分裂酵母の減数分裂システム解明に向けたゲノム生物学的研究

旨在阐明裂殖酵母减数分裂系统的基因组生物学研究

• 批准号: 13206041
• 负责人: 野島 博
• 金额: $ 3.52万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206041/
• 关键词: 分裂酵母; 減数分裂; 遺伝子破壊; cDNAライブラリー; サブトラクション; 組み換え頻度; ノーザン解析; チェックポイント制御

我々は分裂酵母の減数分裂初期に特異的に発現する遺伝子群(meu/eta)を独自に開発してきた段階的サブトラクション法を用いて50種類近くクローニングし、発現・機能の網羅的解析を行い、減数分裂を進めるプログラムの分子レベルでの解析を行ってきた。遺伝子破壊を行うことにより遺伝子破壊株では交差による組み換え頻度、および遺伝子変換による組み換え頻度がともに野生型に比べ減少すること、第一減数分裂で染色体の不均等分配がおきるような遺伝子が幾つか見つかってきた。これらはいずれも構造は新規であったが、出芽酵母の中にある相同染色体の対合と、相同染色体間でのシナプトネマ構造(SC)の形成を保証するとされる遺伝子に構造が類似の遺伝子(meu13^+)もあった。さらにこれら組み換えに関わる遺伝子の発現パターンはノーザン解析によると、いずれも窒素源枯渇による減数分裂開始から4時間後に劇的に転写誘導されたのち6時間後をピークとして8時間後にはmRNAはほとんど検出されないほどに分解されていた。これと類似の発現パターンを示すmeu遺伝子はまだ幾つか未解析のまま残してあることから、我々の作製してきた差分化cDNAライブラリーの中にはまだ沢山の未知の減数分裂特異的な組み換えに関わる遺伝子が含まれていると予想される。さらに我々はdmc1^+,meu13^+,checkpoint rad^+遺伝子を用いて減数分裂チェックポイント制御機構の解析を行ったのみならず、胞子形成を制御するmeu10^+,meu14^+,omt1^+,omt2^+,omt3^+遺伝子などについても詳細な機能解析を行ってきた。さらにins1^+, eta2^+と名づけた新規遺伝子を単離し、これらが多重転写(multiplex transcription)という新たな転写様式を示すことを発見した。

I am using the unique method of developing fission yeast in the early stage of meiosis, which is a unique subgroup (meu/eta).いて50 types of close くクローニングし, analysis of the appearance and function of the net, を行い, meiosis を advance めるプログラムのmolecule レベルでのanalytic を行ってきた. The remaining 伝子壊を行うことにより伝子波壊 strainsでは Crossover による集团みchangeえfrequency, および缝子変Changeによる集团みchangeえfrequencyがとThe wild-type ratio is reduced, and the chromosomes of the first meiosis are unevenly distributed.これらはいずれもstructural new regulation であったが, budding yeast の中にあるthe same chromosome fusion, the same chromosome でのシナプトネマstructure (SC)の成をguaranteedするとされる伝子にstructuralが is similar to の伝子(meu13^+)もあった.さらにこれら group みchange えに关わる伝子の発appear パターンはノーザンAnalysis of the beginning of Meiosis and the beginning of meiosis After the drama's に転inducing されたのち6 time after time をピークとして8 time后にはmRNAはほとんど検出されないほどに decomposition されていた.これとsimilar to の発成パターンをshow すmeu 伝子 はまだ Several つかUnresolved のまま Remnant してあることから、我々の产产してきたdifferentiation cDNAライブラリーの中にはまだ沢山の无名のMeiosis-specific なgroup みchange えに关わる伝子がcontaining まれていると yu want to される.さらに我々はdmc1^+,meu13^+,checkpoint rad^+ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　ious Generation Mechanism Controlling Mechanism のanalytic を行ったのみならず、Spore Formation をcontrol するmeu10 ^+,meu14^+,omt1^+,omt2^+,omt3^+伝子などについてもDetailed functional analysisを行ってきた.さらにins1^+, eta2^+と名づけた新杝子を単里し、これらがmultiplex transcription)という新たな転WRITE様styleをshowすことを発见した.

项目成果

Watanabe, T., Miyashita, K., Saito, T.T., Yoneki, T., Kakihara, Y., Nabeshima, K., Kishi, Y.A., Shimoda, C., Nojima, H.: "Comprehensive isolation of meiosis specific genes identifies many unusual non-coding transcripts in Schizosaccharomyces pombe"Nucleic

Watanabe, T.、Miyashita, K.、Saito, T.T.、Yoneki, T.、Kakihara, Y.、Nabeshima, K.、Kishi, Y.A.、Shimoda, C.、Nojima, H.：“减数分裂特异性基因的全面分离

Molnar, M., Parisi, S., Kakihara, Y., Nojima, H., Yamamoto, A., Hiraoka, Y., Bozsik, A., Sipiczki, M., Kohli, J.: "Characterization of rec7, an early meiotic recombination gene in Schizosaccharomyces pombe"Genetics. 177・2. 519-532 (2001)

Molnar, M.、Parisi, S.、Kakihara, Y.、Nojima, H.、Yamamoto, A.、Hiraoka, Y.、Bozsik, A.、Sipiczki, M.、Kohli, J.：“rec7 的表征，粟酒裂殖酵母的减数分裂早期重组基因《Genetics. 177・2. 519-532 (2001)》

Nabeshima, K., Kakihara, Y., Hiraoka, Y., Nojima, H.: "A novel meiosis-specific protein of fission yeast Meu13p, promotes homologous pairing independently of homologous recombination"EMBO Journal. 20・14. 3871-3881 (2001)

Nabeshima, K.、Kakihara, Y.、Hiraoka, Y.、Nojima, H.：“裂殖酵母 Meu13p 的新型减数分裂特异性蛋白，促进独立于同源重组的同源配对”EMBO 杂志 3871-3881。 (2001)