课题基金 / 基金详情

分裂酵母における減数分裂特異的な組み換え機構の解析

分裂酵母における減数分裂特異的な組み換え機構の解析
裂殖酵母减数分裂特异性重组机制分析
批准号：
11146209
负责人：
野島 博
金额：
$1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1999 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11146209/
关键词：
減数分裂転写誘導分裂酵母遺伝子破壊テトラド解析遺伝子組み換えbicistronic

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
差分化cDNAライブラリーを作成することで、これまでに分裂酵母の減数分裂特異的に転写誘導される遺伝子を現在までに27個単離した。この一つeta1^+(enhanced transcript after nitrogen starvation)遺伝子はノーザン解析をすると1.0kbと2.8kbの2本のバンドを示し、このうち2.8kbのバンドのみが窒素源枯渇後数時間後に劇的に転写誘導されるという減数分裂特異性を示した。両方に対応するcDNAを単離して塩基配列決定すると両方ともポリA付加の位置は同一で共通にRad24の読みとり枠(ORF)を含むが、後者は余分な5'上流(1.8kb)にもうひとつの大きなORFを含むことが分かった。このORFは遺伝子組み換えに関わる出芽酵母のDmc1(大腸菌RecAのホモログ)と酷似していたので、コードする遺伝子をdmc1^+と名付け機能解析した。これらがbicistronic mRNAとし転写されている事実はプローブを変えてノーザン解析やゲノムサザン解析を行うことで再確認した。3種類の遺伝子破壊株(dmc1Δ,rad24Δ,dmc1Δrad24Δ)の解析から、いずれの遺伝子の破壊も減数分裂には何ら影響を与えないことが分かった。この結果は出芽酵母のDMC1が減数分裂(とくに組み換え)に必須であることに比べて特異である。ただし、テトラド解析によるとdmc1破壊株は減数分裂過程でに組み換えに異常を示し、遺伝子転換効率も野生株に比べて顕著に低下していたことは分裂酵母のDMC1もやはり遺伝子組み換えに関わっていることを示唆する。昨年報告したMeu13の機能と考え合わせると我々の方法は減数分裂組み換えに関わる遺伝子の包括的単離にも有用であることが分かった。
英文摘要
差分化cDNAライブラリーを作成することで、これまでに分裂酵母の減数分裂特異的に転写誘導される遺伝子を現在までに27個単離した。この一つeta1^+(enhanced transcript after nitrogen starvation)遺伝子はノーザン解析をすると1.0kbと2.8kbの2本のバンドを示し、このうち2.8kbのバンドのみが窒素源枯渇後数時間後に劇的に転写誘導されるという減数分裂特異性を示した。両方に対応するcDNAを単離して塩基配列決定すると両方ともポリA付加の位置は同一で共通にRad24の読みとり枠(ORF)を含むが、後者は余分な5'上流(1.8kb)にもうひとつの大きなORFを含むことが分かった。このORFは遺伝子組み換えに関わる出芽酵母のDmc1(大腸菌RecAのホモログ)と酷似していたので、コードする遺伝子をdmc1^+と名付け機能解析した。これらがbicistronic mRNAとし転写されている事実はプローブを変えてノーザン解析やゲノムサザン解析を行うことで再確認した。3種類の遺伝子破壊株(dmc1Δ,rad24Δ,dmc1Δrad24Δ)の解析から、いずれの遺伝子の破壊も減数分裂には何ら影響を与えないことが分かった。この結果は出芽酵母のDMC1が減数分裂(とくに組み換え)に必須であることに比べて特異である。ただし、テトラド解析によるとdmc1破壊株は減数分裂過程でに組み換えに異常を示し、遺伝子転換効率も野生株に比べて顕著に低下していたことは分裂酵母のDMC1もやはり遺伝子組み換えに関わっていることを示唆する。昨年報告したMeu13の機能と考え合わせると我々の方法は減数分裂組み換えに関わる遺伝子の包括的単離にも有用であることが分かった。
期刊论文(6)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Ohtani K.et al.: "Cell-growth-regulated expression of mammalian MCM5 and MCM6 genes mediated by the transcription factor E2F"Oncogene. 18. 2299-2309 (1999)
Ohtani K.等人：“转录因子 E2F 介导的哺乳动物 MCM5 和 MCM6 基因的细胞生长调节表达”癌基因。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Iguchi N.et al.: "Molecular cloning of haploid germ cell-specific tektin cDNA and analysis of the protein in mouse testis"FEBS Lett.. 456. 315-321 (1999)
Iguchi N.等人：“单倍体生殖细胞特异性 tektin cDNA 的分子克隆和小鼠睾丸中蛋白质的分析”FEBS Lett.. 456. 315-321 (1999)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Tanaka H.et al.: "A haploid germ cell-specific nuclear protein kinase (Haspin) in spermatide nuclei. : its identification,charachterization and effects on somatic cells"J. Biol. Chem.. 274. 17049-17057 (1999)
Tanaka H.et al.：“精子细胞核中的单倍体生殖细胞特异性核蛋白激酶（Haspin）。：其鉴定、表征及其对体细胞的影响”J。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Ito A.et al.: "Inhibitory effec of the transcription factor encoded by the mi mutant allele in cultured mast cells of mice"Blood. 93. 1189-1196 (1999)
Ito A.等人：“mi 突变等位基因编码的转录因子在培养的小鼠肥大细胞中的抑制作用”血液。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
段階的サブストラクション法による自己免疫疾患原因遺伝子の探索と検証
  • 批准号：
    17019045
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $2.56万
  • 财政年份：
    2005
  • 负责人：
    野島 博
  • 依托单位：
    Osaka University
翻訳フレームを持たない新規なポリAプラスRNA群の機能解析
  • 批准号：
    15030227
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $4.1万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    野島 博
  • 依托单位：
    Osaka University
新しい発想にもとづくRNA血液診断システムの構築
  • 批准号：
    16651101
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.24万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    野島 博
  • 依托单位：
    Osaka University
分裂酵母の減数分裂システム解明に向けたゲノム生物学的研究
  • 批准号：
    16013226
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $4.03万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    野島 博
  • 依托单位：
    Osaka University
海外基金