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神経芽細胞腫で発現するポリシアル酸の機能解析

神经母细胞瘤中表达的聚唾液酸的功能分析

基本信息

批准号：
10178204
负责人：
中山淳
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10178204/
关键词：
神経芽細胞腫ポリシアル酸

项目摘要

平成10年度はまず12症例の神経芽腫群腫瘍(神経芽腫 7例,神経節芽腫 4例,神経節腫 1例)におけるポリシアル酸の発現パターンをポリシアル酸に対する特異抗体,12F8を用いて免疫組織学的に解析し,ポリシアル酸は神経節腫や神経節芽腫にくらべ悪性度の高い神経芽腫で強く発現していることを明らかにした.次に神経芽細胞腫培養細胞,SK-N-SHで発現するポリシアル酸は2種類のポリシアル酸合成酵素,PSTとSTXによって合成されていることをRT-PCR法により明らかにした.さらに,ポリシアル酸の発現レベルと神経芽腫の悪性度との相関を実験的転移アッセイにより解析するため,SK-N-SHにPST cDNAとSTX,cDNAを導入することでポリシアル酸をより強く発現する安定樹立株の単離を試みたが不成功に終わった.そこで,ポリシアル酸,N-CAMのいずれも発現していない低転移性マウス悪性黒色腫細胞,B16-F0にポリシアル酸転移酵素(PST,STX)cDNAとN-CAM cDNAを同時に,あるいはN-CAM cDNAのみを導入してポリシアル化N-CAMやN-CAMを発現するB16-F0を樹立し,これらの遺伝子導入細胞をC57BL/6マウスの皮下に注入して造腫瘍能の検討を行った.その結果,造腫瘍能は確認できたものの,ポリシアル化N-CAMやN-CAMの発現レベルはマウスの皮下組織内では著しく低下しており,これらの細胞を用いて実験的転移アッセイを行うことは困難となった.現在,マウスに注入してもポリシアル酸の発現レベルが低下しないような新たな遺伝子導入株を作製しており,今後はこれらの細胞を用いて実験的転移アッセイを行う予定である.

In 2009, there were 12 cases of neuropathic budding group tumors (7 cases of neuropathic budding, 4 cases of neuropathic budding, and 4 cases of neuropathic cysts). 1 Case Specific antibody, 12F8を analyzed by immunohistology, ポリシアル acid SK-N-SH SK-N-SHで発成するポリシアル acid 2 types of のポリシアル acid synthase, PSTとSTX Synthetic Synthesis RT-PCR Methodした.さらに,ポリシアル acid no 発 appear レベルと神経budswollen の悪性度とのphase Sekiyuki's 転ッセイによりanalyticsするため,SK-N-SHにPST cDNA と STX, cDNA を import することでポリシアル acid をより强く発 appearするSTABILITY ESTABLISHED Strain の単をTRIED みたが unsuccessful にfinal わった.そこで, ポリシアル acid ,N-CAM's low migration rate, B16-F0 acid transfer enzyme (PST, STX) cDNA and N-CAM cDNAをsimultaneous,あるいはN-CAM The cDNA was introduced into the N-CAM cells and the N-CAM cells were introduced into the C57BL/6 cells. The results of the subcutaneous injection of the tumor can be confirmed, and the tumor can be confirmed.できたものの,ポリシアル化N-CAMやN-CAMの発成レベルはマウIn the subcutaneous tissue, the cells are lowered and the cells are lowered. Move the アッセイを行うことは the difficult となった. Now, the マウスに injects the してもポリシしないような新たな缝子 Imported from Co., Ltd. しており, from now on, we will use the 転て実験's 袢ッセイを行う定である.