筋強直性ジストロフィーのトリプレット・リピートがもたらす複合的遺伝子発現異常

强直性肌营养不良中三联体重复引起的复杂基因表达异常

• 批准号: 15012216
• 负责人: 笹川 昇
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15012216/
• 关键词: ゲノム; 筋強直性ジストロフィー; CTGリピート; CCTGリピート

3'側非翻訳領域やイントロン領域に遺伝子変異があり、通常の遺伝病の概念では説明できない筋強直性ジストロフィー(DM)の発症機構を解明することが当研究者における課題である。遺伝子変異はCTGトリプレット・リピートやCCTGクゥアドラプル・リピートの異常伸長で説明されるが、翻訳産物に変異が入らないにもかかわらず優性の形式で発症するため、ゲノム発現機構のレベルで発症原因が潜んでいる可能性がある。前年度までに当研究は、患者と同様の遺伝子変異を持DMモデル細胞でマイクロアレイ解析を行い、この遺伝子変異下で発現変化を起こす遺伝子群を見出している。当該年度では、データベース解析によって、これら遺伝子群が共通のプロモーター領域を持つことを示唆する結果を得た。更にこの結果を細胞レベルに還元するべく、ルシフェラーゼアッセイによるプロモーター解析を行ったところ、転写因子AP-1の活性がDMモデル細胞で減少していることを見出した。以上の結果は、前年度までのマイクロアレイ解析、およびそれを基にしたプロモーター解析を裏付ける画期的なものであり、研究代表者によるこれまでのゲノムレベルでの研究の正当性が示された。つまり、この病気で見られる非翻訳領域の変異により、転写因子AP-1の制御下にある遺伝子群の発現が減少することで、DMの筋肉、脳、神経等多くの全身的な症状が引き起こされる可能性が示唆された。また、CTGリピート、CCTGリピート(RNAではCUG、CCUG)に結合するタンパク質として知られるEXPについて、その結合特異性を詳細に解析し、明らかにすることに成功した。EXPはDM発症のキーファクターとなっている可能性があるため、その本来の機能を追究することにより、DM発症機構解明に迫るという観点からの研究も、当該研究者によって着実に前進している。

3'-side non-inverted domain, domain, genetic diversity, common genetic disease concept, explanation of the development mechanism of muscle rigidity (DM), and the subject of current researchers. The abnormal elongation of CTG and CCTG is explained by the abnormal elongation of CTG and CCTG. The abnormal elongation of CTG and CCTG is explained by the abnormal elongation of CCTG and CCTG. The abnormal elongation of CCTG and CCTG is explained by the abnormal elongation of CCTG and CCTG. In the past year, when the study was conducted, the differences between patients and their genetic variants were found in DM cells, and the differences between genetic variants were found in DM cells. When the year is over, the data analysis results are obtained, and the data analysis results are obtained. In addition, the activity of AP-1 in DM cells was reduced due to the presence of a small amount of DNA in the cells. The above results demonstrate the validity of the study conducted in the previous year by analyzing, evaluating, and evaluating the results of the study. The possibility of occurrence of multiple systemic symptoms such as DM muscle, muscle, nerve, etc. is also indicated. The binding specificity of CTG, CCTG and CCUG (RNA, CUG and CCUG) was analyzed in detail. EXP studies the possibility of DM development and its inherent function, and studies the mechanism of DM development and its implications.

项目成果

Takeshita, Y., Sasagawa, N., Usuki, F., Ishiura, S.: "Decreased expression of alpha-B-crystallin in C2C12 cells that express human DMPK/16OCTG repeats."Basic and Applied Myology. 13. 305-308 (2003)

Takeshita, Y.、Sasakawa, N.、Usuki, F.、Ishiura, S.：“表达人 DMPK/16OCTG 重复序列的 C2C12 细胞中 α-B-晶状体蛋白的表达减少。”基础和应用肌肉学。

Kino Y, Mori D, Oma Y, Takeshita Y, Sasagawa N, Ishiura S.: "Muscleblind protein, MBNL1/EXP, binds specifically to CHHG repeats."Hum Mol Genet.. 13. 495-507 (2004)

Kino Y、Mori D、Oma Y、Takeshita Y、Sasakawa N、Ishiura S.：“Muscleblind 蛋白，MBNL1/EXP，特异性结合 CHHG 重复序列。”Hum Mol Genet.. 13. 495-507 (2004)

Kino, Y., Oma, Y., Takeshita, Y., Mori, D., Sasagawa, N., Ishiura, S.: "Direct evidence that EXP/muscleblind interacts with CCUG tetranucleotide repeats"Basic and Applied Myology. 13. 293-298 (2003)

Kino, Y.、Oma, Y.、Takeshita, Y.、Mori, D.、Sasakawa, N.、Ishiura, S.：“EXP/肌盲与 CCUG 四核苷酸重复相互作用的直接证据”基础和应用肌肉学。

Oma Y, Kino Y, Sasagawa N, Ishiura S.: "Intracellular localization of homopolymeric amino acid-containing proteins expressed in mammalian cells."J Biol Chem.. (in press). (2004)

Oma Y、Kino Y、Sasakawa N、Ishiura S.：“哺乳动物细胞中表达的均聚氨基酸蛋白的细胞内定位。”J Biol Chem..（出版中）。

Sasagawa N, Kino Y, Takeshita Y, Oma Y, Ishiura S.: "Overexpression of human myotonic dystrophy protein kinase in Schizosaccharomyces pombe induces an abnormal polarized and swollen cell morphology."J Biochem (Tokyo). 134. 537-542 (2003)

Sasakawa N、Kino Y、Takeshita Y、Oma Y、Ishiura S.：“粟酒裂殖酵母中人类强直性营养不良蛋白激酶的过度表达会诱导异常的极化和肿胀的细胞形态。”J Biochem（东京）。