Syntaxin18複合体:膜輸送とシグナル伝達のインターフェイス

Syntaxin18 复合体：膜运输和信号转导的界面

• 批准号: 17048030
• 负责人: 多賀谷 光男
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17048030/
• 关键词: SNARE; Syntaxin18; ZW10; RINT-1; p31(Use1p); 小胞輸送

真核細胞における小胞とターゲット膜の融合には、SNAREと呼ばれるα-ヘリックス構造を有する膜タンパク質が関与する。膜融合は、SNARE由来の4本のα-ヘリックス(Qa、Qb、Qc、R)が強固に結合することで引き起こされると考えられている。我々は哺乳類細胞の小胞体膜に存在するsyntaxin18(Syn18)を同定し、Syn18(Qa)がBNIP1(Qb)、p31(Qc)、Sec22b(R)と結合していることを明らかにした。本年度は、このSNARE複合体に関して以下の成果を得た。1)SNAREサブユニットの大腸菌での発現と精製膜貫通領域を欠失させたSNAREを大腸菌で発現させ、精製した。Syntaxinはそのアミノ末端ドメイン(NRD)が、自身のC末端側のα-ヘリックス(SNAREモチーフ)と結合して閉じた構造をとることが知られており、この性質によって他のSNAREとの結合が調節されているので、Syn18の場合はNRDも欠失させた変異体(ΔN-Syn18)を発現・精製した。2)SNAREサブユニット間の結合とコンフォメーション変化最初にSyn18と他のSNAREの結合を確かめた。次に、ΔN-Syn18とSNAREの結合解析を行ったところ、Sec22bとは強く結合し、p31とは弱く、BNIP1とは結合しないことが判明した。一方、Sec22bが存在すると、p31およびBNIP1はΔN-Syn18と強く結合した。CDを用いて解析した結果、ΔN-Syn18はSec22bが存在するとα-ヘリックス含量が増加することが判明した。このような変化はBNIP1やp31では誘起されず、Sec22bがSyn18の「誘導適合」を特異的に引き起こすことが判明した。3)SNAREの構造解析X線小角散乱およびNRRを用い、p31およびBNIP1の構造解析に着手した。研究協力者:上田淑子(東京薬科大学・生命科学部・プロジェクト研究員)

Eukaryotic cells に お け る vesicular と タ ー ゲ ッ の ト membrane fusion に は and c2-style と shout ば れ る alpha ヘ リ ッ ク ス a す を construction る membrane タ ン パ ク qualitative が masato and す る. Membrane fusion は, c2-style origin の 4 this の alpha ヘ リ ッ ク ス (Qa, Qb, Qc, R) が strong に combining す る こ と で lead き up こ さ れ る と exam え ら れ て い る. I 々 は mammalian cell の small cell body membrane に exist す る syntaxin18 (Syn18) を し, Syn18 (Qa) が BNIP1 (Qb), p31 (Qc), Sec22b (R) と し て い る こ と を Ming ら か に し た. For the current year, the <s:1> achievements を below て related to the て of the に and <s:1> <s:1> SNARE complex に are た. 1) c2-style サ ブ ユ ニ ッ ト の coliform で の 発 と refined transmembrane domain を owe now lost さ せ た c2-style を coliform で 発 now さ せ, refined し た. Syntaxin は そ の ア ミ ノ end ド メ イ ン (NRD) が, own の C terminal side の alpha ヘ リ ッ ク ス (c2-style モ チ ー フ) と combining し て closed じ た tectonic を と る こ と が know ら れ て お り, こ の nature に よ っ て he の c2-style と の combining が regulating さ れ て い る の で, Syn18 の occasions は NRD も owe Loss of させた variant (ΔN-Syn18)を occurrence · refinement た た. 2) c2-style サ ブ ユ ニ ッ ト の combination between と コ ン フ ォ メ ー シ ョ ン - the initial に Syn18 と he の c2-style の combining を か indeed め た. に, Δ N - Syn18 と c2-style の line combines analytic を っ た と こ ろ, Sec22b と は く combining し, p31 と は weak く BNIP1 と は combining し な い こ と が.at し た. One side, Sec22bが has すると, p31およびBNIP1 た ΔN-Syn18と strong く binding た. CD を with い て parsing し た results, Δ N - Syn18 は Sec22b が exist す る と alpha ヘ リ ッ ク が ス content rights and す る こ と が.at し た. こ の よ う な variations change は BNIP1 や p31 で は induced さ れ ず, Sec22b が Syn18 の induced "fit" を specific に lead き up こ す こ と が.at し た. 3)SNARE snare construction analysis: X-ray small Angle dispersion およびNRRを use および, p31および, BNIP1 snare construction analysis に start with た た. Research co-author: Shuko Ueda (Researcher, Department of Life Sciences, Tokyo University of Pharmacy, プロジェ ト ト)

项目成果

Dominant-negative effect of mutant valosin-containing protein in aggresome formation.

突变型缬洛辛蛋白在聚集体形成中的显性负效应。

• 发表时间: 2006
• 期刊: FEBS Lett. 580
• 作者: Kitami;M.I.;Kitami;T.;Nagahama;M.;Tagaya;M.;Hori;S.;Kakizuka;A.;Mizuno;Y.;Hattori;N.
• 通讯作者: N.

The AAA-ATPase NVL2 is a component of pre-ribosomal particles that interacts with the DExD/H-box RNA helicase DOB1.

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2006.06.017
• 发表时间: 2006-08
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: M. Nagahama;Takeshi Yamazoe;Y. Hara;K. Tani;A. Tsuji;M. Tagaya

p125 Is Localized in Endoplasmic Reticulum Exit Sites and Involved in Their Organization*

• DOI: 10.1074/jbc.m409673200
• 发表时间: 2005-03
• 期刊: Journal of Biological Chemistry
• 影响因子: 4.8
• 作者: Wakako Shimoi;Ichiko Ezawa;K. Nakamoto;Shihoko Uesaki;Gavin Gabreski;M. Aridor;A. Yamamoto;M. Nagahama;M. Tagaya;K. Tani

Reticulon 3 is involved in membrane trafficking between the endoplasmic reticulum and Golgi

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2005.07.012
• 发表时间: 2005-09-09
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Wakana, Y;Koyama, S;Tagaya, M
• 通讯作者: Tagaya, M

Nordihydroguaiaretic acid affects multiple dynein-dynactin functions in interphase and mitotic cells

• DOI: 10.1124/mol.106.029611
• 发表时间: 2007-02-01
• 期刊: MOLECULAR PHARMACOLOGY
• 影响因子: 3.6
• 作者: Arasaki, Kohei;Tani, Katsuko;Tagaya, Mitsuo
• 通讯作者: Tagaya, Mitsuo