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比較ゲノム解析による軸決定進化プロセスの解明

通过比较基因组分析阐明轴决定进化过程

基本信息

批准号：
20017028
负责人：
松尾勲
金额：
$ 5.25万
依托单位：
Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20017028/
关键词：
マウス BAC 前後軸 Wntシグナル進化プロセスゲノム Dkk1 前脳形成

项目摘要

1、昨年度までに、カノニカルWntリガンドであるマウスWnt8Aとその拮抗因子であるDKK1を過剰に発現したマウス胚の表現型を解析した、DKK1遺伝子を過剰に発現させると前脳領域が拡大し、Wnt8Aを過剰に発現させると逆に前脳領域が縮小することを示してきた。DKK1過剰発現胚で観察された異常について、胚性8日目の細胞の性質を、形態レベルで詳細に解析したところ、前脳に隣接する表皮外胚葉が神経上皮細胞様の性質を持っことが分かった。特に、細胞分裂方向についても、詳細に解析したところ、本来表皮細胞様の単層上皮形態を維持するような分裂様式が、神経上皮様の重層又は、偽重層上皮様の形態を維持する分裂様式に変化していた。更に、どのようなシグナル経路を介して、Wntシグナルが前脳の大きさを制御しているのか明らかにするため、この時期の胚の前脳神経上皮と隣接する表皮外胚葉を用いて、mRNAを抽出しマイクロアレイ解析を行った。今後、Wntシグナルの標的分子候補や関連分子に絞って、詳細な発現解析を行う予定である。2、哺乳動物胚において、もっとも最初に前後軸決定がなされる組織は、臓側内胚葉と考えられている。現在までに、臟側内胚葉内の前後軸に沿ったWntシグナルの非対称性が、軸決定に重要な機能を果たしていることを明らかにしてきた。そこで、Wntシグナルの非対称な分布がどのような非コードゲノム機能の獲得で起こったのか解明するため、臓側内胚葉細胞の挙動を胚性5日目胚を用いてライブイメージングする系を樹立した。まず、緑色蛍光タンパク質によってCerl発現細胞を標識したトランスジェニック胚を用いて、移動中の細胞の挙動を追跡することに成功した。今後、WntやDkk1が、細胞移動に与える影響について、検討を進める。

1. In the past year, the expression of DKK1 gene has been detected, and the phenotype of Wnt8A gene has been analyzed. The expression of DKK1 gene has been detected, and the domain of Wnt8A has been detected, and the domain of Wnt8A has been reduced. DKK1 is a new type of embryo. It is observed that the embryo is abnormal. The nature and morphology of the cells on the 8th day of embryo are analyzed in detail. The nature of the epidermal ectoblast and neuroepithelial cells adjacent to the embryo is analyzed in detail. In particular, cell division direction, detailed analysis, original epidermal cell layer epithelial morphology maintenance, division pattern, neuroepithelial layer, pseudo-layer epithelial layer morphology maintenance, division pattern transformation. In addition, the expression of mRNA in the embryonic epithelium and adjacent epidermis of the embryo was analyzed. In the future, Wnt list of target molecules candidate and related molecules, detailed discovery analysis of the predetermined schedule. 2. Mammalian embryo is divided into two parts: the anteroposterior axis and the posterior axis. The anteroposterior axis in the embryo leaves along the central and visceral sides determines the important function of the embryo leaves. In addition, the non-symmetrical distribution of Wnt and Wnt in the embryo is not limited to the acquisition of the function of Wnt and Wnt. The green light is visible, the cells are visible, and the cells are visible. From now on, Wnt Dkk1, cell movement