新規制癌剤エチニルシチジンによる放射線誘導性血管成長因子の発現抑制と放射線増感

新监管癌症药物乙炔胞苷抑制辐射诱导的血管生长因子表达和放射增敏

• 批准号: 16023206
• 负责人: 桑原 幹典
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16023206/
• 关键词: 放射線; 増感; アポトーシス; エチニルシチジン; 制癌剤; 血管増殖因子; 移植腫瘍; RT-PCR

ヒト胃癌株化細胞MKN45(p53野生型)とMKN28(p53変異型)、マウス大腸癌株化細胞Colone26 p53 status不明)の培養系でエチニルシチジン1-(3-C-ethynyl-β-D-ribo-pentofuranosyl)cytosine(ECyd、TAS106)とX線照射を組み合わせてアポトーシス誘導、G2/M期チェック機能に係わるCyclin B1、Cdc2、Wee1の活性化とこれと連携してアポトーシス抑制に係わるSurvivinの発現を観察した。以上の実験から、培養細胞系でX線照射あるいはECyd単独処理ではほとんど見られないアポトーシス誘導が同時併用処理により強く誘導されることが判明した。さらに、増殖死の線量効果曲線においても同時併用処理は強い増感効果を示した。これらは全てECydによるG2/M期チェック機能蛋白質活性化の抑制とSurvivinの発現抑制に依るものであることが判明した。このことから、アポトーシス増感はそのまま増殖死増感に反映されたものと見なされた。したがって、本方法が実際の治療に応用可能であることが示唆された。このことを実証するため、マウス大腸癌株化細胞Colone26をマウス後肢底に移植した固形腫瘍モデルを用い、移植10日後に2GyX線照射と0.1mg/kgECyd投与を行った。それぞれ単独処理ではほとんど腫瘍成長に影響を与えなかったが、それらを組み合わせた方法では顕著な成長抑制を示し、3回の繰り返し処理では約半数の腫瘍においてほぼ完全な抑制が観察された。腫瘍成長には血管内皮細胞と腫瘍細胞との相互作用が重要であり、またX線照射は内皮細胞における血管成長因子の発現を亢進することから、ECydが血管成長因子発現の抑制により顕著な抗腫瘍効果が起こると仮定し、組織学的検査ならびにVEGFmRNA発現の測定を行った。併用処理を行った腫瘍の1日後の電子顕微鏡像では、内皮、腫瘍細胞それぞれに細胞萎縮、泡沫を含んだ突起形成等アポトーシス初期像が観察されており、両細胞とも腫瘍成長のの抑制に係わっていることが明らかになったが、RT-PCRによりVEGF120、164、188のmRNA発現の定量測定を行ったところ、X線照射のみとX線照射とECyd処理を組み合わせた場合とではそれらの発現量に差は小さく、ECydが血管成長因子の発現抑制に関与しているとは結論できなかった。

Culture lines of gastric cancer cell line MKN45 (p53 wild-type), MKN28 (p53 variant), colon cancer cell line Colony 26 (p53 status unknown)(3-C-ethyl-β-D-ribo-pentofuranosyl)cytosine(ECyd, TAS106) and X-ray irradiation were combined to induce apoptosis, G2/M phase apoptosis and functional activation of Cyclin B1, Cdc2, Wee1. The above results show that the cell lines are induced by X-ray irradiation alone. In addition, the increase in the number of lines in the curve and the increase in the number of lines in the curve and the increase in the number of lines in the curve are also used to indicate the increase in the number of lines. The inhibition of activation and development of Survivin functional proteins in G2/M phase was identified. This is the first time I've ever seen a woman. This method can be used in the treatment of patients. Colorectal cancer cell line Colon26 was transplanted at the bottom of the hind limb. 10 days after transplantation, 2 Gy X-ray irradiation and 0.1 mg/kg ECyd were administered. In addition, the growth inhibition effect of single treatment and combination of treatment was completely inhibited by about half of the total growth inhibition. The interaction between vascular endothelial cells and tumor cells plays an important role in tumor growth. X-ray irradiation increases the expression of vascular growth factor in endothelial cells. ECyd inhibits the expression of vascular growth factor. Histological examination and measurement of VEGF mRNA expression are also performed. One day after treatment, electron microscopy was used to detect the initial phase of tumor growth, such as cell atrophy, foam formation, etc., and RT-PCR was used to quantitatively detect the mRNA expression of VEGF120, 164, and 188. X-ray irradiation and ECyd treatment are combined to form a small difference between the amount of X-ray irradiation and ECyd treatment and to inhibit the expression of vascular growth factor.

项目成果

A novel anticancer ribonucleoside,1-(3-C-ethynyl-β-D-ribo-pentofuranosyl)cytosine, radiosensitizes apoptosis in tumor cells.

一种新型抗癌核糖核苷，1-(3-C-乙炔基-β-D-核糖-呋喃戊糖基)胞嘧啶，可对肿瘤细胞中的细胞凋亡进行放射增敏。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Radiation Research 162
• 作者: Inanami;O.;Iizuka;D.;Iwahara;A.;Yamamori;T.;Kon;Y.;Asanuma;T.;Matsuda;A.;Kashiwakura;I.;Kitazato;K.;Kuwabara;M.
• 通讯作者: M.

Activation of c-kit by stem cell factor induces radioresistance to apoptosis through ERK-dependent expression of survivin in HL60 cells

• DOI: 10.1269/jrr.45.557
• 发表时间: 2004-12-01
• 期刊: JOURNAL OF RADIATION RESEARCH
• 影响因子: 2
• 作者: Hosseinimehr, SJ;Inanami, O;Kuwabara, M
• 通讯作者: Kuwabara, M

Different radiosensitive megakaryocytic progenitor cells exist in steady-state human peripheral blood

• DOI: 10.1667/rr3396
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: RADIATION RESEARCH
• 影响因子: 3.4
• 作者: Kashiwakura, I;Inanami, O;Kuwabara, M
• 通讯作者: Kuwabara, M

X irradiation induces the proapoptotic state independent of the loss of clonogenic ability in Chinese hamster V79 cells

• DOI: 10.1667/rr3393
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: RADIATION RESEARCH
• 影响因子: 3.4
• 作者: Iizuka, D;Inanami, O;Kuwabara, M
• 通讯作者: Kuwabara, M

Decreased apoptosis of β-integrin-deficient bovine neutrophils.

减少β-整合素缺陷的牛中性粒细胞的凋亡。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Immunology and Cell Biology 82
• 作者: Nagahata;H.;Higuchi;H.;Teraoka;H.;Takahashi;K.;Inanami;O.;Kuwabara;M.
• 通讯作者: M.