脳血管障害におけるゲノム創薬科学解析法の開発

脑血管疾病基因组药物发现科学分析方法的开发

• 批准号: 13204038
• 负责人: 田中 利男
• 金额: $ 2.82万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13204038/
• 关键词: 脳血管障害; ゲノム創薬科学; DNAチップ; 脳虚血; 脳血管攣縮

本研究の目的は、世界的に発展されつつあるゲノム創薬科学的アプローチを活用し、ゲノム上の治療関連遺伝子の探索研究戦略を確立することである。具体的には、脳血管攣縮病態および脳血管攣縮の致命的合併症である脳虚血病態における治療関連遺伝子クラスター解析から、新しい創薬ターゲットを探索し、ターゲットバリデーションを確立することである。そこで、我々は、脳虚血病態モデルにおける虚血脳および正常脳からDNAチップを作成した。脳虚血病態の進展、すなわち、脳虚血モデルにおける血管結紮の程度脳血管攣縮モデルにおける自家動脈血注大量を変えることで様々な重症度のモデルを作製し、その後の時間経過等に伴う脳血管、脳を回収した。これらのサンプルからDNAチップに対する各種ターゲットを作成した。虚血脳におけるDNAチップに遺伝子発現変化の検討では、脳虚血病態(重症度、時間経過)に依存した優位な遺伝子発現変化が認められ、脳虚血関連遺伝子を明らかすることができた。脳血管攣縮モデルにおける攣縮脳血管では、新しい治療関連遺伝子としてHeme Oxygenase-1(HO-1)を見出した。一方、臨床的に抗脳血管攣縮作用が確立している治療薬の一部にHO-1の誘導作用を見出した。この作用機序を検討し、cGMP/COの関与が示唆された。さらに、脳血管攣縮に対する新しい創薬ターゲットとして、Heat Shock Protein72(HSP72)を見出した。アンチセンスによるHPS72の特異的な抑制により、脳血管攣縮の増悪を見出した。このことからHSP72が脳血管攣縮における抗攣縮分子であることか示唆された。今後、脳虚血病態に対する治療関連遺伝子に焦点をあてた創薬ターゲットの探索研究戦略により、さらに、新しい創薬ターゲットを見出すことが可能であると考えられる。

这项研究的目的是建立探索全球发展基因组药物发现科学方法的策略。具体而言，我们将通过分析与治疗相关的基因簇的分析在大脑血管痉挛病理学和脑缺血（脑血管痉挛的致命并发症）中，通过分析与治疗相关的基因簇建立靶标验证。因此，我们在脑缺血性病理模型中创建了缺血性脑和正常脑的DNA芯片。脑缺血病理学的进展，即脑缺血模型中血管结扎的程度。通过改变大脑血管痉挛模型中的大量自体动脉输血，创建了各种严重程度的模型，并随着时间的推移和随后的时间通过，收集了大脑血管和大脑。从这些样品中创建了DNA芯片的各种靶标。当检查缺血性大脑中DNA芯片的基因表达变化时，根据脑缺血性病理（严重程度，时间过程）和脑缺血相关基因观察到主要的基因表达变化。在脑血管痉挛模型中的脑痉挛血管血管中，血红素加氧酶-1（HO-1）被发现为一种新的治疗相关基因。另一方面，我们发现HO-1在某些具有临床上建立抗脑血管痉挛的治疗剂中的诱导作用。研究了这种作用机理，并提出了CGMP/CO的参与。此外，我们发现热休克蛋白72（HSP72）是脑血管痉挛的新药物发现靶标。通过反义对HPS72的特异性抑制显示脑血管痉挛加剧。这表明HSP72是否是脑血管痉挛中的脉冲分子。据信，将来，可以通过探索和研究策略的药物发现策略来进一步发现新的药物发现靶标的药物发现靶标，这些靶标侧重于脑缺血的治疗相关基因。

项目成果

M Sakaguchi: "Loss of nuclear localization of the S100C protein in immortalized human fibroblasts"RADIATION RESEARCH. 155. 208-214 (2001)

M Sakaguchi：“永生化人类成纤维细胞中 S100C 蛋白的核定位丢失”辐射研究。

Y.Nishimura: "Calcium-dependent Activation of NFIL3/E4BP4 Gene Expression by Calcineurin/NFAT and CaM kinase Signaling"J. Biol. Chem.. 276(23). 19921-19928 (2001)

Y.Nishimura：“钙调神经磷酸酶/NFAT 和 CaM 激酶信号传导对 NFIL3/E4BP4 基因表达的钙依赖性激活”J。

J.Morikawa: "Molecular Cloning of Novel Mouse and Human Putative Citrate Lyase β-Subunit"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 289. 1282-1286 (2001)

J.Morikawa：“新型小鼠和人类假定的柠檬酸裂解酶 β-亚基的分子克隆”Biochem. Commun. 289. 1282-1286 (2001)