大腸癌に高発現するチロシンホスファターゼSAP-1の生理機能に関する研究

结直肠癌高表达酪氨酸磷酸酶SAP-1的生理功能研究

• 批准号: 08670589
• 负责人: 的崎 尚
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670589/
• 关键词: キロシンホスファターゼ; SAP-1; 消化器癌

私達が、最近、遺伝子クローニングした、新しいタイプの受容体型PTPase,SAP-1は、正常大腸粘膜には、ほとんど認めなかったが、大腸癌に特異的に高発現を認めている。SAP-1の消化器癌における過剰発現が、発癌機序に関与している可能性を想定している。しかしながら、SAP-1の機能における生理的役割に関しては、全く不明のままである。そこで、本研究においては、SAP-1の生理機能の一端を明らかにする目的で、SAP-1のPTPase基質蛋白の同定、及びSAP-1の外側ドメインに対するリガンドの同定を計画した。1.SAP-1の脱リン酸化基質蛋白質の同定(1)src familyキナーゼが、SAP-1の標的基質蛋白であるか否かを検討した。しかしながら、src familyキナーゼ活性は、SAP-1の強発現細胞において変化しておらず、標的基質蛋白である可能性は少ないと考えられた。(2)src familyキナーゼ以外にも、未知のSAP-1の標的基質蛋白質は想定される為、ウェストーウェスタン法によるSAP-1ターゲットの同定を行った。現在、複数のSAP-1の標的基質蛋白質と考えられるクローンを得ておりこれらを解析中である。2.SAP-1のリガンドの同定SAP-1の外側ドメインに結合する特異的リガンドも種々の受容体型接着因子蛋白とのアナロジーから、細胞表面に発現される膜蛋白質である可能性を考えている。そこで、IgのFcドメイン領域との融合蛋白として、SAP-1の外側ドメイン部分を過剰に分泌する細胞株を樹立し、この接着上清よりProtein Aアフィニティーカラムを用い大量にSAP-1外側ドメインを精製した。これをプローブとして用い、現在数種のSAP-1リガンドの候補蛋白を同定しており、これらを解析中である。

Private が, recently, but 伝 ク ロ ー ニ ン グ し た, new し い タ イ プ の by size PTPase, は SAP - 1, normal colon mucosa に は, ほ と ん ど recognize め な か っ た が, high colorectal cancer に specific に 発 を now recognize め て い る. SAP-1 stage digestive tract cancer における excessive occurrence が, the mechanism of cancer occurrence に and the possibility of <s:1> て る る を determination を て る る る る. <s:1> ながら ながら, に related to the physiological functions of SAP-1 <s:1> functional における に <s:1> て て, totally く unknown ままである ままである ままである. そ こ で, this study に お い て は, SAP - 1 の physiology の end を Ming ら か に す る purpose で, SAP - 1 の PTPase matrix proteins の の with SAP, and び - 1 the lateral ド メ イ ン に す seaborne る リ ガ ン ド の with し を plans た. 1. SAP - 1 の リ off ン acidification の matrix proteins might be (1) the SRC family キ ナ ー ゼ が の, SAP - 1 mark matrix proteins で あ る か no か を beg し 検 た. し か し な が ら, SRC family キ ナ ー ゼ の strong 発 presently active は, SAP - 1 cell に お い て variations change し て お ら ず matrix proteins, mark で あ less likely は る な い と exam え ら れ た. (2) the SRC family キ ナ ー ゼ outside に も, unknown の の SAP - 1 mark matrix protein は scenarios さ れ る for, ウ ェ ス ト ー ウ ェ ス タ ン method に よ る SAP - 1 タ ー ゲ ッ ト の with fixed line を っ た. Now, the matrix protein of the complex <s:1> SAP-1 target is と examined in えられる, ロ, <s:1>, を を and てお,, れらを. 2. SAP - 1 の リ ガ ン ド の be SAP - 1 の lateral ド メ イ ン に combining す る specific リ ガ ン ド も kind 々 の by capacity size then factor protein と の ア ナ ロ ジ ー か ら, cell surface に 発 now さ れ る membrane protein で あ る possibility を exam え て い る. そ こ で, Ig の Fc ド メ イ ン field と の fusion Protein と し て の, SAP - 1 the lateral ド メ イ ン part を before turning に secretion す る cell lines を し, こ の then on qing よ り Protein A ア フ ィ ニ テ ィ ー カ ラ ム を use い large lateral ド に SAP - 1 メ イ ン を refined し た. こ れ を プ ロ ー ブ と し て い, now several の SAP - 1 リ ガ ン ド の alternate protein を with fixed し て お り, こ れ ら を parsing で あ る.

项目成果

Tetsuya Noguchi: "Characterization of a 115-kDa protein that binds to SH-PTP2,a proteintyrosine phosphatase with Src homology 2 domains,in chinese hamster orary cells" J.Biol.Chem.271・44. 27652-27658 (1996)

Tetsuya Noguchi：“在中国仓鼠口腔细胞中与 SH-PTP2（一种具有 Src 同源性 2 结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶）结合的 115 kDa 蛋白质的表征”J.Biol.Chem.271·44（1996）。

Yohsuke Fujioka: "A novel membrane glycoprotein,SHPS-1,that binds the SH2-domain-containing protein tyrosine phosphatase SHP-2 in response to mitogens." Mol.Cell.Biol.16・12. 6887-6899 (1997)

Yohsuke Fujioka：“一种新型膜糖蛋白 SHPS-1，可结合含有 SH2 结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶 SHP-2，响应细胞分裂素。”16·12 (1997)。

Takashi Matozaki: "Roles of protein tyrosine phosphatases in growth factor signoling" Cell.Signal. 8・1. 13-19 (1996)

Takashi Matozaki：“蛋白质酪氨酸磷酸酶在生长因子信号传递中的作用”Cell.Signal 8・1（1996）。

Yasushi Seo: "Overexpression of SAP-1,a transmembrane-Type protein tyrosine phosphatase in human colorectal cancers" Biochem.Biophys.Res.Commun.(in press). (1997)

Yasushi Seo：“SAP-1（一种跨膜型蛋白酪氨酸磷酸酶在人类结直肠癌中的过度表达）”Biochem.Biophys.Res.Commun.（印刷中）。