プロテインキナーゼ阻害薬による遺伝子発現制御機構

蛋白激酶抑制剂的基因表达控制机制

• 批准号: 10169230
• 负责人: 田中 利男
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10169230/
• 关键词: プロテインキナーゼ; セリン・スレオニンキナーゼ; チロシンキナーゼ; プロテインキナーゼ阻害薬; マイクロアレイ法; ディファレンシャル・ディスプレイ法; 遺伝子発現

プロテインキナーゼカスケードが細胞内シグナリングの中心的機構であり、数多くのプロテインキナーゼ阻害薬が開発されている。これらのプロテインキナーゼ阻害薬は、細胞レベルから個体レベルにおいて非常に興味深い薬理作用が明らかにされており、その分子機構を解明するこC二は、医学生物学上重要な研究課題である。そこで我々はまず、ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)にProtein Kinasc C(PKC)のactivatorであるPMAを作用させ、RNAフィンガープリンティング法を用い、PKCによる遺伝子発現プロフィールの解析を行った。次に、発現変動を示した遺伝子の中から特にMonocyte Chemoattractant Protein-1(MCP-1)とMCP-3について種々のプロテインキナーゼ阻害薬を用い、その発現調節機構の解明を試みた。その結果、以下の結果が得られた。(1)HUVECsにPMA10nMを作用させると3時間後にMCP-1、MCP-3 mRNAはそれぞれ28倍と270倍になり、その後MCP-1 mRNA、MCP-3 mRNAは急速に減衰し、24時間後にはコントロールの1/10と遺伝子発現誘導後のRapid Decayがみられた。(2)PMAによるMCP-1 mRNA、MCP-3 mRNAのGene Expressionに対して、PMA作用30分前にProtein Kinase C Inhibitor(GFX109203X 400nM)を加えると、PMA作用後3時間後のMCP-1 mRNA、MCP-3 mRNAのUP-regulationはcomplete inhibitionされた。(3)TyrosineKinase Inhibitor(genistein 100nM)のPMA作用30分前の前処置ではPMAによる3時間後のMCP-1、MCP-3 mRNAのUp-regulationはともに90%程度抑制された。しかし24時間後にはMCP-1 mRNAはControlの3倍、MCP-3 mRNAはControlの30倍とPMA単独によるMCP-1 mRNA、MCP-3 mRNAの遺伝子発現誘導後のRapid Decayは抑制された。今後、種々のプロテインキナーゼ阻害薬による遺伝子発現プロフィール変化をマイクロアレイ法や蛍光ディファレンシャル・ディスプレイ法にて解析し、変動遺伝子群による細胞増殖抑制作用の関連について検討を行う予定である。

You may need to check the number of institutions in the center of the intracellular health care center to prevent the opening of the hospital. It is important to know that there are significant differences in the prevention and treatment of diseases, such as the prevention and treatment of diseases, the prevention of diseases, and the development of important research topics in medicine and biology. The endothelial cells (HUVEC), the activator cells, the PMA cells, the RNA cells, the endothelial cells, the activator cells, the endothelial cells, the PMA cells, the endothelial cells, the The secondary and immediate operation indicates that the special Monocyte Chemoattractant Protein-1 (MCP-1) and MCP-3 systems are used to prevent the use of the equipment, and that the operator is responsible for the verification of the test. The results are satisfactory. The following results are satisfactory. (1) HUVECs-1 mRNA, MCP-3 mRNA-1 mRNA, MCP-3 mRNA-1, MCP-3 mRNA-1, Rapid Decay-1, MCP-3 mRNA-1, MCP-1, MCP-1, MCP-1, (2) PMA, MCP-3 mRNA, Gene Expression, PMA 30 minutes before Protein Kinase C Inhibitor (GFX109203X 400nM), 3 hours after PMA, MCP-1 mRNA, MCP-3 mRNA, UP-regulation, complete inhibition. (3) the effect of TyrosineKinase Inhibitor (genistein 100nM) PMA is 30 minutes before and after setting PMA after MCP-1, MCP-3 mRNA Up-regulation inhibits the concentration of insulin by 90%. After 24 hours, the MCP-1 mRNA Control is 3 times, the MCP-3 mRNA Control is 30 times, the PMA is the only MCP-1 mRNA, and the MCP-3 mRNA is detected, and the Rapid Decay is used to suppress the virus. In the future, all kinds of drugs have been used to prevent the proliferation of drugs in the future. In the future, all kinds of drugs have been used to prevent the proliferation of drugs in the future. in the future, all kinds of drugs have been used to prevent the proliferation of drugs in the future. in the future, all kinds of drugs have been used to prevent cell proliferation.

项目成果

Tomoaki Nakamura: "A Unique Exon-intron Organization of a Porcine S100C Gene : Close Evolutionary Relationship to Calmodulin Genes"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 243. 647-652 (1998)

Tomoaki Nakamura：“猪 S100C 基因的独特外显子-内含子组织：与钙调蛋白基因的密切进化关系”Biochem。

Masaaki Hayashi: "Molecular Cloning and Characterization of Human PDE8B,a Novel Thyroid-Specific Isozyme of 3',5' Cyclic Nucleotide Phosphodiesterase" Biochem.Biophys.Res.Commun.250. 751-756 (1998)

Masaaki Hayashi：“人 PDE8B 的分子克隆和表征，一种新型 3,5 环核苷酸磷酸二酯酶的甲状腺特异性同工酶”Biochem.Biophys.Res.Commun.250。

田中利男: "よくわかるRDE3阻害薬の基礎と臨床(CAMPとPDE阻害薬の経緯およびPDEのアイソザイムとその分布)" Excerpta Medica, 11 (1998)

Toshio Tanaka：“RDE3 抑制剂的基本和临床解释（CAMP 和 PDE 抑制剂的历史，以及 PDE 同工酶及其分布）”Excerpta Medica，11 (1998)

Da-Yu Tian: "Overexpression of caltractin gene in Tumor-Infiltrating Lymphocytes"International Journal of Oncology. 13. 1135-1140 (1998)

田大宇：“肿瘤浸润淋巴细胞中钙拮抗基因的过度表达”国际肿瘤学杂志。