大腸癌に高発現するチロシンホスファターゼSAP-1の生理機能に関する研究

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私達が、最近、遺伝子クローニングした、新しいタイプの受容体型PTPase,SAP-1は、正常大腸粘膜には、ほとんど認めなかったが、大腸癌に特異的に高発現を認めている。SAP-1の消化器癌における過剰発現が、発癌機序に関与している可能性を想定している。しかしながら、SAP-1の機能における生理的役割に関しては、全く不明のままである。そこで、本研究においては、SAP-1の生理機能の一端を明らかにする目的で、SAP-1のPTPase基質蛋白の同定、及びSAP-1の外側ドメインに対するリガンドの同定を計画した。1.SAP-1の脱リン酸化基質蛋白質の同定(1)src familyキナーゼが、SAP-1の標的基質蛋白であるか否かを検討した。しかしながら、src familyキナーゼ活性は、SAP-1の強発現細胞において変化しておらず、標的基質蛋白である可能性は少ないと考えられた。(2)src familyキナーゼ以外にも、未知のSAP-1の標的基質蛋白質は想定される為、ウェストーウェスタン法によるSAP-1ターゲットの同定を行った。現在、複数のSAP-1の標的基質蛋白質と考えられるクローンを得ておりこれらを解析中である。2.SAP-1のリガンドの同定SAP-1の外側ドメインに結合する特異的リガンドも種々の受容体型接着因子蛋白とのアナロジーから、細胞表面に発現される膜蛋白質である可能性を考えている。そこで、IgのFcドメイン領域との融合蛋白として、SAP-1の外側ドメイン部分を過剰に分泌する細胞株を樹立し、この接着上清よりProtein Aアフィニティーカラムを用い大量にSAP-1外側ドメインを精製した。これをプローブとして用い、現在数種のSAP-1リガンドの候補蛋白を同定しており、これらを解析中である。