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がんの免疫遺伝子治療への応用をめざしたEBウイルスベクターの開発

开发用于癌症免疫基因治疗的 EB 病毒载体

基本信息

批准号：
16023204
负责人：
神田輝
金额：
$ 2.88万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

研究代表者らが開発したAK-BACシステムは、約170キロベースのサイズを有するEBウイルスゲノムを大腸菌内の相同組換え法により改変し、組換えウイルス産生を行なう新しい方法である。このシステムを応用して、任意の腫瘍特異抗原を組み込んだEBウイルスベクターを産生可能である。そこで広範ながん細胞に高発現が認められる腫瘍特異抗原Muc 1ムチンを標的とする免疫療法の開発を念頭におき、Muc 1の遺伝子を組み込んだ組換えEBウイルスベクターを産生した。これを用いて健常人ドナーの末梢血Bリンパ球を試験管内でトランスフォームして、Muc 1発現リンパ芽球様細胞株(lymphoblastoid cell line、LCL)を樹立した。こうして樹立したMuc 1発現LCLを抗原提示細胞として用いることで、Muc 1特異的な自己由来の細胞傷害性T細胞(CTL)を誘導できるか検討した。すなわち放射線照射不活化したMuc 1発現LCLを同一人由来の末梢血単核球と8日間共培養し、得られたエフェクター細胞の細胞傷害活性をMuc 1発現LCLおよび非発現LCLをターゲット細胞として調べた。その結果、エフェクター細胞中にMuc 1発現細胞に対して特異的なCTL活性を認めた。以上より、EBウイルスベクターを用いて樹立した腫瘍特異抗原発現LCLが抗原提示細胞として機能すること、およびこれを用いて腫瘍特異抗原に特異的なCTLを誘導可能であることが示された。

The representative of the research conducted a wide range of AK-BAC training programs, about 170,000 yuan per month, and the same method was used to improve the quality of the bacteria, and the new method was used to improve the quality of the students. Please do not use any specific antigens. Do not use EB antigens. Please do not know if there is any possibility of infection. The specific antigens of Muc-1 were detected by immunoimmunoassay, while those of EB-1 and EB-1 were detected by Elisa and Elisa respectively. The peripheral blood B cells were detected in normal people, and the spore cell lines (lymphoblastoid cell line, LCL) were detected in Muc 1. The detection of LCL antigen in Muc 1 prompted the cell to use the specific CTL of Muc 1 to guide the immune response. Radiation did not activate Muc 1. LCL was found in the same person. After 8 days of co-culture of peripheral blood nuclear globules, the cytotoxic activity of Muc 1 was not detectable in LCL. Cell culture showed that LCL was not detected. The results showed that the activity of Muc in the cell was significantly higher than that in the control cell (CTL 1). The above-mentioned and EB-specific antigens are used to detect LCL antigens. Cell-specific antigens are used to detect LCL antigens, and the CTL spools that are used to detect specific antigens may be displayed.