课题基金 / 基金详情

がん診断治療を目指した免疫グロブリンFvフラグメントの構造生物学的研究

がん診断治療を目指した免疫グロブリンFvフラグメントの構造生物学的研究
用于癌症诊断和治疗的免疫球蛋白 Fv 片段的结构生物学研究
批准号：
11140220
负责人：
嶋田 一夫
金额：
$1.02万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1999 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11140220/
关键词：
FvCDR grafting安定同位体標識NMR

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
我々は抗体産生細胞1B10.7の産生する抗体を酵素消化することにより抗原認識最小単位である抗DNS Fvフラグメントの作成に成功し,さらに,そのFvが他のFvに比べ高い安定性を有することを示した.したがって,抗DNS Fvに対して,遺伝子工学的にそのCDR領域の変換(CDR grafting)を施せば,安定でかつ,がん診断・治療等に有用な抗体フラグメントを得ることが可能となる.そこで本研究では,抗DNS Fvの安定化機構の解明を行った.まず,均一安定同位体(^<13>C and/or ^<15>N)標識抗DNS Fvを作成するとともに,多くのアミノ酸選択的安定同位体標識Fvアナログを作成し,NMR解析を行うことで,その主鎖アミド基由来のNMRシグナルの99%について帰属を完了した.帰属されたシグナルを利用し,NMR法により様々な動的構造の解析を行うことで,抗DNS Fv分子を構成するV_H,V_Lの2つのドメインは,その動的特性に顕著な違いが見られることが明らかとなった.さらにこの相違が分子内部のドメイン界面に存在するアミノ酸残基の疎水性度合(hydropathy)によく対応していることが判明した.また,ハプテンであるDNS-Lysを添加することで,Fv分子の安定性が著しく増大することも示された.これらの結果は,安定なFv分子の作成のための重要な指針になると考えられる.
英文摘要
我々は抗体産生細胞1B10.7の産生する抗体を酵素消化することにより抗原認識最小単位である抗DNS Fvフラグメントの作成に成功し,さらに,そのFvが他のFvに比べ高い安定性を有することを示した.したがって,抗DNS Fvに対して,遺伝子工学的にそのCDR領域の変換(CDR grafting)を施せば,安定でかつ,がん診断・治療等に有用な抗体フラグメントを得ることが可能となる.そこで本研究では,抗DNS Fvの安定化機構の解明を行った.まず,均一安定同位体(^<13>C and/or ^<15>N)標識抗DNS Fvを作成するとともに,多くのアミノ酸選択的安定同位体標識Fvアナログを作成し,NMR解析を行うことで,その主鎖アミド基由来のNMRシグナルの99%について帰属を完了した.帰属されたシグナルを利用し,NMR法により様々な動的構造の解析を行うことで,抗DNS Fv分子を構成するV_H,V_Lの2つのドメインは,その動的特性に顕著な違いが見られることが明らかとなった.さらにこの相違が分子内部のドメイン界面に存在するアミノ酸残基の疎水性度合(hydropathy)によく対応していることが判明した.また,ハプテンであるDNS-Lysを添加することで,Fv分子の安定性が著しく増大することも示された.これらの結果は,安定なFv分子の作成のための重要な指針になると考えられる.
期刊论文(6)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
S. Kawaminami: "A Multinuclear NMR Study of the Active Site of an Endoglucanase from a Strain of Bacillus: Use of Trp Residues as Structural Probes"J. Biol. Chem.. 274. 19823-19828 (1999)
S. Kawaminami：“芽孢杆菌菌株内切葡聚糖酶活性位点的多核 NMR 研究：使用色氨酸残基作为结构探针”J。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
T. Torizawa: "DNA-biding mode of the FAB fragment of a monoclonal antibody specific for cyclobutane thymine dimer"Nucleic Acid Research. (in press). (2000)
T. Torizawa：“环丁烷胸腺嘧啶二聚体特异性单克隆抗体的 FAB 片段的 DNA 结合模式”核酸研究。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
K. Kato: "Structural Basis of the Interaction between IgG and Fc Receptors"J. Mol. Biol.. (in press). (2000)
K. Kato：“IgG 和 Fc 受体之间相互作用的结构基础”J。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
K. Masuda: "Post-translational modifications of immunoglobulin G: A mouse IgG variant that lacks the entire CH1 domain"Mol. Immunol.. (in press). (2000)
K. Masuda：“免疫球蛋白 G 的翻译后修饰：缺乏整个 CH1 结构域的小鼠 IgG 变体”Mol。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 6 条
    NMRを用いた紫外線損傷DNA修復機構の構造生物学的解析
    • 批准号：
      15023216
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.07万
    • 财政年份：
      2003
    • 负责人：
      嶋田 一夫
    • 依托单位：
      The University of Tokyo
    原子レベルでの病態解明に向けたハイスループットな分子間相互作用解析法の開発
    • 批准号：
      15012213
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.33万
    • 财政年份：
      2003
    • 负责人：
      嶋田 一夫
    • 依托单位：
      The University of Tokyo
    HIV感染機構の解明:ケモカイン受容体・リガンド相互作用の構造生物学的研究
    • 批准号：
      15019020
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.52万
    • 财政年份：
      2003
    • 负责人：
      嶋田 一夫
    • 依托单位：
      The University of Tokyo
    NMRを用いた紫外線損傷DNA修復機構の構造生物学的解析
    • 批准号：
      14026013
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $2.43万
    • 财政年份：
      2002
    • 负责人：
      嶋田 一夫
    • 依托单位：
      The University of Tokyo
    海外基金