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人工生物時計(バイオクロック)の開発

人工生物時計(バイオクロック)の開発
人工生物钟（bioclock）的研制
批准号：
11878157
负责人：
岡村 均
金额：
$1.28万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1999 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11878157/
关键词：
生物時計哺乳類時計遺伝子サーカディアンリズムrat-1Cos7遺伝子導入培養細胞

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项目成果

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今回、申請者は約24時間周期の生物時計を人工的に作成する基礎研究として、マウス時計遺伝子の構造解析、時計遺伝子の発現領域の解析、時計遺伝子を入れる株価細胞の特定、時計遺伝子の導入を行った。 1.マウス時計遺伝子の構造解析 1)mPer1プロモーターの解析マウスゲノムライブラリーより、mPer1遺伝子のプロモーター領域を含む約30kbpのゲノムを単離した。この領域には、24時間周期の遺伝子発現に重要であると考えられているE-box配列(CACGTG)や、光による発現誘導に必要とされる cAMP 応答配列(TGACGTCA)、AP-1配列(TGANTMA)などが多数存在することを明らかにした。 2.時計遺伝子における遺伝子発現調節機構の解明 翻訳開始コドンより上流約7.2kbpのゲノムDNAをルシフェラーゼ遺伝子とつなぎ、GH3細胞に導入し、各種条件でプロモーター活性が変動することを示すことを明らかにした。 3.時計遺伝子を発現させる株化細胞の選定Northern hybridization、PCR法などを用いてどのような時計遺伝子が哺乳類のセルラインに発現するかを検索した。その結果rat-1ではmPer1,mPer2,mPer3,Cry1,Cry2が多く発現していた。しかし、COS7細胞では、mPer1,mPer2の発現が少なかった。 4.時計遺伝子の導入 rat-1細胞に血清刺激を行い、3周期の約24時間のリズムを認めた。フォルスコリン刺激でも同様であった。不完全な遺伝子発現をしているCOS7細胞にmPer1,mPer2遺伝子を導入してリズム発現の実験を行ったが、現在のところリズム発振現象は認められなかった。
期刊论文(8)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Maebayashi,Y.,et al.: "A putative transcription factor with seven zinc-finger motif identified in the developing suprachiasmatic nucleus by the differential display-PCR method"J.Neurosci.. 10176-10183 (1999)
Maebayashi,Y.,et al.：“通过差异显示 PCR 方法在发育中的视交叉上核中鉴定出具有七个锌指基序的推定转录因子”J.Neurosci.. 10176-10183 (1999)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Ibata,Y.,et al.: "Functional morphology of the suprachiasmatic nucleus"Front.Neuroendocrinol.. 20. 241-268 (1999)
Ibata,Y.,et al.:“视交叉上核的功能形态”Front.Neuroendocrinol.. 20. 241-268 (1999)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
西塚泰美、貝淵弘三 丸山敬: "細胞のシグナリング Selected Reviews"中山書店. 399 (1999)
Yasumi Nishizuka、Kozo Kaibuchi 和 Takashi Maruyama：“细胞信号传导精选评论”Nakayama Shoten 399 (1999)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Yan,L.,et al.: "Per1 and Per2 gene expression in the rat suprachiasmatic nucleus: circadian profile and the compartment-specific response to light"Neuroscience.. 94. 141-150 (1999)
Yan,L.,et al.：“大鼠视交叉上核中的 Per1 和 Per2 基因表达：昼夜节律特征和对光的区室特异性反应”Neuroscience.. 94. 141-150 (1999)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 8 条
    睡眠覚醒障害の基盤となる霊長類の神経調節機構の同定
    • 批准号：
      23K27487
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $7.57万
    • 财政年份：
      2024
    • 负责人：
      岡村 均
    • 依托单位：
      Kyoto University
    Primate neurobiological mechanisms underlying sleep-wake abnormality
    • 批准号：
      23H02796
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $12.06万
    • 财政年份：
      2023
    • 负责人：
      岡村 均
    • 依托单位：
      Kyoto University
    Research on the biological rhythm oscillation by full-spectrum solar LED
    • 批准号：
      22K18384
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
    • 资助金额：
      $16.64万
    • 财政年份：
      2022
    • 负责人：
      岡村 均
    • 依托单位：
      Kyoto University
    ステロイド合成細胞のクロノメタボリズム：細胞代謝と生理の概日時計による制御機構
    • 批准号：
      13F03402
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for JSPS Fellows
    • 资助金额：
      $1.47万
    • 财政年份：
      2013
    • 负责人：
      岡村 均
    • 依托单位：
      Kyoto University
    海外基金