転写因子の欠損に直接起因する発がんにおける基本転写因子TFIIEとTFIIHの役割

碱性转录因子TFIIE和TFIIH在转录因子缺陷直接致癌中的作用

• 批准号: 10152233
• 负责人: 大熊 芳明
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152233/
• 关键词: 転写; RNAポリメラーゼII(PolII); 基本転写因子; 遺伝病; TFIIE; TFIIH; リン酸化; DNA修復

1. 線虫TFIIEホモログの同定と解析真核生物ではRNAポリメラーゼII(PolII)が、5種の基本転写因子の助けで転写を行っている。その際基本転写因子TFIIEは、もう一つの基本因子TFIIHと協調し転写開始と伸長段階への移行に関与している。これまで、ヒトTFIIEの構造と活性の相関を欠失変異体を用いて解析し、20〜30アミノ酸の範囲内に活性領域を特定した。現在更に個々のアミノ酸レベルで解析を進めるため、異なる種間でホモログを取りアミノ酸配列の保存性を調べている。今回、全ゲノム配列の決定された線虫からTFIIEホモログを同定し、解析した。まず小さい方のTFIIEβサブユニットは、大腸菌で発現後、精製してヒトと転写での機能が置き換るかを調べると、完全では無いながら置き換ることが分った。一方、線虫TFIIEαは置き換らなかった。TFIIHのPolIIリン酸化のTFIIEによる促進活性について同様に調べると、転写と良く一致して線虫TFIIEβではリン酸化が進んでいるのに対し、線虫TFIIEαを用いるとリン酸化の促進は見られなかった。2. TFIIHの欠損に起因する遺伝病患者細胞に由来する欠損TFIIHの活性と機能の解析TFIIHは9個のサブユニットよりなり、転写だけでなくDNA修復にも関与する重要な蛋白質である。特に、大きい2サブユニットXPBとXPDがDNA修復に直接関わることが分っている。遺伝的にこれらに欠損を有する家系が存在し、患者は転写、DNA修復能が低下していることにより癌になりやすくなったり、発育や神経系の発達が遅れていることが明らかにされている。今回、これらのサブユニットに欠損を有する2種の細胞から欠損TFIIHを精製し、そのサブユニット構成や転写、リン酸化における活性を調べた。すると転写活性やリン酸化活性の低下と患者の病態に相関性があることが分った。

1. TFIIE is the same as TFIIE in eukaryotic organisms. It is composed of RNA polymerase II(PolII) and five basic transcription factors. The basic writing factor TFIIE is equal to the basic writing factor TFIIH, which is equal to the basic writing factor TFIIH. The structure and activity of TFIIE were analyzed in detail, and the activity domain was specified within the range of 20 ~ 30 ℃. Now, we are going to analyze and analyze the acid sequence in different species, and adjust the preservation of acid sequence. Now, the decision of the whole arrangement is made according to the TFIIE. TFIIEβ is produced in small quantities, after the development of coliform bacteria, refined and written, and its functions are changed from one to another. It is completely free from change. One side, thread worm TFIIEα reverse set. TFIIH's PolII Acidification and TFIIE's Promotion Activity are the same as those of TFIIEβ, and TFIIEα is the same as TFIIE β. 2. Analysis of the activity and function of TFIIH in the cells of patients with TFIIH deficiency, the origin of TFIIH deficiency, and the origin of TFIIH deficiency. TFIIH has 9 important proteins involved in DNA repair. XPB and XPD are directly related to DNA repair. There is a family with a lack of DNA damage, a patient with a lack of DNA repair, and a lack of DNA repair. There are two kinds of cells in this paper: TFIIH, TFIIH, TFIIH, There is a correlation between the activity and the disease in patients with low acidification activity.

项目成果

Yamauchi,Y.et al.: "Apoptosis was promoted at a nonpermissive temperature in DNA replication-defective temperature-sensitive mutants of mouse FH3A cells." Exp.Cell.Res.238. 317-323 (1998)

Yamauchi, Y. 等人：“在小鼠 FH3A 细胞的 DNA 复制缺陷温度敏​​感突变体中，细胞凋亡在不允许的温度下得到促进。”

Fujita,M.et al.: "Cell cycle-and chromatin binding state-dependent phosphory lation of human MCH heterohexameric complexes. A role for cdc2 kinase." J.Biol.Chem.273. 17095-17101 (1998)

Fujita,M.et al.：“人 MCH 异六聚体复合物的细胞周期和染色质结合状态依赖性磷酸化。cdc2 激酶的作用。”

Sugasawa,K.et al.: "Xeroderma pigmentosumi group C protein complex is the initiator of global geneme mucleotide excision repair." Mol.Cell. 2. 223-232 (1998)

Sugasawa,K.et al.：“着色性干皮病 C 组蛋白复合物是全局基因组核苷酸切除修复的引发剂。”

Ohtaka-Maruyama,C et al.: "A novel alternative spliced variant of the transcription factor AP2α is expressed in the murine ocular lens." Dev.Biol.202. 125-135 (1998)

Ohtaka-Maruyama, C 等人：“转录因子 AP2α 的一种新的选择性剪接变体在鼠眼晶状体中表达。”Dev.Biol.202 (1998)。