慢性ウイルス肝炎における肝癌の成因:フリーラジカルと一酸化窒素代謝物による感染性発癌機構

慢性病毒性肝炎肝癌发病机制：自由基和一氧化氮代谢物的感染性致癌机制

• 批准号: 10877026
• 负责人: 前田 浩
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877026/
• 关键词: フリーラジカル; NO; パーオキシナイトライト; 遺伝子変異; ウイルス感染病態; 発癌; ニトログアノシン

感染・炎症において過剰に生成するスーパーオキサイドやNO由来のパーオキシナイトライト(ONOO^-)は、タンパク質や遺伝子(塩基)のニトロ化をもたらし、生体内で酸化ストレスや変異原性を発現していることが示唆されている。そこで本年度は、ONOO^-と核酸の反応を詳細に検討し、さらにウイルス遺伝子変異に対する反応性NO酸化物(特にONOO^-)の影響を検討した。その結果、ONOO^-は核酸塩基のグアニンを効率良くニトロ化し、ニトログアニン(ニトログアノシン)を生成することが分った。また、RNAのグアニンニトロ化はDNAのそれに比べ、効率良く起こり、ヌクレオシドと同程度のニトログアノシンを生成した。さらに興味深いことに、生成したニトログアノシンがシトクローム還元酵素の存在下に顕著なスーパーオキサイドを産生することを明らかにした。この結果は、炎症局所で産生したONOO^-が核酸のニトロ化をもたらし、さらに生成したニトログアノシンが活性酸素であるスーパーオキサイドを産生することで炎症の増悪をもたらす可能性を示唆している。つづいて反応性NO酸化物のウイルス遺伝子変異について、変異のマーカーとしてgreen fluorescent protein(GFP)を組み込んだセンダイウイルス(GFP/SeV)を用いて検討した。その結果、in vitroの系においてGFP/SeVを生理的濃度のONOO^-(0.8μM)で処理すると、ウイルスの感染性が損なわれない条件下で、ウイルスゲノムに組み込まれたGFP遺伝子が変異した株が、0.5%-1.0%の頻度で出現した。また、ONOO^-がウイルスに対して99.98%の致死率を示す反応条件下では、100%の変異率が得られた。以上の知見は、感染・炎症において過剰に生成するNOやONOO^-がウイルスゲノムの変異を促進する因子として働く可能性を示唆している。

Infection, inflammation に お い て before turning に generated す る ス ー パ ー オ キ サ イ ド や NO origin の パ ー オ キ シ ナ イ ト ラ イ ト (ONOO ^ -) は, タ ン パ ク qualitative や heritage 伝 child (salt) の ニ ト ロ change を も た ら し で acidification, the body ス ト レ ス や - different original sex を 発 now し て い る こ と が in stopping さ れ て い る. そ こ で は this year, ONOO ^ - と nucleic acid の anti 応 を detailed に beg し 検, さ ら に ウ イ ル ス heritage 伝 sub - different に す seaborne る anti 応 sex NO acidification objects (especially に ONOO ^ -) の influence を beg し 検 た. そ の results, ONOO ^ - は nucleic acid salt base の グ ア ニ ン を sharper rate good く ニ ト ロ し, ニ ト ロ グ ア ニ ン (ニ ト ロ グ ア ノ シ ン) を generated す る こ と が points っ た. ま た, RNA の グ ア ニ ン ニ ト ロ change は DNA の そ れ に than べ, good working rate く こ り, ヌ ク レ オ シ ド と with degree の ニ ト ロ グ ア ノ シ ン を generated し た. さ ら に tumblers deep い こ と に, generate し た ニ ト ロ グ ア ノ シ ン が シ ト ク ロ ー ム yuan also the presence of enzymes の に 顕 the な ス ー パ ー オ キ サ イ ド を produce す る こ と を Ming ら か に し た. こ の results は, inflammation, bureau で produce し た ONOO ^ - が nucleic acid の ニ ト ロ change を も た ら し, さ ら に generated し た ニ ト ロ グ ア ノ シ ン が acid active element で あ る ス ー パ ー オ キ サ イ ド を produce す る こ と で inflammation の raised 悪 を も た ら す possibility を sucking in し て い る. つ づ い て anti 応 sex NO acidification content の ウ イ ル ス heritage 伝 sub - different に つ い て, - different の マ ー カ ー と し て green fluorescent protein (GFP) を group み 込 ん だ セ ン ダ イ ウ イ ル ス (GFP/SeV) を い て beg し 検 た. そ の results, the in vitro の is に お い て GFP/SeV の を physiological concentration ONOO ^ - (0.8 microns) で 処 Richard す る と, ウ イ ル ス の infectious が loss な わ れ な い で, under the condition of ウ イ ル ス ゲ ノ ム に group み 込 ま れ た GFP heritage 伝 son が - different し た が strains, 0.5% 1.0% の frequency で appear し た. ま た, ONOO ^ - が ウ イ ル ス に し seaborne て の 99.98% fatality rate を す in under the condition of the 応 で は, 100% の - が have different rate ら れ た. Above の knowledge は, infection, inflammation に お い て before turning に generated す る NO や ONOO ^ - が ウ イ ル ス ゲ ノ ム の - different を promote す る factor と し て 働 を く possibility in stopping し て い る.

项目成果

Fujii,S.,et al.: "Role of nitric oxide in prthogenesis of herpes simplex virus encephalitis in rats"Virology. 256. 203-212 (1999)

Fujii,S.,et al.：“一氧化氮在大鼠单纯疱疹病毒脑炎发生过程中的作用”病毒学。

Doi,K.,et al.: "Induction of haem oxygenase-1 by nitric oxide and ischaemia in experimental solid tumours and implications for tumour growth"Br. J. Cancer. 80. 1945-1954 (1999)

Doi,K.,et al.：“实验性实体瘤中一氧化氮和缺血诱导血红素加氧酶-1 及其对肿瘤生长的影响”Br。

Inoue,K.,et al.: "Nitrosothiol formation catalyzed by ceruloplasmin : Implication for cytoprotective mechanism in vivo"J. Biol. Chem.. 274. 27069-27074 (1999)

Inoue,K.,et al.：“铜蓝蛋白催化的亚硝基硫醇形成：对体内细胞保护机制的影响”J。

Sawa,T.,et al: "Tumor-rargeting chemotherapy by a xanthine oxidase-polymer conjugate that generates oxygen-free radicals in tumor tissue"Cancer Res.. 60. 666-671 (2000)

Sawa,T.,et al:“通过在肿瘤组织中产生氧自由基的黄嘌呤氧化酶-聚合物缀合物进行肿瘤靶向化疗”Cancer Res.. 60. 666-671 (2000)

Fujii,S.,et al.: "Role of nitric oxide in pathogenesis of herpes simplex virus encephalitis in rats" Virology. (in press). (1999)

Fujii,S.,et al.：“一氧化氮在大鼠单纯疱疹病毒脑炎发病机制中的作用”病毒学。