク ト の progress は the し い も の が あ り, に EST (expressed sequence tag) プ ロ ジ ェ ク ト に よ り, now で は ヒ ト 発 now heritage 伝 son fragment の ほ と ん ど が EST デ ー タ ベ ー ス に login さ れ る よ う に な っ た. I 々 は, か ね て よ り EST デ ー タ ベ ー ス に attention し, サ イ バ ー on に お け る new し い ヒ ト カ ル シ ウ ム binding protein の cDNA ク ロ ー ニ ン グ を try み た. に alone open 発 し た デ ー タ 処 Richard ソ フ ト ウ ェ ア, イ ン タ ー ネ ッ ト technology, シ ー ク エ ン ス ア ッ セ ン ブ ラ ー ソ フ ト ウ ェ ア, PCR テ ク ノ ロ ジ ー を integrative に 駆 make す る こ と に よ り, now ま で に く report all さ れ て な new し い い カ ル シ ウ ム binding protein の cDNA ク ロ ー ニ ン グ (ヒ ト, ウ シ, ラ ッ Youdaoplaceholder0)に successfully named に, Calmedulinと named た た. こ の く all new し い カ ル シ ウ ム binding protein は, い わ ゆ る EF ハ ン ド protein フ ァ ミ リ ー で あ り, そ の molecular structure が most も い nearly も の は, centrin で あ る. In <s:1> higher animals, the で center centrosome に is confined to <s:1>, the cell cycle control に is related to <s:1> て されて C, and アとが strongly く indicates されて る る る る. Youdaoplaceholder0 で で this year で the following records the が results が and られた of this study. (1) ポリ ロ ロ ナ を antibody を preparation た ま た た. (2) そ の 発 は systemic に now recognize め ら れ る が, に fetal stage where で の posthumous son 伝 発 now grow が zhao Ming で と と も に reduce し て い る こ と を Ming ら か に し た. (3) ほ と ん ど の ヒ ト carcinoma に お い て before turning 発 が now recognize め ら れ る こ と を Ming ら か に し た. (4) Coliform bacteria を are exchanged for え protein を to prepare and refine た た. (5) the refined し た calmedulin protein を い, ア フ ィ ニ テ ー ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー を line っ た results, several つ か の binding protein を shows し た. In そ そ, there is a めた にreticulocalbinと high そ similarity を する する protein を recognition めた. In the future, さ ら に そ の combining with others type, number, molecular structure に よ り, Calmedulin の physical battle cut と カ ル シ ウ ム シ グ ナ ル 伝 of institutions を Ming ら か に す る designated で あ る.

项目成果

鈴木秀謙: "RNAフィンガープリンティング法を用いた脳血管攣縮関連遺伝子の探索研究" 脳血管攣縮. 13. 272-276 (1998)

Hideken Suzuki：“利用RNA指纹法对脑血管痉挛相关基因的探索性研究”Cerebral Vasospasm 13. 272-276 (1998)。

田中利男: "21世紀の創薬科学(薬理ゲノム科学と創薬)" 共立出版, 18 (1998)

田中敏夫：“21世纪药物发现科学（药理学基因组科学和药物发现）”Kyoritsu Shuppan，18（1998）

Tomoaki Nakamura: "A Unique Exon-intron Organization of a Porcine S100C Gene : Close Evolutionary Relationship to Calmodulin Genes"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 243. 647-652 (1998)

Tomoaki Nakamura：“猪 S100C 基因的独特外显子-内含子组织：与钙调蛋白基因的密切进化关系”Biochem。

Da-Yu Tian: "Overexpression of caltractin gene in Tumor-Infiltrating Lymphocytes"International Journal of Oncology. 13. 1135-1140 (1998)

田大宇：“肿瘤浸润淋巴细胞中钙拮抗基因的过度表达”国际肿瘤学杂志。

田中利男: "よくわかるRDE3阻害薬の基礎と臨床(cAMPとPDE阻害薬の経緯およびPDEのアイソザイムとその分布)" Excerpta Medica, 118 (1998)

Toshio Tanaka：“RDE3 抑制剂的基本和临床解释（cAMP 和 PDE 抑制剂的历史，以及 PDE 同工酶及其分布）”Excerpta Medica，118 (1998)