课题基金 / 基金详情

新しいコレステロールプローブによる細胞機能の解析

新しいコレステロールプローブによる細胞機能の解析
使用新型胆固醇探针分析细胞功能
批准号：
08878121
负责人：
藤本 豊士
金额：
$1.09万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1996 至 1997
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08878121/
关键词：
コレステロール細胞膜カベオラキャップ形成細菌毒素培養細胞

项目摘要

项目成果

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コレステロールに特異的に結合する性質を持つθ毒素を部分分解し、さらにビオチン化したプローブ(BCθ)を用い、培養上皮細胞、リンパ球の細胞膜におけるコレステロール分付、さらに未固定の細胞で細胞膜のコレステロールを架橋した際の挙動について検索した。固定した上皮細胞ではBCθは細胞膜全域に結合した。この結合はフィリピン、ジギトニンなどで阻害されコレステロール特異的であることが確かめられた。無固定の上皮細胞に氷温でBCθを作用、蛍光などで標識したアビジンで可視化すると、標識は細胞表面にほぼ一定の密度で結合した。BCθと標識アビジンを結合させた後に37℃に浸漬すると、標識はカベオラ付近の細胞膜に集中し、少なくともその一部はカベオラから取り込まれてエンドソームに到達した。一方、リンパ球では、氷温で作用させたBCθは細胞表面にほぼ一定の密度で結合したが、BCθと標識アビジンを結合させた後に37℃に浸漬すると、標識はキャップを形成した。キャップ形成はサイトカラシンやアジ化ナトリウムで阻害されたが、コルヒチンでは阻害されなかった。今回の実験によりBCθで標識される細胞膜コレステロール分子は膜全域にほぼ均一に分布するが、架橋の結果、カベオラをもつ細胞ではカベオラに集中し、またカベオラのないリンパ球ではキャップを形成することが明らかになった。この分布変化の様式はGPI結合型膜蛋白質、糖脂質、スフィンゴミエリンの場合と同じである。
期刊论文(0)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Fujimoto,T and K.Fujimoto: "Metal sandwich method to quick-preegl monolayer culoured cells for freeze fyracture." J.Histochem.Cytochem.45. 595-598 (1997)
Fujimoto,T 和 K.Fujimoto：“金属夹心法快速预浸单层培养细胞以进行冷冻断裂。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Elucidation of nuclear lipid droplet functions
  • 批准号：
    22H00446
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
  • 资助金额：
    $26.96万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    藤本 豊士
  • 依托单位：
    Juntendo University
がん細胞の増殖,浸潤機構と脂質ドメイン
  • 批准号：
    20013018
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $9.41万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    藤本 豊士
  • 依托单位：
    Nagoya University
定量的可視化法による癌細胞でのラフト破綻の解析
  • 批准号：
    18013024
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $5.44万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    藤本 豊士
  • 依托单位：
    Nagoya University
イノシトール燐脂質分布の定量的解析
  • 批准号：
    18050012
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $3.84万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    藤本 豊士
  • 依托单位：
    Nagoya University
海外基金