パーキンソン病のドーパミンニユーロン死と封入体形成におけるプロテアソームの役割

蛋白酶体在帕金森病多巴胺神经元死亡和包涵体形成中的作用

• 批准号: 14017049
• 负责人: 下濱 俊
• 金额: $ 4.42万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14017049/
• 关键词: パーキンソン病; プロテアソーム; ドーパミンニューロン; グリア; αsynuclein; BDNF; 封入体; MAPK

第1に、MPTPの活性型であるMPP+によるドーパミンニューロン死において、封入体形成とドーパミンニューロン死との関係を検討した。胎仔ラット腹側中脳由来の初代培養系では、MPP+誘発神経細胞死の過程で、細胞質内に一過性のユビキチン陽性顆粒が観察され、プロテアソーム活性の上昇が認められた。選択的阻害剤によりプロテアソーム活性を抑制すると、少数ながらドーパミンニューロン内にαシヌクレイン陽性の封入体が形成された。一方、プロテアソーム阻害薬はMPP+誘発神経細胞死を拮抗した。これらの点から、(1)プロテアソーム活性の低下は封入体形成に重要な役割を果たしている一方で、(2)ドーパミンニューロン死に対してはむしろ細胞死を抑制する作用のあることが示唆された。プロテアソームで分解されるshort-lived proteinのうち、アポトーシス関連分子および細胞内シグナル分子について検討した。その結果P42およびP44-mitogen activator protein kinase(MAPK)がMPP+処置後に脱リン酸化され、プロテアソーム阻害薬がこの脱リン酸化を拮抗することを見いだした。第2に、ラットC6グリオーマ細胞にヒトαsynuclein(野生型,変異型)を過剰発現させた系を確立し,その系を用いてBDNFの誘導について検討した。ヒト野生型αsynucleinを過剰発現させたcloneでのみBDNF mRNAの発現が増加し、蛋白レベルでも産生・分泌は増加していた。変異型αsynucleinを導入したcloneではBDNF mRNA、蛋白レベル共に上昇は認めなかった。野生型αsynucleinは細胞内カルシウム依存性にグリア細胞にBDNFを誘導・産生する機能を持ち,神経細胞保護的な機能を持つ可能性が示唆された。

Type 1 に, MPTP の activity で あ る MPP + に よ る ド ー パ ミ ン ニ ュ ー ロ ン die に お い て, seal in body form と ド ー パ ミ ン ニ ュ ー ロ ン die と の masato is を beg し 検 た. Tire tsai ラ ッ ト 脳 origin in the ventral の original training department で は, MPP + induced 発 で の 経 cell death process, god was observed in the cytoplasm に の ユ ビ キ チ ン positive particles が 観 examine さ れ, プ ロ テ ア ソ ー ム active の rise が recognize め ら れ た. Sentaku's resistance against tonic に よ り プ ロ テ ア ソ ー ム inhibition す を る と, minority な が ら ド ー パ ミ ン ニ ュ ー ロ ン に within alpha シ ヌ ク レ イ ン positive の が seal in body formation さ れ た. One side, プロテアソ プロテアソ ム ム inhibitor drug プロテアソ MPP+ induces neurogenic cell death を antagonistic <s:1> た. こ れ ら の point か ら, (1) プ ロ テ ア ソ ー ム active の low body form important な に sealed は "を cut fruit た し て い で る party, (2) ド ー パ ミ ン ニ ュ ー ロ ン die に し seaborne て は む し ろ cell death を inhibit す る role の あ る こ と が in stopping さ れ た. プ ロ テ ア ソ ー ム で decomposition さ れ る short - lived protein の う ち, ア ポ ト ー シ ス masato even molecular お よ び intracellular シ グ ナ ル molecular に つ い て beg し 検 た. そ の results P42 お よ び P44 - mitogen activator protein kinase (MAPK) が MPP + 処 after に リ off ン acidification さ れ, プ ロ テ ア ソ ー ム resistance against 薬 が こ の リ off ン acidification を antagonism against す る こ と を see い だ し た. 2 に, ラ ッ ト C6 グ リ オ ー マ cells に ヒ ト alpha synuclein (wild type, - alien) を turning 発 now さ せ た を established し, そ の is を with い て BDNF の induced に つ い て beg し 検 た. ヒ ト wild-type alpha synuclein を before turning 発 now さ せ た clone で の み BDNF mRNA の 発 now が raised し, protein レ ベ ル で も produce は raised, secretion and し て い た. - different alpha synuclein を import し た clone で は BDNF mRNA, protein レ ベ ル に total rise は recognize め な か っ た. Wild type alpha synuclein は intracellular カ ル シ ウ ム dependency に グ リ ア cells に BDNF を induction, produce す る function を ち to have, god 経 な cell protection function を hold つ possibility が sucking in さ れ た.

项目成果

Castellani RJ et al.: "Hydroxynonenal adducts indicate a role for lipid peroxidation in neocortical and brainstem Lewy bodies in humans"Neurosci Lett. 319(1). 25-28 (2002)

Castellani RJ 等人：“羟基壬烯醛加合物表明人类新皮质和脑干路易体中脂质过氧化的作用”Neurosci Lett。

Sawada, H. et al.: "Estradiol protects dopaminergic neurons in a MPP^+ Parkinson's disease model"Neuropharmacology. 42(8). 1056-1064 (2002)

Sawada, H. 等人：“雌二醇保护 MPP^ 帕金森病模型中的多巴胺能神经元”神经药理学。

Nakamizo, T. et al.: "Phosphodiesterase inhibitors are neuroprotective to cultured spinal motor neurons"J.Neurosci.Res.. 71(4). 485-495 (2003)

Nakamizo, T. 等人：“磷酸二酯酶抑制剂对培养的脊髓运动神经元具有神经保护作用”J. Neurosci. Res. 71(4)。

Kihara, T. et al.: "Protective effect of dopamine D2 agonists in cortical neurons via the phosphatidylinositol 3 kinase cascade"J.Neurosci.Res.. 70(3). 274-282 (2002)

Kihara, T. 等人：“多巴胺 D2 激动剂通过磷脂酰肌醇 3 激酶级联对皮质神经元的保护作用”J. Neurosci. Res. 70(3)。

Kume, T. et al.: "Isolation of a diterpenoid substance with potent neuroprotective activity from fetal calf serum"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 99(5). 3288-3293 (2002)

Kume, T. 等人：“从胎牛血清中分离具有有效神经保护活性的二萜类物质”Proc。