酵母を用いた基本転写因子TFIIDサブユニット(TAFs)の機能解析

使用酵母对基本转录因子 TFIID 亚基 (TAF) 进行功能分析

• 批准号: 12028225
• 负责人: 古久保 哲朗
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12028225/
• 关键词: 転写因子; 基本転写因子; 転写制御; 転写; 転写調節機構; 出芽酵母; TFIID; TAF

出芽酵母のTFIIDサブユニットであるTAF145は、そのN末端側約70アミノ酸残基から成る領域にTBP機能阻害活性を有する。またこの活性領域(TAND;<TA>___-F N__--terminal domain)は機能的に異なる二個の小サブドメイン(TAND1,TAND2)から構成されるが、酸性型の転写活性化ドメイン(AD)とTFIIAは協調的に作用し、TAND1,2をTBPから逐次的に乖離させることにより転写を活性化するものと考えられる(二段階ハンドオフモデル)。TAND欠失株を紫外線照射することにより、TANDの機能欠損に対して合成致死性を示す遺伝子(nsl:TAN__-D synthetic lethal遺伝子)のスクリーニングを行ったところ、二種類のTBP変異体(TBP-P65S,-S118L)が得られた。これらのTBP変異株においては転写活性化の効率が著しく低下しており、TBP変異体とTFIIAあるいはADとの相互作用に異常が認められた。他の10種類の既知のTBP変異体についても同様の解析を行ったところ、転写活性化能の欠損したTBP変異体特異的にTAND欠失との合成致死性(nsl表現型)が観察された。また興味深いことにホロ酵素のリクルートメントステップに障害があると考えられるTBP変異体において、より強いnsl表現型が観察された。以上の結果はTANDが転写活性化プロセスの比較的初期の段階(TBPリクルートメントステップ)において機能するという上記のモデルを強く支持する。

Saccharomyces cerevisiae, TFIID yeast, TAF145, N-terminal acid residues, TBP, N-terminal acid residues, N-terminal acid residues and N-terminal acid residues were determined. Field of activity (TAND;<TA&gt) _-F N__--terminal domain) the two microphones (TAND1,TAND2) of the machine can be tested as the function of the acid-based writing activation protocol (AD) and the TFIIA coordination, and the TAND1,2 TBP test will be performed one after the other (two-stage write activation test). TAND deficient plants were irradiated with ultraviolet rays, and TAND machines were able to synthesize lethal spores (nsl:TAN__-D synthetic lethal spores), and two kinds of TBP isolates (TBP-P65S,-S118L) were successful. The frequency of writing activation is related to the frequency of TBP, TFIIA, AD, interaction, and so on. He has known that the TBP system system is the same as the analysis of the data, and the activation of the TBP system is due to the lack of TAND loss and synthetic lethality (nsl table). The smell is so deep that the enzyme is very sensitive to the enzyme, and the enzyme is very sensitive to the enzyme. There is a strong TBP in the body, and there is a strong nsl table. The above results show that TAND is responsible for writing the initial phase of the activation response comparison (TBP). The mechanism is capable of improving the performance of the system.

项目成果

C.R.Lim,Y.Kimata,H.Ohdate,T.Kokubo,N.Kikuchi,T.Horigome,K.Kohno: "The Saccharomyces cerevisiae RuvB-like protein, tih2p, is required for cell cycle progression and RNA polymerase II-directed transcription"Journal of Biological Chemistry. 275・29. 22409-224

C.R. Lim、Y. Kimata、H. Ohdate、T. Kokubo、N. Kikuchi、T. Horigome、K. Kohno：“酿酒酵母 RuvB 样蛋白 tih2p 是细胞周期进展和 RNA 聚合酶 II 指导所必需的转录“生物化学杂志.275・29.22409-224

T.Kotani,K-i.Banno,M.Ikura,A.G.Hinnebusch,Y.Nakatani,M.Kawaichi,T.Kokubo: "A role of transcriptional activators as anti-repressors for the auto-inhibitory activity of TATA box binding of TFIID"Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 97・13. 7178-7183 (2000)

T. Kotani、K-i. Banno、M. Ikura、A. G. Hinnebusch、Y. Nakatani、M. Kawaichi、T. Kokubo：“转录激活剂作为 TFIID 的 TATA 盒结合的自动抑制活性的抗阻遏物的作用”美国国家科学院院刊 97・13。

A.Kobayashi,T.Miyake,Y.Ohyama,M.Kawaichi,T.Kokubo: "Mutations in the TATA binding protein, affecting transcriptional activation, show synthetic lethality with the TAF145 gene lacking the TAFN-terminal domain in Saccharomyces cerevisiae"Journal of Biologic

A.Kobayashi、T.Miyake、Y.Ohyama、M.Kawaichi、T.Kokubo：“TATA 结合蛋白的突变影响转录激活，在酿酒酵母中缺乏 TAFN 末端结构域的 TAF145 基因显示出合成致死性”杂志

Y.Tsukihashi,T.Miyake,M.Kawaichi,T.Kokubo: "Impaired core promoter recognition caused by novel yeast TAF145 mutations can be restored by creating a canonical TATA element within the promoter region of the TUB2 gene"Molecular and Cellular Biology. 20・7. 23

Y. Tsukihashi、T. Miyake、M. Kawaichi、T. Kokubo：“通过在 TUB2 基因的启动子区域内创建规范的 TATA 元件，可以恢复由新型酵母 TAF145 突变引起的核心启动子识别受损”《分子与细胞生物学》。 20・7.23