真核生物ゲノムの遺伝子情報発現における基本転写因子の制御的役割の解明

阐明基本转录因子在真核基因组遗传信息表达中的调节作用

基本信息

  • 批准号:
    12206051
  • 负责人:
  • 金额:
    --
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.Pol II転写開始におけるヒトTFIIEβの二本鎖DNA結合領域の機能解析ヒトTFIIEは、αとβがα2β2の4量体を形成し、転写開始と伸長への移行に機能する。転写開始では、TFIIEが転写開始点すぐ上流に結合し、複合体活性化とDNAの一本鎖開裂を助ける。我々は、TFIIEβ中央コア領域が二本鎖DNAとの結合領域で、羽状-ヘリックス構造をとることをNMRを用い明らかにした。そこで、この領域のDNA結合アミノ酸残基の機能解析を行った。DNA結合残基に点突然変異を導入すると、転写活性が著しく低下した。また、この領域が転写開始の際、DNA結合に重要であることを明らかにした。2.線虫TFIIEを用いたPol IIの転写開始から伸長への移行段階の解析我々は、TFIIEの機能を解析する目的で線虫TFIIEを単離しヒトTFIIEと比較検討した。ヒトと線虫TFIIEのサブユニットを組み合わせたキメラTFIIEを発現・精製し、転写再構成系にてヒトTFIIEと機能的互換性を検討したところ、線虫βはヒトβと部分的に置き換ったが、線虫αは置き換らなかった。原因を検討すると、線虫αはヒトβとの結合活性が10%以下となりヒトTFIIEの様な転写活性を示さないことが分った。一方、線虫βはヒト転写系では伸長への移行活性が低かった。TFIIEは、Pol II最大サブユニットのCTD配列の2番目と5番目セリンのTFIIHによるリン酸化を促進する。ヒトαと線虫βのキメラでCTDリン酸化を調べると、5番目セリンリン酸化活性が著しく低下していた。今回、伸長への移行はPol IICTDの5番目セリンリン酸化と密接な関連性があることが示唆された。ヒトゲノム解読が完了しようという今、「情報はいかに発現されて機能するのか」という問題が、今後のテーマになる。我々の結果は、生命現象を解明する重要な指標と成ると考える。
1. The に Pol II planning write お け る ヒ ト TFIIE beta の 2 lock function of dna-binding domain の parsing ヒ ト TFIIE は, alpha と beta が alpha beta 2 の 4 quantity body を し, planning to write started と elongation へ の transitional に function す る. Youdaoplaceholder0 write the beginning で ける, TFIIEが転 write the beginning point すぐ upstream に binding 転, complex activation とDNA sequins one lock cracking を assist ける. I 々 は, TFIIE beta central コ が ア field 2 lock DNA と で の combining field, the feather - ヘ リ ッ ク ス tectonic を と る こ と を NMR を with い Ming ら か に し た. Youdaoplaceholder0 そ で, <s:1>, <s:1> domain <s:1> DNA binding ア, ノ, ノ acid residue <e:1> function analysis を row った. The sudden change of the DNA binding residue に site を introduces すると, 転 writes activity が, <s:1> く is low, and た た. Youdaoplaceholder0, <s:1> <s:1> field が転 writes the beginning of が転 line, DNA binding に important である とを とを light ら に に た た た. 2. Nematodes TFIIE を with い た Pol II の planning write start か ら elongation へ の transitional Duan Jie の resolution I 々 は, TFIIE の function analytical す を る purpose で nematodes TFIIE を 単 from し ヒ ト TFIIE と compare beg し 検 た. ヒ ト と nematodes TFIIE の サ ブ ユ ニ ッ ト を group み close わ せ た キ メ ラ TFIIE を 発, refined し now, planning to write to constitute に て ヒ ト TFIIE と functional interchangeability を beg し 検 た と こ ろ, nematode beta は ヒ ト beta と part に buy き in っ た が, nematode alpha は き in ら な か っ た. Beg す reason を 検 る と, nematodes alpha は ヒ ト beta と の binding activity が below 10% と な り ヒ ト TFIIE の others な planning write activity を shown さ な い こ と が points っ た. One side, the nematode β ヒト転 ヒト転 is で で elongation へ <s:1> <s:1> migration activity が low った った. TFIIE は, Pol II largest サ ブ ユ ニ ッ ト の の CTD with column 2's yard と 5 times セ リ ン の TFIIH に よ る リ ン acidification を promote す る. ヒ ト alpha と nematodes beta の キ メ ラ で CTD リ ン acidification を adjustable べ る と, 5 times eye セ リ ン リ ン acidification active が the し く low し て い た. This time, the elongation へ <s:1> transfer へ Pol IICTD <e:1> 5 suborder セリ リ リ <e:1> acidification と close contact な correlation がある がある とが suggesting された された. Finished ヒ ト ゲ ノ ム solution 読 が し よ う と い う today, "intelligence は い か に 発 now さ れ て function す る の か" と い う problems が, の テ ー マ に な る. I 々 the results and life phenomena を explain する important な indicators と become ると tests える.

项目成果

期刊论文数量(7)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
石井俊輔 他編集: "転写因子の機能-転写制御複合体形成のダイナミクス"共立出版. 286 (2000)
Shunsuke Ishii 等编辑:“转录因子的功能 - 转录调节复合物形成的动力学”Kyoritsu Shuppan 286 (2000)。
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