ラウス肉腫ウイルスによる細胞癌化初期過程の解析

劳斯肉瘤病毒诱导细胞癌变的早期过程分析

• 批准号: 01015034
• 负责人: 浜口 道成
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01015034/
• 关键词: 癌遺伝子; チロシンキナーゼ; src; リン酸化; 細胞骨格

本研究の主眼点はsrc遺伝子産物p60^<vーsrc>によってリン酸化をうける細胞蛋白質(標的蛋白質)の解析を通じてp60^<vーsrc>による細胞癌化の初期過程を系統的に解明することにある。p60^<vーsrc>の標的蛋白質として今まで10数種の既知の蛋白質が報告されているが、いずれも癌化に決定的役割を担っていないことが明らかとなった。そこで我々は、癌化に必須な標的蛋白質の同定と、その機能の解明をめざし、抗ホスフォチロシン抗体を用いて標的蛋白質の研究を行っている。本年度は以下の結果を得たので報告する。1)抗ホスフォチロシン抗体を用い、蛍光抗体法、レーザー顕微鏡によるTomographyにより標的蛋白質の細胞内局在部位を検討した。その結果(1)大半の標的蛋白質が細胞膜直下の細胞骨格に結合し存在すること、(2)一方癌化能を失ったsrc変異株感染細胞ではこの様な局在が見られぬこと、(3)標的蛋白質の結合する細胞骨格はアクチンと思われる結果を得た。以上の結果は、細胞膜裏打ち骨格が細胞癌化初期反応の場として重要な役割を果たすことを示し、また、核への癌化刺激反応は何らかの二次的反応に変換され伝わることが示唆される。2)各々の標的蛋白質に対する直接的な解析を可能にするため、モノクローナル抗体を作製しつつある。本年度は、数クローンのモノクローナル抗体を得た。3)標的蛋白質の機能を解析することを目的として生化学的実験を行い標的タンパク質画分中にセリンスレオニンキナーゼ活性を見出した。以上の結果をもとに更に詳細な標的蛋白質機能の解析を行っている。

In this study, the main focus of this study is to explain the early stage of carcinogenesis of the system by acidifying src protein (protein protein) and analyzing the process of cell carcinogenesis in the early stage of cell carcinogenesis. The main focus of this study is p60 ^ & lt; vomersrc & gt; protein. P60 ^ & lt; vs. src & gt; proteins. Today, there are more than 10 kinds of known protein reports, which are used to determine whether or not to get cancerization. The proteins that must be detected in cancerization and cancerization are the same, and the anti-tumor antibody is used to study the protein profile. The following results have been successful in this year's report. 1) Antibody antibody assay, light antibody method, microantibody assay, Tomography antibody antibody assay, antibody antibody assay, light antibody method, light antibody method and light antibody method. The results were as follows: (1) most of the protein samples were directly under the cytomembrane and the cellular bone cells were combined. There was a significant difference between the two groups. (2) one side of the cancer cells could lose src and the infected cells were infected. The results showed that there was no difference in the results of the combination of protein and bone cells. The above results show that in the early stage of cell carcinogenesis, it is important to detect the tumor in the cytomembrane. The results show that the response to carcinogenesis is secondary to cancer stimulation. 2) the protein of each protein may be analyzed directly, and the antibodies may be used as antigens. This year, we have to count the number of people who have acquired antibodies. 3) the protein machine can be used to analyze the biochemistry in order to analyze the biochemistry. in the drawing score, the activity is very high. The above results show that you can improve the performance of the protein machine to parse the data.

项目成果

Richard Jove: "In vivo phosphorylation states and kinase activities of transforming p60^<cーsrc> mutants." Oncogene Research. 5. 49-60 (1989)

Richard Jove：“转化 p60^<c-src> 突变体的体内磷酸化状态和激酶活性。”Oncogene Research。5. 49-60 (1989)