核に存在するセラミダーゼの構造と機能(アポトーシスにおける役割)

细胞核中神经酰胺酶的结构和功能（在细胞凋亡中的作用）

• 批准号: 08877326
• 负责人: 小泉 恵子
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877326/
• 关键词: セラミダーゼ; 細胞株; アポトーシス

我々はアポトーシスにおけるセラミド分解酵素、セラミダーゼの役割に着目し研究を行っている。今回セラミダーゼに関し、以下の事柄を明らかにすることが出来た。1。セラミダーゼの分子種と細胞内局在性をラット成熟静止肝ならびにラット腹水肝癌細胞を用いて検索した。(1)静止肝では、アルカリ性セラミダーゼが細胞質上清、核および細胞膜に存在し、一方、酸性セラミダーゼがミトコンドリアならびにリソソームに存在した。(2)肝癌では、中性セラミダーゼが細胞上清ならびに細胞膜に、アルカリ性は核に、酸性はミトコンドリアおよびリソソームに存在した。2。セラミダーゼの比活性をラット成熟静止肝とラット腹水肝癌細胞で比例検討した。(1)アルカリ性セラミダーゼの比活性が、肝癌に比し静止肝の細胞質上清で特異的に高いことが判明した。(2)酸性セラミダーゼの比活性は、リソソームにおいて、アルカリ性と同様肝癌に比し静止肝の方が高かったが、アルカリ性ほど顕著な差は認められなかった。3。ラット成熟静止肝の細胞質上清で、肝癌に比し著しく高い比活性を示したアルカリ性セラミダーゼの性質を調べた。(1)ゲルろ過カラムクロマトグラフィにより、細胞質上清に存在するアルカリ性セラミダーゼの分子量は82kDa、一方、リソソームに存在する酸性セラミダーゼの分子量は100kDaであることが判明した。(2)アルカリ性セラミダーゼの至適pHは8.0、最大活性発現のためにデオキシコール酸を必要とするが、SH試薬や2価カチオンは必要としなかった。結論と今後の方針今回得られた実験結果は、癌細胞におけるアポトーシス能の消失とアルカリ性セラミダーゼ活性との関連性を強く示唆している。今後、当初考えていた核のセラミダーゼではなく、比活性が非常に高い細胞質上清のセラミダーゼに注目して研究を進めていきたい。

I told you that the enzyme was broken down, and the enzyme was cut in service to study the problem. This time, please tell me how to get out of the room. one. The cells of ascites hepatoma were induced to mature and quiescent liver, and the cells of ascites hepatoma were treated with molecular markers. (1) the supernatant of the cell, the presence of the membrane, the presence of acid, the presence of the membrane, the presence of the supernatant, the supernatant of the cell, the presence of the membrane, the presence of the cell membrane, the presence of the cell membrane and the presence of the cell membrane. (2) the supernatant of hepatoma, the supernatant of hepatoma, the cell membrane, the sexual nucleus and the presence of acid were detected in the supernatant of liver cancer. two. The proportion of ascites hepatoma cells in mature resting liver cells was significantly higher than that in normal controls. (1) the specific activity of liver cancer was higher than that of the supernatant of resting liver cells. (2) the specific activity of acid and liver cancer is higher than that of liver cancer. three. The cell supernatant of mature resting liver and the specific activity of liver cancer were higher than those of liver cancer. (1) the presence of molecular weight (82kDa) in the supernatant of the cell, the presence of molecular weight (MW), the presence of molecular weight (MW), the presence of molecular weight (MW) in the supernatant, the presence of molecular weight (MW) in the supernatant, the presence of molecular weight (MW) in the supernatant, the presence of molecular weight (MW) in the supernatant, the presence of molecular weight (MW) in the supernatant, the presence of molecular weight (MW) in the supernatant, the presence of molecular weight (MW) in the supernatant, the presence of molecular weight (MW) in the supernatant. (2) when the pH value is 8.0, the maximum activity shows that it is necessary to treat acid, while SH does not need to. Results in the future, the results showed that the cancer cells were able to lose their sexual activity, and the results showed that the cancer cells showed strong connection. Now, at the beginning of the examination, the results showed that the activity was very high, and the supernatant of the cell was very active.

项目成果

K.T-Koizumi: "Inhibition of DNA primase by sphingosine and its analogues paralles with their growth supression of cultured human leukemic cells" Biochem.Mol.Biol.Int.(in press). (1997)

K.T-Koizumi：“鞘氨醇及其类似物对 DNA 引物酶的抑制与其对培养的人类白血病细胞的生长抑制相似”Biochem.Mol.Biol.Int.（出版中）。

小泉恵子: "細胞核におけるスフィンゴミエリンならびにその分解系の存在:DNA複製調節機構との関連" 生化学. 68. 453-463 (1996)

Keiko Koizumi：“细胞核中鞘磷脂及其降解系统的存在：与 DNA 复制调节机制的关系”生物化学 68. 453-463 (1996)。

小泉恵子: "DNA複製調節機構における核リン脂質ならびにリン脂質代謝の役割" 実験医学. 14. 1974-1979 (1996)

小泉惠子：“核磷脂和磷脂代谢在DNA复制调节机制中的作用”实验医学14。1974-1979（1996）。