アポトーシスと膜融合のクロストーク

细胞凋亡和膜融合之间的串扰

基本信息

批准号：
16657039
负责人：
多賀谷光男
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16657039/
关键词：
BNIP1 小胞体アポトーシス Mcl-1 ノックアウトマウス小胞輸送 α-SNAP syntaxin18

项目摘要

BNIP1は、アデノウイルスのコードするアポトーシス抑制タンパク質E1B 19kDaタンパク質と結合するタンパク質として同定されていたが、最近、我々はBNIP1が小胞体膜の融合を司るSyn18複合体のサブユニットであり、BNIP1は小胞体膜融合を直接司るタンパク質であることを明らかにした。また、アポトーシスを誘導するドメイン(BH3ドメイン)がα-SNAPとの結合に関与していることも示した。本年度は以下の成果を得ている。1)BNIP1による小胞体カルシウム貯蔵量の調節の可能性:近年、ある種の小胞体膜タンパク質は小胞体内のカルシウム量を調節することで、アポトーシスを促進することが報告されている。そこで、BNIP1の発現をRNAi法によって抑制し、小胞体内のカルシウム量変化を調べたが特に変化は認められなかった。2)BNIP1と相互作用するタンパク質の同定:BNIP1をベイトとして用いた酵母two-hybridスクリーニングによって、BNIP1がアポトーシス抑制タンパク質であるMcl-1や小胞体からのタンパク質輸送のための受容体として働いているp24と相互作用していることを見い出した。3)BNIP1ノックアウトマウスの作製:BNIP1の機能を個体レベルで検証するためにノックアウトマウスを構築した。BNIP1ノックアウトマウスは胎生致死であり、その機能が発生の非常に初期の段階で必要であることが示された。現在、神経や肝臓でのCre/Lox系を用いたコンディショナルノックアウトを行っている。

BNIP1已被鉴定为与腺病毒编码的凋亡抑制蛋白结合的蛋白质，但最近我们透露，BNIP1是Syn18复合物的亚基，它控制着控制内质网膜的内质膜和bnip1的融合的融合，它是一种直接的静脉融合。还表明诱导凋亡（BH3结构域）的结构域与α-SNAP结合涉及。今年，我们获得了以下结果：1）BNIP1诱导的网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状视网膜网状视网膜网状视网膜网状视网膜网状视网膜网状视网膜网状视网膜网状视网膜网状视网膜网状视网膜网状视网膜网状视网膜视评性结果性视网膜视网膜视网膜视网膜视》》的结果视网膜视网膜视网膜网状视网膜网状视网膜视网膜网状视网膜网状视网膜网状视网膜视网膜网状视网膜视网膜视网膜带状视网状的结果》网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状视网膜网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状视网膜电网图学市视学市视学视学市员学报的网状网网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状网状表达被RNAi方法抑制，并且检查了内质网中钙含量的变化，但未观察到特定的变化。 2）鉴定与BNIP1相互作用的蛋白质：通过使用BNIP1作为诱饵的酵母两杂化筛选，我们发现BNIP1与MCL-1，凋亡抑制蛋白和p24相互作用，这些蛋白质是从腹膜肿瘤的蛋白质转运的受体。 3）创建BNIP1基因敲除小鼠：构造基因敲除小鼠以验证BNIP1在单个级别上的功能。 BNIP1敲除小鼠是胚胎致死的，其功能被证明是在发育的早期阶段所需的。当前，使用神经和肝脏中的CRE/LOX系统进行有条件的敲除。