1分子・1細胞レベルでの酵母プリオンのダイナミクス観察

单分子和单细胞水平的酵母朊病毒动力学观察

• 批准号: 18031007
• 负责人: 田口 英樹
• 金额: $ 8.26万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18031007/
• 关键词: タンパク質; シャペロン; フォールディング; プリオン; アミロイド; 1分子; 出芽酵母; 凝集

プリオンとは蛋白質性の感染因子である。プリオンでは、異常型蛋白質(プリオン)はアミロイド線維様の凝集状態であり、そのアミロイド凝集体は自己触媒的に正常型(モノマー)をアミロイド様の凝集状態に構造転換さる。そのアミロイド様の凝集構造がどのように形成されるのか、またプリオンが細胞内でどのように伝播していくのか、に関して詳細はいまだ不明である。その一つの理由としては、従来の生化学・細胞生物学的な手法では多くの線維や細胞の平均を見るだけなので個別の情報が得られず、詳細を知るには限界がある点が挙げられる。そのような状況において、我々は安全な出芽酵母のプリオン現象をモデルにしてプリオン線維の成長を一本一本観察する実験系の確立、X線線維回折実験による線維構造のβヘリックスモデルの提案などを行ってきた。特に最近では、in vitro、in vivo両面において、一個一個の正常型蛋白質が線維に取り込まれるようすやプリオンが細胞内で伝搬していくようすを「生きたまま」個別に観察してプリオン現象を分子レベルで理解することを目的としている。本特定領域による19年度の成果としては、(in vitro)線維末端に1分子1分子の酵母プリオン蛋白質Sup35が付加していくようすを実時間で観察することに成功し、その結果を速度論的に解析した。これにより、線維末端での構造変換にかかる時間が推定できた。(in vivo)細胞内でのプリオン蛋白質によるアミロイドを単離精製する条件を探索した。プリオンのオリゴマーがどのようなメカニズムで娘細胞に伝播するのかについて調べる実験系を構築した。

Youdaoplaceholder0, プリ と, と, と protein-based infectious factors である. プ リ オ ン で は type, abnormal protein (プ リ オ ン) は ア ミ ロ イ ド line d others の aggregation state で あ り, そ の ア ミ ロ イ ド coagulation collective は their catalytic に normal type (モ ノ マ ー) を ア ミ ロ イ ド others の aggregation state に construction planning in さ る. そ の ア ミ ロ イ ド others の aggregation structure が ど の よ う に form さ れ る の か, ま た プ リ オ ン が intracellular で ど の よ う に 伝 sowing し て い く の か, に masato し て detailed は い ま だ unknown で あ る. そ の a つ の reason と し て は, 従 の biochemistry, cell biology な gimmick で は more く の line d や cells の average を see る だ け な の で individual の intelligence が ら れ ず, detailed を know る に は limit が あ る point が 挙 げ ら れ る. そ の よ う な condition に お い て, I 々 は security な budding yeast の プ リ オ ン phenomenon を モ デ ル に し て プ リ オ ン line one by one the d の growth を 観 examine す る be 験 の establishment, X lines d back into the fold be 験 に よ る line dimension structure の beta ヘ リ ッ ク ス モ デ ル の proposal な ど を line っ て き た. Recently, に で は, in vitro and in vivo struck surface に お い て, a type a の normal protein が line d に take り 込 ま れ る よ う す や プ リ オ ン が intracellular で 伝 move し て い く よ う す を "き た ま ま" individual に 観 examine し て プ リ オ ン phenomenon を molecular レ ベ ル understand で す る こ と を purpose と し て い る. Particular field に よ る 19th annual の results と し て は, (in vitro) end of the line d に 1 1 molecules の yeast プ リ オ ン protein Sup35 が plus し て い く よ う す を be time で す was 観 る こ と に successful し, そ の results を speed theory analytical し に た. Youdaoplaceholder2 れによ, the structural change at the end of the line dimension で <s:1> に る る time が is estimated to be で た た. (in vivo) Intracellular で で プリ プリ を <s:1> protein によるア する ロ ドを単 ドを単 する refinement する conditions を explore た た. プ リ オ ン の オ リ ゴ マ ー が ど の よ う な メ カ ニ ズ ム で niang cells に 伝 sowing す る の か に つ い て adjustable べ る be 験 department を build し た.

项目成果

細胞内での酵母プリオンの増殖および伝搬機構

细胞内酵母朊病毒的生长和繁殖机制

• 发表时间: 2007
• 作者: 小池 あゆみ;吉田 賢右;田口 英樹;田口 英樹;田口 英樹;田口 英樹
• 通讯作者: 田口 英樹

ナノバイオ計測の実際

实际纳米生物测量

• 发表时间: 2007
• 作者: 三原久和;小畠英理;馬場嘉信
• 通讯作者: 馬場嘉信

タンパク質の一生集中マスター 細胞における成熟・輸送・品質管理

终生掌握细胞内蛋白质的成熟、运输和质量控制

• 发表时间: 2007
• 作者: 遠藤斗志也;吉久徹;森和俊;田口英樹
• 通讯作者: 田口英樹

Role of Chaperonin GroEL on the folding of newly translated polypeptides

Chaperonin GroEL 对新翻译多肽折叠的作用

• 发表时间: 2007
• 作者: 小池 あゆみ;吉田 賢右;田口 英樹;田口 英樹
• 通讯作者: 田口 英樹

Dynamics of yeast prion aggregates in single living cells

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2006.01004.x
• 发表时间: 2006-09-01
• 期刊: GENES TO CELLS
• 影响因子: 2.1
• 作者: Kawai-Noma, Shigeko;Ayano, Satoru;Taguchi, Hideki
• 通讯作者: Taguchi, Hideki