白血病関連発がん遺伝子産物によるBim/Dlc複合体機能抑制メカニズムの解明

阐明白血病相关致癌基因产物抑制 Bim/Dlc 复合物功能的机制

• 批准号: 14028042
• 负责人: 稲葉 俊哉
• 金额: $ 4.1万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14028042/
• 关键词: CML; apoptosis; Bim; cytokine; Bc1-xL

慢性骨髄性白血病(CML)の病態を検討する目的で体内の白血球の総数を調節する機構を解析した。マウス骨髄初代培養細胞系を用いて、正常マウスからSca1+cKit+Lin-細胞(初期造血前駆細胞)とSca1-cKit+Lin-細胞(後期造血前駆細胞)を増幅・単離した。サイトカイン非存在下では初期前駆細胞では終末分化することなく24時間以内に死滅するのに対し、後期前駆細胞では終末分化を伴い48時間以上細胞が生存した。そこでサイトカイン非添加時の初期、および後期前駆細胞におけるBc1-2ファミリーメンバーの発現変化を検討したところ、Bc1-xLの発現レベルは不変、Bc1-2は速やかな減弱を見たが、Bimの発現レベルは5倍程度に誘導された。またBc1-2とBc1-xLの発現が後期前駆細胞では初期前駆細胞の5〜10倍の高いレベルであることが、サイトカイン欠乏時のアポトーシス誘導感受性の相異の一因であると考えられた。一方細胞株を用いた実験ではBcr-Ab1キナーゼがBimの発現を抑制した。またCMLモデルマウス(Bcr-Ab1トランスジェニックマウス)由来の初期造血前駆細胞では正常同胞マウス由来の細胞に比較してサイトカイン非存在下での著明な生存期間の延長が認められ、この効果はSTI571により抑制されたが、後期造血前駆細胞では明らかな相異は認められなかった。これらの細胞ではサイトカイン欠乏によるBc1-2の発現低下は認められたが、Bimの発現誘導は認められず、STI571存在下でBimの発現誘導が認められた。以上の結果よりBcr-Ab1がサイトカイン欠乏時のBimの発現誘導抑制を介してアポトーシスを抑制していることがCML発症の一因であることが示唆された。

To investigate the pathogenesis of chronic osteopathic leukemia (CML), the mechanisms for regulating leukocyte counts in the body were analyzed. The growth of primary culture cell lines was characterized by the increase in the number of normal cells, Sca1+cKit+Lin-cells (early hematopoietic progenitor cells) and Sca1-cKit+Lin-cells (late hematopoietic progenitor cells). In the absence of cell culture, cells in the early stages of differentiation die within 24 hours, and cells in the late stages of differentiation die within 48 hours. In the early, middle and late stages of non-additive cell development, the development of Bc1-xL was discussed, the development of Bc1-xL was not changed, the development of Bc1-xL was weakened, and the development of Bim was induced to 5 times. Bc1 -2 and Bc1-xL are 5 - 10 times higher than those of the early stage cells, and one of the reasons for the difference in induction sensitivity is that the Bc1 - 2 and Bc1-xL are less abundant in the early stage cells. The expression of Bcr-Ab1 was inhibited in a single cell strain. In comparison with normal sibling derived cells, early hematopoietic progenitor cells derived from CML have longer survival time than normal sibling derived cells in the absence of CML. In contrast, late hematopoietic progenitor cells have longer survival time than normal sibling derived cells. Bc1 -2 was found to be deficient in the presence of STI 571 and Bim was found to be deficient in the presence of STI571. The above results show that Bcr-Ab1 can inhibit the development of CML due to its deficiency.

项目成果

Harada H.: "Implications of somatic mutations in the AML1 gene in radiation-associated and therapy-related myelodysplastic syndrome/acute myeloid leukemia"Blood. 101. 673-680 (2003)

Harada H.：“AML1 基因体细胞突变对放射相关和治疗相关的骨髓增生异常综合征/急性髓系白血病的影响”血液。

Yokoyama, T.: "The expression of Bc1-2 family proteins (Bc1-2, Bc1-x, Bax, Bak and Bim)in human lymphocytes"Immunol Lett.. 81. 107-113 (2002)

Yokoyama, T.：“Bc1-2 家族蛋白（Bc1-2、Bc1-x、Bax、Bak 和 Bim）在人淋巴细胞中的表达”Immunol Lett.. 81. 107-113 (2002)

Yamaguchi T.: "Enhancement of thymidine kinase-mediated killing of malignant glioma by BimS, a BH3-only cell death activator"Gene Therapy. (in press).

Yamaguchi T.：“BimS（一种仅 BH3 的细胞死亡激活剂）增强胸苷激酶介导的恶性神经胶质瘤杀伤作用”基因疗法。

Asou, H.: "Establishment of the acute myeloid leukemia cell line Kasumi-6 from a patient with a dominant negative mutation in the DNA-binding region of the C/EBP・gene"Genes Chrom. & Cancer. 36. 167-174 (2003)

Asou, H.：“从 C/EBP·基因 DNA 结合区存在显性负突变的患者中建立急性髓性白血病细胞系 Kasumi-6”，《基因 Chrom》36。167-174。 (2003)