C型肝炎ウイルスの遺伝子発現機構

丙型肝炎病毒基因表达机制

• 批准号: 04152025
• 负责人: 斎藤 泉
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152025/
• 关键词: C型肝炎ウイルス; アデノウイルスベクター; 肝炎ウイルス; コア蛋白; エンベロープ蛋白; NS1蛋白; HepG2細胞

C型肝炎ウイルス(HCV)の構造蛋白のプロセシングおよび構造蛋白間の相互作用を肝細胞で検討する実験系を確立するため、HCVの3種の構造遺伝子(コア、エンベロープ、NS1)各々を発現する組換えアデノウイルスを作製した。これらの組換えアデノウイルスはアデノウイルス複製・遺伝子発現に必須なE1A遺伝子を欠失しており、この遺伝子を持続的に発現している293細胞では、野生株アデノウイルスと同等に複製し、細胞は死減する。それ以外の細胞では、SRaプロモーターから目的遺伝子のみを発現し、細胞は生存する。これらの組換えウイルスの力価は10^8〜10^3PFU/mlに達した。これらをそれぞれ293細胞、HeLa細胞およびヒト肝細胞由来HepG2に感染した。その結果この全ての細胞株でほぼ100%の細胞でHCVのコア、エンベロープ、NS1蛋白の発現を確認した。293細胞では組換えウイルスが増殖するため、特に高い発現が得られた。HCVの構造遺伝子を発現する高力価の組換えアデノウイルスが作製された事により、従来は発現が難しかったヒト肝細胞株におけるHCV蛋白のプロセシングや機能解析が今後行えることとなった。現在、エンベロープとNS1蛋白のヒト肝細胞株における同時発現をこの系で行っており、この2種類の蛋白のヘテロ二量体形成について検討を行っている。またこれらの組換えウイルスが生ワクチンとして効果を持つか否かは極めて重要な問題であり、動物実験による抗体産生の検討を合わせて検討している。

Hepatitis C virus (HCV) structural protein expression and interaction between structural proteins in liver cells to establish the system, HCV three structural proteins (C, C, NS1) each to develop the system of expression and control. The E1A gene is required for the development of this gene. The E1A gene is required for the development of this gene. The E1A gene is required for the development of this gene. In addition, the cells of the SRA are not able to survive without the development of target genes. The total amount of PFU/ml is 10^8 ~ 10^3. HepG2 is the origin of HepG2 infection in HeLa cells and HepG2 cells. As a result, the expression of HCV protein, HCV protein and NS1 protein was confirmed in 100% of the cell lines. 293 cells were reorganized and cultured. Due to the high-powered assembly and use of cellular technology to discover the structural gene of HCV, the future development of the protein profiling and functional analysis of HCV proteins in the recently discovered rare liver cell line will be possible. Now, NS1 protein is produced simultaneously in liver cell lines, and two kinds of protein are produced simultaneously. This is a very important question, and it's a very important question,

项目成果

Inoue,Y.et al.: "Silent mother-to-child transmission of hepatitis C virus through two generations dotermined by comparative nucleotide seguence analisis of the viral CDNA." J.Inf.Dis.166. 1425-1428 (1992)

Inoue, Y. 等人：“丙型肝炎病毒通过两代人的无声母婴传播由病毒 cDNA 的比较核苷酸序列分析决定。”