Funktionelle Klonierung Alzheimer relevanter Proteasen

阿尔茨海默病相关蛋白酶的功能克隆

• 批准号: 5148316
• 负责人: Professor Dr. Christian Haass
• 金额: --
• 依托单位: Lehrstuhl für Stoffwechselbiochemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1997-12-31 至 2004-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5148316?language=en
• 关键词: Funktionelle; Klonierung; Alzheimer; relevanter; Proteasen

Proteolytische Prozesse spielen bei der Alzheimer Erkrankung eine entscheidende Rolle. So entsteht das Amyloid b-Peptid (Ab) durch zwei aufeinander folgende Schnitte der b- und g-Sekretase. Während die b-Sekretase bereits identifiziert ist, fehlen noch eindeutige Hinweise auf die Identität der g-Sekretase. Es gibt zwar Hinweise, dass eventuell die Alzheimer assoziierten Preseniline identisch sind mit der g-Sekretase, aber ein eindeutiger Beweis für diese grundlegende Frage ist noch nicht erbracht. Weiterhin werden Preseniline selbst durch eine noch nicht beschriebene Protease prozessiert. Die Prozessierung der Preseniline scheint von funktioneller Bedeutung zu sein. Wir haben in den ersten zwei Jahren der Förderung ein neuartiges Screeningsystem entwickelt, mit dessen Hilfe in Hefe Proteasen, die speziell membrangebundene Substrate erkennen, identifiziert werden können. Wir wollen dieses System einsetzen, um den g-Sekretase Schnitt im Hefesystem zu rekonstituieren. Hierzu werden wir als erstes Nicastrin (ein Protein, das die Funktion der Preseniline reguliert) zusammen mit Presenilin und einem entsprechenden g-Sekretase Substrat in der Hefe co-exprimieren. Weiterhin werden wir eine menschliche cDNA Bank transformieren, um so entweder die authentische g-Sekretase oder Proteine, die für deren Funktion notwendig sind, zu isolieren. Parallel wollen wir die Presenilin Protease mit Hilfe des Hefesystems isolieren und dann in einem zweiten Schritt Regulatoren dieser Protease identifizieren und charakterisieren.

阿尔茨海默病的蛋白水解过程是一个重要的角色。因此，通过B-和g-Sekretase的两种不同的酶消化，可以得到淀粉样蛋白b-肽（Ab）。当b-Sekretase被识别出来时，我们还需要在g-Sekretase的识别上增加一个新的内容。事实上，阿尔茨海默病与老年痴呆症的关系最终是由g-Sekretase引起的，但这并不是一个简单的方法。其他韦尔登本身不能通过蛋白酶处理。老年人的工作似乎是为了他们的利益。我们在过去的二十年里开发了一种中性的筛选系统，用Hefe Proteasen提供帮助，识别特定的基底，识别韦尔登。我们希望这个系统能有一个完整的系统，以便我们能找到合适的解决方案。因此，我们将Nicastrin（一种蛋白质，其功能与早老素调节有关）与早老素和一种在Hefe中共同表达的g-Sekretase底物一起使用。另外，韦尔登将一个人类cDNA库转化为真正的G-Sekretase或Proteine，使其功能不受影响。同时，我们还将利用Hefesystemisolieren的Hefesystemisolieren和一个双Schritt调节器对早老素蛋白酶进行鉴定和特性分析。