caspaseの細胞増殖および分化制御における本質的生理機能の解析

Caspases控制细胞增殖和分化的基本生理功能分析

• 批准号: 19044021
• 负责人: 米原 伸
• 金额: $ 3.9万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19044021/
• 关键词: 遺伝子; 細胞・組織; シグナル伝達; 蛋白質

Death receptor Fasを介するアポトーシスでは、開始caspaseとしてcaspase-8が機能するが、ノックアウトマウスの解析から、caspase-8は胎生期の心臓の発生や免疫担当細胞の増殖や分化に関与することが示唆されていた。そこで、caspase-8やそのホモログでヒトには存在するがマウスには存在しないcaspase-10の免疫系のT細胞での機能を明らかにすることを目的に解析を行った。まず、caspaseの発現抑制を誘導する系を構築するため、shRNAの発現を誘導する系を確立した。テトラサイクリンの処理で発現が誘導できるTet-ONのシステムを用いることにより、レンチウイルスベクターによるshRNA発現誘導系を確立した。つぎに確立したshRNA発現誘導系を用いることによって、マウスTリンフォーマ由来L5178Y細胞においてcaspase-8の発現抑制を誘導できる細胞株を作製した。その結果、doxycycline処理によってcaspase-8の発現抑制を誘導することによって、L5178Y細胞は細胞増殖の停止と細胞死の誘導が引き起こされた。この分子機構を明らかにするために、外来性のcaspase-8およびその各種変異体を発現させることによって、内在性caspase-8の発現抑制による細胞増殖の停止や細胞死の誘導が阻害されるかを解析した。その結果、ワイルドタイプcaspase-8や、前駆体から活性化型に変換するときに切断されるサイトを変異させた活性化型に変換できないcaspase-8変異体の発現で、細胞増殖と生存が回復することが明らかとなった。一方、プロテアーゼの活性中心であるシステイン残基をセリン残基に変異させたプロテアーゼ活性を持たないcaspase-8では回復させることができなかった。caspase-8前駆体のプロテアーゼ活性がT細胞の増殖と線損維持に必要であることが示された。

Death receptor Fas expression is related to the initiation of caspase-8 function, its resolution, caspase-8 development during fetal life, and the proliferation and differentiation of immune-responsible cells. Caspase-10 is the most important component of the immune system. The expression of caspase was induced by the expression of shRNA. Tet-ON shRNA induction system was established for the treatment of Tet-ON shRNA. The expression of caspase-8 was inhibited in L5178Y cells. As a result, doxycycline treatment induced inhibition of caspase-8 production, and induction of cell proliferation and cell death in L5178Y cells. The molecular mechanism of caspase-8 is analyzed in the following ways: expression of exogenous caspase-8, inhibition of expression of endogenous caspase-8, inhibition of cell proliferation, and induction of cell death. As a result, caspase-8 was activated, and the precursor was cut off, and caspase-8 was activated, and cell proliferation and survival were restored. The active center of a protein is called a protein. Caspase-8 precursor activation is essential for T cell proliferation and line damage maintenance.

项目成果

Fas下流シグナル分子の多様な生理機能

Fas下游信号分子的多种生理功能

• 发表时间: 2007
• 作者: Takahashi K;Kawai T;Kumar H;Sato S;Yonehara S;Akira S;米原 伸
• 通讯作者: 米原 伸

Mechanism of SKI cell activation by intranasal coadministration of α-galactosylceramide, which can induce cross-protection against influenza viruses

鼻内同时给予α-半乳糖神经酰胺激活SKI细胞的机制，可诱导针对流感病毒的交叉保护

• 发表时间: 2008
• 期刊: Mucosal Immunology 1
• 作者: Kamijuku H;Nagata Y. Jiang X. Ichinohe T. TashiroT;Mori K. Taniguchi M. Hase K;Ohno H;Shimaoka T. Yonehara S;(Magid T;Tashiro II;Sara T. Hasegawa H;Seino K
• 通讯作者: Seino K

Novel cell death by downregulation of eEFlAl expression in tetranloids

四类体中 eEF1A1 表达下调引起的新型细胞死亡

• 发表时间: 2009
• 期刊: Cell Death and Differentiation 16
• 作者: Kobayashi Y;and Yonehara S
• 通讯作者: and Yonehara S

Serine protease Omi/HtrA2 targets WARTS kinase to control cell proliferation

• DOI: 10.1038/sj.onc.1210042
• 发表时间: 2007-04-12
• 期刊: ONCOGENE
• 影响因子: 8
• 作者: Kuninaka, S.;Iida, S-I;Saya, H.
• 通讯作者: Saya, H.

Critical role for CXC chemokine ligand 16 (SR-PSOX) in Th1 response mediated by NKT cells

• DOI: 10.4049/jimmunol.179.12.8172
• 发表时间: 2007-12-15
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.4
• 作者: Shimaoka, Takeshi;Seino, Ken-ichiro;Yonehara, Shin
• 通讯作者: Yonehara, Shin