酸化ヒスチジンを指標にした異常タンパク質の食品・生体内蓄積機構の解析

以氧化组氨酸为指标分析食品和生物体中异常蛋白质的积累机制

• 批准号: 06760122
• 负责人: 内田 浩二
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760122/
• 关键词: 酸化ストレス; 酸化蛋白質; 2-オキソヒスチジン; 電気化学検出器; 高速液体クロマトグラフィー

食品・生体蛋白質はフリーラジカルなどによる酸化作用を受け、異常蛋白質として摂取されるか、もしくは生体組織などに蓄積される。本研究は異常蛋白質に対する生物応答を化学的に解析することを目的に、酸化ヒスチジン(2-オキソヒスチジン)を指標とした特異的高感度検出系の開発を目的として研究を行った。2-オキソヒスチジンが強い酸化還元活性を示したことから、電気化学検出器(ECD)を備えたHPLC(HPLC-ECD)による高感度検出を試みた。その結果、逆相カラムを使用することにより、2-オキソヒスチジンを特異的かつ選択的に検出することが可能となった。この方法をフリーラジカル処理した蛋白質に適用したところ、酸化蛋白質の加水分解後の試料についても、2-オキソヒスチジンの検出が可能であった。さらに、スーパーオキシドジスムターゼ(SOD)を過酸化水素処理した酸化SODについても調べたところ活性中心に局在するヒスチジン(His-188)の特異的酸化による2-オキソヒスチジンの生成を明らかにした。現在、酸化ストレス疾患などに関連した生物試料への応用を検討中である。

Food and biological proteins are affected by acidification, abnormal proteins are extracted and accumulated in biological tissues. The aim of this study is to analyze the biological response of abnormal proteins and to investigate the development of high sensitivity detection systems. 2-Chloro-2-methyl-3-(4-methoxyphenyl)-2-methyl-ethyl-3-(4-methoxyphenyl)-2-methyl-ethyl-3-methyl-ethyl-ethyl-3-methyl-ethyl-3-methyl-ethyl-ethyl-3-methyl-ethyl-3-ethyl-ethyl-3-(4-methyl-ethyl)-ethyl-methyl-ethyl-3-ethyl-ethyl As a result, the reverse phase of the system is used in the following ways: 1. This method is applicable to the detection of protein after hydrolysis of acidified protein. It is possible to detect protein after hydrolysis of acidified protein. In addition, the enzyme (SOD) is activated by the acid treatment of water element, and the enzyme is activated by the active center in the enzyme (His-188). Now, there are some problems related to the biological samples.

项目成果

K.Uchida: "Site-specitic Oxidation of angiotensin I by copper(II)and ascorbate" Arch.Biochem.Biophys.283. 20-26 (1990)

K.Uchida：“铜 (II) 和抗坏血酸对血管紧张素 I 的位点特异性氧化”Arch.Biochem.Biophys.283。

K.Uchida: "Highly site-specitic oxygenation of 1-wethyl histidine and its analogue with a copper lascorbate vedox system." Biochim.Biophys.Acta. 1034. 347-350 (1990)

K.Uchida：“1-甲基组氨酸及其类似物与抗坏血酸铜 vedox 系统的高度位点特异性氧化。”

K.Uchida: "2-Oxo-bistidine as a novel biological marker for oxidatively moditied protins" FEBS Lett.332. 208-210 (1993)

K.Uchida：“2-Oxo-bistidine 作为氧化修饰蛋白的新型生物标记”FEBS Lett.332。

K.Kato: "Oxidative fragmentation of collagen and proryl peptide by Cu(II)/H_2O_2" J.Biol.Chem.267. 23646-23651 (1992)

K.Kato：“Cu(II)/H_2O_2 对胶原蛋白和脯酰肽的氧化断裂”J.Biol.Chem.267。

K.Uchida: "Identification of oxidized bistidine geverated at the active site of Cu,Zn-SoD exposed to H_2O_2" J.Biol.Chem.269. 2405-2410 (1994)

K.Uchida：“暴露于 H_2O_2 的 Cu,Zn-SoD 活性位点产生的氧化联苯胺的鉴定”J.Biol.Chem.269。