Fasを介するアポトーシスの分子機構と生理機能の解析

Fas介导细胞凋亡的分子机制及生理功能分析

• 批准号: 10153225
• 负责人: 米原 伸
• 金额: $ 12.8万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10153225/
• 关键词: Fas; 細胞死; アポトーシス; Ras; マップキナーゼ; caspase; FLASH; マデノウイルスE1B; RAS; カスパーゼ; MST; カスパーゼ8

Fasを介するアポトーシス誘導のシグナル伝達系と、そのシグナルを阻害する細胞内分子機構を解析し、下記の諸点を明らかにした。1.Rasが、がん化していない線維芽細胞において、Fasを介するアポトーシス誘導シグナルを抑制することを明らかにし、これがRasの下流で活性化するマップキナーゼの作用によることを明らかにした。そして、この活性がFasの発現には影響を与えず、細胞内でのcaspaseの活性化を抑制することによること、Ras/MAPKを活性化させるbasic FGFの処理によってもFasを介するアポトーシス誘導が阻害されることを示した。2.caspase-8(別名FLICE)のプロドメインであるDED(death effector domain)と結合できるマウス新規分子の断片をyeast two-hybrid法によってクローニングし、この新規分子をFLASH(FLCE-associated huge protein)と命名した。Fasを介するアポトーシスはBcl-2ファミリーに属するアデノウイルスE1B19Kタンパク質によって阻害されるが、E1B19KはFLASHに結合してcaspase-8をミトコンドリア外膜にトラップすることによってFasを介するアポトーシスを抑制することを示唆する結果を得た。3.新たに作成したcaspase8遺伝子破壊マウス由来の線維芽細胞を用いることにより、Fasを介するアポトーシス誘導シグナルでは、caspase8の活性化が必要であることを証明した。

Fas induction and molecular mechanism analysis, the following points 1. Ras and Fas are involved in the induction of apoptosis in cells. The expression of Fas is affected by the activation of Ras/MAPK and the inhibition of Fas induction. 2. Caspase-8(alias FLICE) is a new molecular fragment of caspase-8 (FLCE-associated huge protein) and named FLASH(FLCE-associated huge protein). The results of the E1B19K FLASH binding and the E1B19K FLASH binding and Fas inhibition were obtained. 3. This article demonstrates that the activation of caspase 8 is necessary for the induction of caspase 8 by Fas.

项目成果

Shin Yonehara: "Fas-mediated apoptosis:Preparation of original monoclonal antibodies and biological functions. In Apoptosis:Its roles and mechanism" Buisiness Center for Academic Societies Japan. 1-15 (1998)

Shin Yonehara：“Fas介导的细胞凋亡：原始单克隆抗体的制备和生物学功能。细胞凋亡：其作用和机制”日本学术团体商业中心。

Kyung-Kwon Lee: "Purification, Molecular Cloning and Characterization of TRP32, a Novel Thioredoxin-Related Mammalian Protein of 32 kDa" J.Biol.Chem.273. 19160-19166 (1998)

Kyung-Kwon Lee：“TRP32（一种 32 kDa 的新型硫氧还蛋白相关哺乳动物蛋白）的纯化、分子克隆和表征”J.Biol.Chem.273。

Kyung-Kwon Lee: "Purification, Molecular Cloning and Characterization of TRP32, a Novel Thioredoxin-Related Manmmalian Protein of 32 kDa"J. Biol. Chem. 273. 19160-19166 (1998)

Kyung-Kwon Lee：“TRP32（一种新型 32 kDa 的硫氧还蛋白相关哺乳动物蛋白）的纯化、分子克隆和表征”J。