权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

小胞体膜近傍の微小環境による、細胞内カルシウム放出チャネルの活性制御メカニズム

内质网膜附近微环境控制细胞内钙释放通道活性的机制

基本信息

批准号：
16048204
负责人：
服部光治
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16048204/
关键词：
カルシウム受容体チャネル蛋白質レドックス小胞体

项目摘要

細胞質におけるカルシウム濃度は百種類以上の蛋白質分子の活性制御機構に関与しており、その時間的・空間的制御は細胞機能に必須である。イノシトール1,4,5三リン酸(IP3)受容体は小胞体からのカルシウム放出を担う主要なチャネル蛋白質である。IP3受容体が細胞質側から様々な制御を受けていることは良く知られているが、小胞体内腔側からも制御されているか否かは、その機構が不明なことから長い間論争となってきた。我々は生化学的手法によってIP3受容体の小胞体内腔側ループに結合する蛋白質ERp44を同定した。我々はまず、免疫沈降実験やリコンビナント蛋白質を用いた結合実験を詳細に行い、以下のことを見いだした。(1)ERp44はIP3受容体タイプ1のL3V領域に結合するが、タイプ2やタイプ3には結合しない。(2)ERp44とIP3受容体間の結合は、酸化条件下では非常に弱く、還元条件下で強い。(3)両者の結合はpHが低いほうが強くなる。(4)両者の結合はカルシウム濃度が100μMを超えると徐々に弱くなる。(4)ERp44のチオレドキシン様領域は結合にほとんど関与しない。以上の結果から、ERp44とIP3受容体タイプ1の結合は安定的なものというよりは、細胞の状態・環境に応じて変化するものであることが強く示唆された。また、カルシウムイメージング実験及び人工脂質二重膜に埋め込んだIP3受容体タイプ1を用いた電気生理学的実験から、ERp44は小胞体内腔のレドックス状態・カルシウム濃度・pH変化に依存してIP3受容体の活性を制御していることが示唆された。これは小胞体内腔からのIP3受容体の機能調節機構を明確に示した最初の例であると考えられる。

Cytoplasm におけるカルシウはム concentration more than hundred kinds の protein molecules の active system of imperial institutions に masato and しており, その time, space function of the system of imperial は cells に must である. イノシトール 1 three, four, five リン acid (IP3) by the capacity of body は small cell body からのカルシウム release を bear う main なチャネル protein である. IP3 が cytoplasm by let body side から others 々な suppression を by けていることは good く know られているが, small cell in the body cavity side からも suppression されているか no かは, その institutions が unknown なことから long debate between いとなってきた. I used the 々する biochemical technique to によってIP3 receptor <s:1> small cell lumen side <s:1> プに to bind the する protein ERp44を to <s:1> たた. I 々はまず, immune sink be 験やリコンビナント protein をいた combination be 験をにい, detailed below のことを see いだした. (1) ERp44 は IP3 by let body タイプ 1 の L3V fields にするが, タイプ 2 やタイプ 3 には combining しない. (2)ERp44とIP3 interacceptor <s:1> binding <e:1>, でで is very に weak く under acidification conditions, and で is strong で under reducing conditions. (3) The <s:1> combination of the two has a が low がほうが strong くなる. (4) The concentrations of the two are が, カ, シウム, シウム, が at 100μMを, which is over えると, and 々に, which is weak くなる. (4)ERp44 チ, レドキシ, レドキシ, the domain of チ is combined with にほとん, にほとん and な, な. の above results から, ERp44 と IP3 by let body タイプの 1 conjugate は stable なものというよりは, cell の state environmental に応じて variations change するものであることがく and shown strong sucking された. また, カルシウムイメージング be 験 bilayer lipid double membrane and びに buried め込んだ IP3 by let body タイプ 1 を with いた electric 気 physiology be 験から, ERp44 は small cell in the body cavity のレドックス state · カルシウム concentration, pH variations change に dependent して IP3 の activity by let body を suppression していることが in stopping された. The intracellular cavity of the <s:1> れれ small cell ら <s:1> the functional regulatory mechanism of the <s:1> IP3 receptor を is clearly indicated に the <s:1> たた the initial <s:1> case であると examines えられる.