p53点突然変異マウス作成によるがん治療モデルの開発

通过创建p53点突变小鼠开发癌症治疗模型

• 批准号: 11140219
• 负责人: 中村 健司
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11140219/
• 关键词: p53; ES細胞; ジーンターゲッティング; 標的遺伝子置換; 点突然変異; マウス; ノックアウトマウス; 胸腺リンパ腫

我々は、個体発がんにおけるp53遺伝子の突然変異と腫瘍の組織特異性とに注目し、p53欠損マウスを作成し解析してきた。ヒトの腫瘍から検出されるp53遺伝子の変異は点突然変異が最も多く、さらに変異のホットスポットがいくつか存在する。特に、Li-Fraumeni症候群のホットスポットの1つである、R248W変異は、大腸がんや胃がんで多く検出される。また、R249S変異は、肝がんで多く検出される。これらヒト腫瘍より見い出されるp53遺伝子の点突然変異がドミナントネガティブに働く可能性を考えると、特定の点突然変異が腫瘍の組織特異性を決めている可能性がある。そこで本研究は、p53遺伝子点突然変異(R245W)マウスとp53遺伝子欠失変異マウスを作成し、両者を解析し比較検討した。p53遺伝子点突然変異(R245W)マウスに認められた自然発生腫瘍は、その多くが胸腺リンパ腫であり、ヒトが多く認められる腫瘍の種類(大腸がんや胃がん)とは異なっていた。さらに、p53遺伝子欠失変異マウスとp53遺伝子点突然変異マウスの寿命と自然発生腫瘍を経過観察した結果、腫瘍の種類や発症時期がとても類似していた。以上の結果から、変異p53(R245W)は発症する腫瘍の特異性には関与せず、機能喪失型の変異であることが明かになった。一方、p53遺伝子欠失変異マウスは、高頻度に胸腺にリンパ腫を発症し、生後6ケ月以内に死亡する。p53欠損マウスに、リンパ球系でのみ正常p53を特異的に発現する遺伝子を導入したトランスジェニックマウスを作成した結果、p53欠損マウスの多くの死因である胸腺リンパ腫が減少し延命した。すなわちp53遺伝子はがん抑制遺伝子として機能し、p53欠損マウスは正常p53を発現させることによって、胸腺リンパ腫を抑制できることが解った。本研究よりヒトの腫瘍で頻繁に検出されるp53遺伝子点突然変異(R245W)は、機能喪失型の変異であることが明かになった。そこで、p53遺伝子欠失変異マウスの実験と同様に、点突然変異に対して正常遺伝子を導入することで腫瘍が抑制できるかどうか検討したい。近年、p53をターゲットにしたヒトに対する遺伝子治療も始まり、一部良好な結果が報告されている。我々が開発したヒトに多い点突然変異によってひき起こされるがんの疾患モデルは、今後もがん治療において有効な情報が得られるものと期待される。

