造血前駆細胞のアポトーシスを制御する新規細胞死誘導因子Bimβの機能解析

控制造血祖细胞凋亡的新型细胞死亡诱导因子 Bimβ 的功能分析

• 批准号: 13016214
• 负责人: 稲葉 俊哉
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13016214/
• 关键词: 遺伝子; 癌; アポトーシス; シグナル伝達; 発生・分化

造血前駆細胞の生存維持システムの異常は白血病の発症に直接・間接に関与するという立場から、当研究費では特にBcl-2スーパーファミリーに属するBimやその関連因子Bimβに焦点を当て研究をおこなった。BimはBH3細胞死誘導因子のメンバーであり、サイトカインによってその発現が抑制される。またBim欠損マウスは慢性骨髄性白血病(CML)様の症状を示すことから、われわれはBimのCML発症に対する関与を検討した。Bimはサイトカイン受容体からの古典的なRas/Raf/MAPK経路と、Ras/PI3-K/mTOR経路の双方により発現が制御されているが、Bcr-Ablは双方の経路を活性化することが知られているため、このキメラがBimの発現を抑制する可能性を検討した。Bcr-Ablをサイトカイン依存性細胞内で強制発現させるとサイトカイン非存在下でも細胞は増殖を続け、この際Bimの発現はほぼ完全に抑制された。ヒトCMLの急性転化由来細胞株やPh^1染色体陽性ALL由来細胞株ではPh^1染色体陰性AMLやALLに比べてBimの発現が抑制されていた。またこれらの細胞に対し、Abl特異的チロシンキナーゼ阻害剤STI571を用いてアポトーシスを誘導したところ、Bimの発現誘導が認められた。またCMLを必発するBcr-Ablトランスジェニックマウスを用いた検討を行った。このマウスは寛徐にCMLに酷似した症状を呈するモデルマウスである。正常マウス由来の骨髄細胞をサイトカイン存在下で短期培養し、幼若な造血前駆細胞を単離しサイトカイン非存在下で培養すると速やかにアポトーシスを起こすが、この際Bimの発現が誘導された。方、Bcr-Ablトランスジェニックマウス由来の細胞はサイトカイン除去によるアポトーシスに抵抗するが、この際Bimの発現誘導は抑制されていた。以上の結果よりBcr-AblによるCML発症にBimの発現抑制が関与している可能性が示された。

从造血祖细胞生存维持系统异常的角度，直接和间接地参与了白血病的发展，该研究基金的重点是BIM，该研究属于BCL-2超级家族及其相关因子BIMβ。 BIM是BH3细胞死亡诱导因子的成员，其表达被细胞因子抑制。此外，BIM缺陷小鼠表现出慢性髓样白血病（CML）类似症状，因此我们研究了BIM参与CML的发展。尽管BIM受细胞因子受体和RAS/PI3-K/MTOR途径的经典RAS/RAF/MAPK途径的调节，但已知BCR-ABL激活这两种途径，但我们研究了这种嵌合体抑制BIM表达的可能性。当BCR-ABL被迫在细胞因子依赖性细胞中表达时，即使在没有细胞因子的情况下，细胞也会继续增殖，而BIM表达几乎被完全抑制。 BIM表达在人类CML的急性转化率和源自pH^1染色体阳性的细胞系中抑制了BIM表达，而不是在pH^1染色体阴性AML和全部中。此外，当使用ABL特异性酪氨酸激酶抑制剂STI571在这些细胞中诱导凋亡时，观察到BIM表达的诱导。此外，我们使用需要CML的BCR-ABL转基因小鼠进行了一项研究。该鼠标是一种模型的小鼠，表现出类似于CML的症状。当在存在细胞因子的情况下将来自正常小鼠的骨髓细胞短时间培养时，分离出幼年造血祖细胞并在没有细胞因子的情况下培养凋亡，并迅速发生凋亡，并诱导BIM表达。然而，源自细胞因子去除引起的BCR-ABL转基因小鼠抗凋亡的细胞，但在这种情况下，BIM表达的诱导被抑制。上述结果表明，BCR-ABL引起的CML的发展可能涉及BIM表达的抑制。