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プロテオームによるアルツハイマー病の病態解析法の開発

利用蛋白质组开发阿尔茨海默病病理分析方法

基本信息

批准号：
13204047
负责人：
下濱俊
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

孤発例を主体とするアルツハイマー病では、生成されたタンパクを網羅的に検討し、その翻訳後修飾やタンパク相互作用を明らかにしてゆくことが重要である。ヒト脳においてはこのようなタンパクの多くはリン酸化や糖鎖付加などの翻訳後修飾をうけており、その変化がアルツハイマー病のプロテオーム変動に深く関わっている可能性がある。今回は、タンパクプロファイルの詳細を検討する目的で、脳タンパクをその分画ごとにプロテオーム解析(subproteomics)した。その結果、(1)脳の親水性タンパクについては、約800スポットをデータベース化し、主として質量分析装置を用いた同定を可能にした。疎水性タンパクについては独自に開発した可溶化条件で安定したプロファイリングが可能になり、約200のスポットをデータベース化したが親水性タンパクに比べ変動が大きかった。(2)正常対照群とアルツハイマー病群で脳タンパクの発現を比較し、親水性タンパク、疎水性タンパクとも有意に変動するスポットを確認した。(3)親水性脳タンパクの糖鎖付加を検討した。アルツハイマー病に特異的な変動は認めなかった。高分子量タンパクのプロファイリングが困難で、その理由として、IPGゲルの特性、可溶化過程での分解などが考えられた。また、塩基性タンパクのプロファイリングも困難で、その理由として、電気的浸透により、泳動結果に大きなゆがみや欠失を生じることが考えられた。抗リン酸化タンパク抗体を用いた方法ではスポットを確実に特定できなかった。今後、(1)アルツハイマー病で変化を示した微量タンパクの同定、(2)膜タンパクの分離及びタンパクのリン酸化の検出には、さらに方法論的にいくつかの試行錯誤が必要である。(3)今回行ったスポットごとの群間比較のみでなく、タンパクネットワーク中でのアルツハイマー病での変化を抽出する解析が必要である。

The main body of the case is the disease, the generation of the disease, the network of the disease, the transformation of the disease, the interaction of the disease is important. The possibility of a change in the position of the sugar chain is discussed. This article discusses the purpose of the detailed analysis of the information and the subproteomics of the information. The results are as follows: (1) Due to its hydrophilic nature, approximately 800 sq ft of silicone can be used for digital processing, making it possible to use the same quality analysis device as the main one. The solubility conditions of the water soluble agent are stable, and the solubility conditions of the water soluble agent are stable. The solubility conditions of the water soluble agent are stable, and the solubility conditions of the water soluble agent are stable, and the solubility conditions of the water soluble agent are stable, and the solubility conditions of the water soluble agent are stable, and the solubility conditions of the water soluble agent are stable. (2)The normal response group was identified by comparing the occurrence of the disease group with that of the hydrophilic group. (3)Hydrophilicity of the sugar chain is discussed.アルツハイマー病に特异的な変动は认めなかった。High molecular weight polymer is difficult to separate, the reasons for this, the characteristics of IPG, the dissolution process, etc. For example, the basic property of the polymer is difficult, the reason for it is difficult, the penetration of electricity is difficult, and the migration result is difficult. The anti-acid antibody is used in the method of anti-acid antibody identification. From now on,(1) the identification of trace amounts of impurities in the sample,(2) the detection of membrane impurities and their acidification, and the trial errors in the methodology are necessary. (3)The analysis of the inter-group comparison is necessary.