トリパノソーマ感染宿主細胞のアポトーシスに関する分子細胞生物学的解析

锥虫感染宿主细胞凋亡的分子细胞生物学分析

• 批准号: 08670288
• 负责人: 嶋田 淳子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670288/
• 关键词: トリパノソーマ; アポトーシス; 分子生物学; 細胞生物学; 感染宿主細胞

1.培養細胞を宿主細胞としたTrypanosoma cruziのin vitro感染モデル系を確立し、寄生虫感染による宿主応答の解析を行ってきた。今年度はアポトーシスを観察するのに適した宿主細胞を検索するため、種々の培養細胞についてアポトーシスの誘導法などを検討した。その結果、マウス由来線維芽細胞ではコルセミドなどの薬剤やFas抗原刺激に対してアポトーシスが起こりにくいことがわかった。また、バ-キットリンパ腫由来リンパ球系細胞株はアポトーシスは誘導しやすいが、T.cruziが感染しにくく、本実験には適さなかった。HeLa細胞、PC12細胞(クロム親和性神経様細胞)は本実験に適しており、今年度はHeLa細胞を用いることにした。2.アポトーシスのシグナルを伝達する細胞膜タンパク質としてFas抗原の存在が報告されている。そこでHeLa細胞でFasを介するアポトーシスを誘導する実験系を開発した。すなわち、抗Fas抗体(CH-11)をFasアゴニストとしてHeLa細胞に添加したところ、100ng/mlの濃度で細胞死を引き起こすことがわかった。また、HeLa細胞にT.cruziを感染させCH-11による刺激を行ったところ、感染細胞ではアポトーシスの抑制が認められた。3.Fas抗原を介するアポトーシスを誘導する実験系としてさらに確実な系を開発するため、HeLa細胞にFas抗原遺伝子をトランスフェクトして発現させることを計画していたが、すでに、その遺伝子を発現させたHeLa細胞(HF-1)を入手できたため、これを用いることにした。4.2の条件を用い、T.cruzi感染HeLa細胞(HF-1)でアポトーシス抑制が見られるか調べたが、HF-1株はFas遺伝子の保持のためネオマイシン存在下で培養するので、T.cruziが感染しにくく明確な結果は得られなかった。以上、今年度の計画はおよそ80%達成されたと考えている。

1. The host cell, Trypanosoma cruzi, in vitro infection, parasitic infection, host, parasite infection, parasite infection and parasite infection. This year, it is necessary to monitor the safety of the host cell, such as the host cell, the host cell, the host cell and the host cell. The result of the experiment, the cause of the disease, the cause of the disease, the cell cycle, the cell cycle, the Fas antigen stimulation, the cell cycle, the temperature, the temperature and the temperature. The cause of the disease is that the cell line of the cell line, the cell line, the The HeLa cell, the PC12 cell (the mother cell and the sexual cell), and this year's HeLa cell use the word "mother cell". two。 There is a report of the presence of FAS antigen in the cell membrane. We need to HeLa the Fas to make sure that we are responsible for the opening of the business. Anti-Fas antibody (CH-11), anti-HeLa antibody (CH-11), anti-HeLa antibody, anti-DNA antibody, cell death, cell death and cell death. T.cruzi, HeLa, infection, CH-11, stimulation, infection, inhibition, inhibition, infection, inhibition, inhibition, infection, inhibition, infection, inhibition, inhibition, infection, infection, The system of 3.Fas antigen is used to make sure that the HeLa cell (HF-1) is used in the first place, and that the HeLa cell (HF-1) is detected in the HeLa cell. 4.2 conditional use, T.cruzi infection of HeLa cells (HF-1), inhibition of Fas infection, maintenance of HF-1 infection, clear results of T.cruzi infection and clear results. Above, 80% of this year's planning has reached 80% of the total number of students.