感染と炎症におけるメタロプロテアーゼの活性制御

感染和炎症中金属蛋白酶活性的调节

• 批准号: 10163233
• 负责人: 前田 浩
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10163233/
• 关键词: マトリックスメタロプロテアーゼ; 一酸化窒素; パーオキシナイトライト; 組織破壊; 組織修復; グルタチオン

昨年までの研究により、一酸化窒素(NO)と活性酸素(スーパーオキサイド、O_2^-)の反応生成物であるパーオキシナイトライト(ONOO^-)が、炎症の場において重要な生理活性を有するmatrix metalloproteinase前駆体(proMMP)を活性化し、さらにこの現象が、還元型グルタチオン(GSH)により調節されることを見出した。そこで本年度は、その活性化メカニズムの解析を行った。[^<35>S]GSHを種々の濃度のONOO^-と一定時間反応した後、精製した3種類のヒトproMMP(proMMP-8,-9,-1)と反応させ、その結合をfluorographyにより解析した。その結果、[^<35>S]GSHをproMMPとincubationするだけで両者は結合したが、活性化は見られなかった。これはdithithreitol(DTT)にて容易にはずれることから、単なるSS結合と思われた。一方、ONOO^-が存在する場合、proMMPの活性化がみられ、さらにその結合はDTTにては解離しないことから、SS結合以外の何らかの非可逆的な共有結合がおこっていることが示唆された。この結合はcysteine switchのanalogue peptide(PRCGVPD)により阻害されたことから、proMMPのcysteine switchを介して生じていることが示唆された。さらに、電子スピン共鳴法によりONOO^-とGSHにより反応性の高い分子種(活性型グルタチオン)が生成し、これがproMMPの不活性性に重要なCys残基(cysteine switch)に結合することで活性化を引き起こしているものと思われた。グルタチオンの新しい生理活性として、proMMPに非可逆的に結合することで、その生理活性を制御している可能性が示唆された。

Last year, we studied the activity of asphyxiant monoacid (NO), active acid (O2 ^ -), antisense product (ONOO ^ -), anti-product (ONOO ^ -), inflammatory precursors (proMMP), precursors (proMMP), and so on. This is a meta-type. (GSH). Please tell me what to do. This year, please make it active and analyze the line. [^ & lt;35>S] GSH various standards ONOO ^-after a certain period of time, fine-tuning the 3-class proMMP-8,-9,-1 (MMP) counter-test, combining with the fluorography analysis. The result of the experiment, [^ & lt;35>S] GSH proMMPAs, which is caused by the combination of the results of the experiment, the activation of the data, and the activation of the results. It is easy to use dithithreitol (DTT) to determine whether or not you want to know how to do this, and how to combine your SS with your thoughts. One party, ONOO ^-there is a common combination, proMMP activation, DTT activation, DTT release, and non-reversible co-operation except SS. The combination of cysteine switch analogue peptide (PRCGVPD) and proMMP cysteine switch can help you to show that you are not in need of health care. The method of mass spectrometry and electron microscopy has been used to induce the generation of high molecular species (active proMMP) and the important Cys residues (cysteine switch) of inactive GSH molecules combined with the activation of GSH molecules. The results show that the combination of physiological activity and proMMP is not reversible, and that the possibility of physiological activity is not reversible.

项目成果

K.Maruo,et al.: "Involvement og bradykinin generation in intravascular dissemination of Vibrio vulnificus and prevention of invasion by a bradykinin antagonist" Infect.Immun.66. 866-869 (1998)

K.Maruo 等人：“创伤弧菌血管内传播中参与缓激肽生成和缓激肽拮抗剂预防侵袭”Infect.Immun.66。

H.Maeda,et al.: "Kallikrein-kinin in infection and cancer" Immunopharmacology. (in press). (1999)

H.Maeda 等人：“感染和癌症中的激肽释放酶激肽”免疫药理学。

S.Fujii,et al.: "Role of nitric oxide in pathogenesis of herpes simplex vurus encephalitis in rats" Virology. (in press). (1999)

S.Fujii 等人：“一氧化氮在大鼠单纯疱疹病毒脑炎发病机制中的作用”病毒学。

K.Doi,et al.: "Induction of heme oxygenase-1 by nitric oxide and ischemia in experimental solid tumors and implications for tumor growth" Br.J.Cancer. (in press). (1999)

K.Doi 等人：“实验性实体瘤中一氧化氮和缺血诱导血红素加氧酶-1 及其对肿瘤生长的影响”Br.J.Cancer。

K.Sato,et al.: "Therapeutic effect of erythromycin on infliuenza virus-induced lung injury in mice" Am.J.Respir.Crit.Care Med. 157. 853-857 (1998)

K.Sato 等人：“红霉素对流感病毒引起的小鼠肺损伤的治疗效果”Am.J.Respir.Crit.Care Med。