白血病関連発がん遺伝子産物によるBim/Dlc複合体機能抑制メカニズムの解明

阐明白血病相关致癌基因产物抑制 Bim/Dlc 复合物功能的机制

• 批准号: 14028042
• 负责人: 稲葉 俊哉
• 金额: $ 4.1万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14028042/
• 关键词: CML; apoptosis; Bim; cytokine; Bc1-xL

慢性骨髄性白血病(CML)の病態を検討する目的で体内の白血球の総数を調節する機構を解析した。マウス骨髄初代培養細胞系を用いて、正常マウスからSca1+cKit+Lin-細胞(初期造血前駆細胞)とSca1-cKit+Lin-細胞(後期造血前駆細胞)を増幅・単離した。サイトカイン非存在下では初期前駆細胞では終末分化することなく24時間以内に死滅するのに対し、後期前駆細胞では終末分化を伴い48時間以上細胞が生存した。そこでサイトカイン非添加時の初期、および後期前駆細胞におけるBc1-2ファミリーメンバーの発現変化を検討したところ、Bc1-xLの発現レベルは不変、Bc1-2は速やかな減弱を見たが、Bimの発現レベルは5倍程度に誘導された。またBc1-2とBc1-xLの発現が後期前駆細胞では初期前駆細胞の5〜10倍の高いレベルであることが、サイトカイン欠乏時のアポトーシス誘導感受性の相異の一因であると考えられた。一方細胞株を用いた実験ではBcr-Ab1キナーゼがBimの発現を抑制した。またCMLモデルマウス(Bcr-Ab1トランスジェニックマウス)由来の初期造血前駆細胞では正常同胞マウス由来の細胞に比較してサイトカイン非存在下での著明な生存期間の延長が認められ、この効果はSTI571により抑制されたが、後期造血前駆細胞では明らかな相異は認められなかった。これらの細胞ではサイトカイン欠乏によるBc1-2の発現低下は認められたが、Bimの発現誘導は認められず、STI571存在下でBimの発現誘導が認められた。以上の結果よりBcr-Ab1がサイトカイン欠乏時のBimの発現誘導抑制を介してアポトーシスを抑制していることがCML発症の一因であることが示唆された。

分析了调节体内白细胞总数的机制，以研究慢性髓样白血病（CML）的病理。 SCA1+CKIT+LIN细胞（早期造血祖细胞）和SCA1-CKIT+LIN细胞（晚造血祖细胞）被扩增并使用原发性培养的小鼠骨髓细胞系从正常小鼠中分离出来。在没有细胞因子的情况下，早期祖细胞细胞在24小时内死亡，而没有终末分化，而晚期祖细胞在终末分化的情况下存活了48小时以上。因此，当我们研究未添加细胞因子时早期和晚期祖细胞中BC1-家族成员的表达变化时，我们发现BC1-XL的表达水平不变，BC1-2迅速减弱，但BIM的表达水平诱导到大约五次。此外，晚期祖细胞的BC1-2和BC1-XL的表达比早期祖细胞的表达高5-10倍，这被认为是细胞因子缺乏期间诱导凋亡的不同易感性的一个因素。另一方面，在使用细胞系的实验中，BCR-AB1激酶抑制了BIM表达。此外，与来自正常SIB小鼠的细胞相比，在缺乏细胞因子的情况下，源自CML模型小鼠（BCR-AB1转基因小鼠）衍生自CML模型小鼠的早期造血祖细胞显示出显着的延长，但是STI571抑制了这种作用，但在晚期血液上型雌性良心细胞中未观察到明显的差异。尽管由于细胞因子缺乏而降低了BC1-2的表达，但未观察到BIM表达，并且在STI571存在下诱导BIM表达。以上结果表明，BCR-AB1通过抑制细胞因子缺乏症中诱导BIM表达的抑制凋亡，这是CML发展的一个因素。

项目成果

Yokoyama, T.: "The expression of Bc1-2 family proteins (Bc1-2, Bc1-x, Bax, Bak and Bim)in human lymphocytes"Immunol Lett.. 81. 107-113 (2002)

Yokoyama, T.：“Bc1-2 家族蛋白（Bc1-2、Bc1-x、Bax、Bak 和 Bim）在人淋巴细胞中的表达”Immunol Lett.. 81. 107-113 (2002)

Asou, H.: "Establishment of the acute myeloid leukemia cell line Kasumi-6 from a patient with a dominant negative mutation in the DNA-binding region of the C/EBP・gene"Genes Chrom. & Cancer. 36. 167-174 (2003)

Asou, H.：“从 C/EBP·基因 DNA 结合区存在显性负突变的患者中建立急性髓性白血病细胞系 Kasumi-6”，《基因 Chrom》36。167-174。 (2003)