I 々 は, individual 発 が ん に お け る p53 heritage 伝 の son suddenly - different と swollen sores の tissue specificity と に attention し, p53 owe damage マ ウ ス を made し parsing し て き た. ヒ ト の swollen sores か ら 検 out さ れ る p53 heritage 伝 son の - different は point suddenly - different が も く, most さ ら に - different の ホ ッ ト ス ポ ッ ト が い く つ か exist す る. に, Li - Fraumeni syndrome の ホ ッ ト ス ポ ッ ト の 1 つ で あ る, R248W - different は, e. が ん や stomach が ん で more く 検 out さ れ る. Youdaoplaceholder0, R249S changes また, liver がんで mostly く検 される. こ れ ら ヒ ト swollen sores よ り see い out さ れ る p53 heritage 伝 の point son suddenly - different が ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ に 働 く possibility を exam え る と, specific の points - different が suddenly swollen sores の tissue specificity を definitely め て い る possibility が あ る. そ こ で は, this study traces of p53 伝 contact suddenly - vision (R245W) マ ウ ス と p53 heritage 伝 lost son owe - different マ ウ ス を made し analytical し comparison, struck を beg し 検 た. Traces of p53 伝 contact suddenly - vision (R245W) マ ウ ス に recognize め ら れ た natural born 発 swollen sores は, そ の more く が thymus リ ン パ swollen で あ り, ヒ ト が く to recognize more め ら れ る swollen sores の types (e. が ん や stomach が ん) と は different な っ て い た. さ ら に, traces of p53 伝 lost son owe - different マ ウ ス と p53 heritage 伝 contact suddenly - different マ ウ ス の life と natural born 発 swollen sores を 経 too 観 examine し た results, swollen sores の や 発 disease period が と て も similar し て い た. の above results か ら, - different p53 (R245W) は 発 disease す る swollen sores の specificity に は masato and せ ず, disabilities の - different で あ る こ と が Ming か に な っ た. Party, traces of p53 伝 lost son owe - different マ ウ ス は, high frequency に thymus に リ ン パ swollen を 発 し, born within 6 ケ に death す る. P53 owe loss マ ウ ス に, リ ン パ ball is で の み normal p53 を specific に 発 now す る heritage 伝 son を import し た ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を made し た results, p53 owe damage マ ウ ス の more く の death で あ る thymus リ ン パ swollen が reduce し life し た. す な わ ち p53 heritage 伝 son は が ん inhibit heritage 伝 son と し て function し, p53 owe damage マ ウ ス は normal p53 を 発 now さ せ る こ と に よ っ て, thymus リ ン パ swollen を inhibit で き る こ と が solution っ た. This study よ り ヒ ト の swollen sores で frequent に 検 out さ れ る p53 heritage 伝 contact suddenly - different type function (R245W) は, lost の - different で あ る こ と が Ming か に な っ た. そ こ で, traces of p53 伝 lost son owe - different マ ウ ス の be 験 と with others に, point - suddenly different に し seaborne て normal heritage 伝 son を import す る こ と で swollen sores が inhibit で き る か ど う か beg し 検 た い. In recent years, p53 を タ ー ゲ ッ ト に し た ヒ ト に す seaborne る heritage 伝 child beginning treatment も ま り, results of a good な が さ れ て い る. I 々 が open 発 し た ヒ ト に い more suddenly - different に よ っ て ひ き up こ さ れ る が ん の disorders モ デ ル は, future も が ん treatment に お い て have sharper な intelligence が ら れ る も の と expect さ れ る.

项目成果

Sunahara, S., et al.: "The oocyte-specific methylated region of the U2afbp-rs/U2af1-rs1 gene is dispensable for its imprinted methylation"Biochem. Biophys. Res. Commum.. 16. 590-595 (2000)

Sunahara, S. 等人：“U2afbp-rs/U2af1-rs1 基因的卵母细胞特异性甲基化区域对于其印迹甲基化来说是可有可无的”Biochem。

Sato, T., et al.: "Transgenic mice harboring a full-length human DPLA gene with highly expanded CAG repeats exhibit severe disease phenotype"American Journal of Human Genetics. 65. 154-154 (1999)

Sato, T. 等人：“携带全长人类 DPLA 基因和高度扩展的 CAG 重复序列的转基因小鼠表现出严重的疾病表型”《美国人类遗传学杂志》。

Sato, T., et al.: "Transgenic mice harboring a full-length human mutant DRPLA gene exhibit age-dependent intergenerational and somatic instabilities of CAG repeats comparable with those in DPLA patients"Human Molecular Genetics. 8. 99-106 (1999)

Sato, T. 等人：“携带全长人类突变体 DRPLA 基因的转基因小鼠表现出与 DPLA 患者相当的年龄依赖性代际和体细胞不稳定性。”人类分子遗传学。

Naito, A. et al.: "Severe osteopetrosis, defective interleukin-1 signaling and lymph node organogenesis in TRAF6-deficient mice"Gene to Cells. 4. 353-362 (1999)

Naito, A. 等人：“TRAF6 缺陷小鼠中的严重骨石症、白细胞介素 1 信号传导缺陷和淋巴结器官发生”Gene to Cells。

Sugiyama, T., et al.: "Localization of phospholipase Cbeta isozymes in the moue cerebellum"Biochem. Biophys. Res. Commum.. 19. 473-478 (1999)

Sugiyama, T., et al.：“磷脂酶 Cbeta 同工酶在小鼠小脑中的定位”Biochem。