多様なMAPキナーゼ活性化経路の集束点Raf1の活性制御についての研究

多种MAP激酶激活途径焦点Raf1活性调控研究

基本信息

批准号：
08672497
负责人：
平澤典保
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.肥満細胞におけるFc ε RI刺激及びG蛋白質共役受容体刺激によるMAP kinase活性化の経時変化の相違ムスカリンml受容体を発現させたラットの肥満細胞株RBL-2H3 (ml)細胞を抗原やカルバコールで刺激するとMAP kinaseは活性化される。両刺激によるMAP kinaseの活性化の経時変化を調べたところ、抗原刺激によるMAP kinaseの活性化は30分以上持続するのに対して、カルバコール刺激では10分以内に不活化することが明らかになった。2. Diacylglycerol依存性の機構によるMAP kinase活性化制御ホスホリパーゼCを阻害するneomycin及びホスホリパーゼD由来のdiacylglycerol産生を抑制するpropranololは、抗原刺激によるMAP kinaseの活性化には全く影響を与えなかったが、カルバコール刺激によるMAP kinaseの活性化を増強するとともに持続させた。したがって、G蛋白質共役受容体刺激の場合のMAP kinase活性化にはdiacylglycerolに依存したnegative feedback機構が存在することが明らかになった。3. Calphostin CによるRaf 1の活性化抑制Calphostin Cはdiacylglycerol拮抗型のプロテインキナーゼC阻害薬であるが、抗原及びカルバコール刺激によるMAP kinaseの活性化をともに強く抑制した。この作用機序として、calphostin CはRaf-1のtranslocationを抑制することによりその活性化を抑制していることが明らかになった。以上の結果から、肥満細胞において膜リン脂質代謝は特にG蛋白質共役受容体刺激の場合のMAP kinaseの活性化を抑制していること、さらに、calphostin CはRaf-1の活性化を抑制し、その結果としてMAP kinaseの活性化を強く抑制することが明らかになった。したがって、種々の刺激によるMAP kinase活性化経路の集束点であるRaf-1の活性化を抑制する薬物は強力なMAP kinaseの活性化抑制作用を発現することが期待できる。

1。通过FcεRI刺激和G蛋白偶联受体刺激在肥大细胞中，当大鼠肥大细胞系RBL-2H3（ML）细胞用抗原或卡尔巴乔刺激表达麝香蛋白的ML受体的大鼠细胞系RBL-2H3（ML）细胞时，通过FcεRI刺激和G蛋白偶联受体刺激的时间依赖性变化的差异被激活。当由于两种刺激引起的时间依赖性变化MAP激酶的激活变化表明，抗原刺激的MAP激酶持续了30分钟以上，而Carbachol刺激持续了10分钟。 2. Neomycin抑制磷脂酶C，该磷脂酶C通过二酰基甘油依赖性机制调节MAP激酶激活，而丙二醇酚抑制磷脂酶D的二酰基甘油酚D，但通过抗原刺激和维持CARASE的刺激量对MAP激酶的激活没有影响，但可以增强CARASE的激活。因此，已经表明，在G蛋白偶联受体刺激的情况下，MAP激酶激活中存在着依赖于二酰基甘油的负反馈机制。 3。钙粘蛋白C钙粘蛋白C对RAF 1激活的抑制是一种二酰基甘油拮抗蛋白激酶C抑制剂，但两者都强烈抑制了抗原和卡巴乔刺激的MAP激酶的激活。作为一种作用机理，已经揭示了钙孔蛋白C通过抑制RAF-1的易位来抑制其激活。以上结果表明，肥大细胞中的膜磷脂代谢抑制了MAP激酶的激活，尤其是在刺激G蛋白偶联受体的情况下，钙粘蛋白C抑制RAF-1的激活，从而抑制了MAP激酶激活的强烈抑制。因此，预计抑制RAF-1激活的药物是由于各种刺激引起的MAP激酶激活途径的聚焦点可以产生MAP激酶激活的有效抑制作用。