基本転写因子TFIIEとTFIIHによる核内シグナル伝達と転写のカップリング機構

基本转录因子TFIIE和TFIIH核信号转导与转录的偶联机制

• 批准号: 13014212
• 负责人: 大熊 芳明
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13014212/
• 关键词: 基本転写因子; TFIIE; TFIIH; RNAポリメラーゼII; CTD; リン酸化; ヌクレオチド除去修復; XPC

1.ヒトTFIIEαのZnフィンガー領域の構造解析ヒトTFIIEは、αとβの2サブユニットがα2β2の4量体を形成し、転写開始と伸長への移行に機能する。αは中央のコア領域にznフィンガーモチーフを有しており、この欠失変異体は試験管内転写系においてドミナントネガティブとして機能することから、転写において重要な機能を担っていると考えられる。さらに原核生物である古細菌類にも最近、ヒトTFIIEαのZnフィンガー領域を含むN末端領域だけがホモログとして存在することが示され、その種を越えた機能の重要性が考えられている。そこで我々は、この領域をNMRにより構造解析した。その結果、亜鉛依存に構造を形づくる、Znフィンガーモチーフであることが実証された。その機能について、現在解析中である。2.RNAポリメラーゼII(Pol II)の転写開始から伸長への移行段階の解析昨年度、線虫TFIIEβホモログを用いて、Pol II最大サブユニットC末端の7アミノ酸繰り返しCTD配列の2番目と5番目のセリンのTFIIHによるリン酸化のうち、5番目のセリンリン酸化が転写伸長への移行活性と密接な関連性があることを示してきた。そこで、今年度はさらにβサブユニットのC末端にTFIIEのこの転写伸長への移行活性に関与する領域があることを見い出した。この領域内のアミノ酸残基を点突然変異により置換してやると移行活性のみならず、Pol IIのリン酸化活性も大きく低下することを明らかにした。3.ヌクレオチド除去修復因子XPCの修復反応におけるTFIIHとの相互作用XPCは紫外線等によるDNAの損傷修復反応において損傷部位を認識して修復反応の引き金を引く因子であることを我々は明らかにしているが、今回このXPCがそのC末端でTFIIHと結合することが修復活性においても大変重要であることを示した。

1. ヒ ト TFIIE alpha の zinc フ ィ ン ガ の ー field structure ヒ ト TFIIE は, alpha beta 2 サ の と ブ ユ ニ ッ ト が alpha beta 2 の 4 quantity body を し, planning to write started と elongation へ の transitional に function す る. Alpha は central の コ ア field に zinc フ ィ ン ガ ー モ チ ー フ を have し て お り, こ の owe lost - variant は planning to write test tube department に お い て ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ と し て function す る こ と か ら, planning to write に お い important な function を bear っ て て い る と exam え ら れ る. さ ら に prokaryotes で あ る archaea class に も recently, ヒ ト TFIIE alpha の zinc フ ィ ン ガ ー areas を contain む N terminal だ け が ホ モ ロ グ と し て exist す る こ と が shown さ れ, そ の を better and え た importance function の が exam え ら れ て い る. Youdaoplaceholder0 た で で I 々, <s:1> domain をNMRによ で structural analysis た た. そ の results, 亜 lead dependent に tectonic を づ く る, zinc フ ィ ン ガ ー モ チ ー フ で あ る こ と が card be さ れ た. The そ そ function に そ て て て て is currently being resolved である. 2. RNA ポ リ メ ラ ー ゼ II (Pol II) の planning to write start か ら elongation へ の transitional Duan Jie の resolution last year, nematode TFIIE beta ホ モ ロ グ を with い て, Pol II largest サ ブ ユ ニ ッ ト C terminal の 7 ア ミ ノ acid Qiao り return し の CTD with column 2 times yard と 5 times の セ リ ン の TFIIH に よ る リ ン acidification の う ち, 5 times eye の セ リ ン リ ン acidification が planning write elongation へ の migration activity と contact な masato even sex が あ る こ と を shown し て き た. そ こ で, our は さ ら に beta サ ブ ユ ニ ッ ト の C terminal に TFIIE の こ の planning write elongation へ の migration activity に masato and す る field が あ る こ と を see い out し た. こ の field の ア ミ ノ acid residues を point suddenly - different に よ り replacement し て や る と migration activity の み な ら ず, Pol II の リ ン acidification active も big き く low す る こ と を Ming ら か に し た. 3. ヌ ク レ オ チ ド remove repair factor XPC の repair the 応 に お け る TFIIH と の interaction XPC は ultraviolet etc に よ る の DNA damage repair the 応 に お い て injury を know し て repair the 応 の lead き gold を く factor で あ る こ と を I 々 は Ming ら か に し て い る が, today back to こ の XPC が そ の C terminal で TFI IHと combined with する とを とが とが repair activity にお て て とが is of great significance である とを とを shows た た.

项目成果

Yamamoto, S. et al.: "Studies of nematode TFIIE reveal a link between Ser-5 phosphorylation of RNA PolymeraseII and the transition from transcription initiation to elongation"Mol. Cell. Biol.. 21. 1-15 (2001)

Yamamoto, S. 等人：“线虫 TFIIE 的研究揭示了 RNA 聚合酶 II 的 Ser-5 磷酸化与从转录起始到延伸的转变之间的联系”Mol.

Araki, M. et al.: "Centro some protein centrin 2/caltractin 1 is part of the xeroderma pigmentosum group C complex that initiates global genome nucleoticle excision repair"J.Biol.Chem.. 276. 18666-18672 (2001)

Araki，M.等人：“Centro一些蛋白centrin 2/caltractin 1是着色性干皮病C组复合物的一部分，它启动全基因组核仁切除修复”J.Biol.Chem.. 276. 18666-18672 (2001)

Uchida, A., et al.: "The carboxy-terminal domain of the XPC protein plays a crucial role in nucleotide excision repair through interactions with transcription factor IIH"DNA Repair. (発表予定). (2002)

Uchida, A. 等人：“XPC 蛋白的羧基末端结构域通过与转录因子 IIH 的相互作用在核苷酸切除修复中发挥着至关重要的作用”DNA Repair（即将出版）。