ステロイド受容体ファミリーを介するドーパミンニューロン死の防御機構

类固醇受体家族介导的多巴胺神经元死亡的防御机制

基本信息

批准号：
12031209
负责人：
下濱俊
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ラット腹側中脳の初代培養を用いてBleomycin sulfate(BLM)あるいはButhionine sulfoximine(BSO)によるアポトーシスに対し、17β-estradiolが抗アポトーシス作用を有するか否かを検討した。BLMおよびBSOによる神経細胞死はDNA断片化、核クロマチンの凝集をともない、caspase-3阻害薬や、JNK/AP-1活性化抑制薬であるcurcuminによって拮抗された。curminはcaspase-3活性化を抑制しなかったが、caspase-3拮抗薬はJNK2の増大を抑制したことより、caspase-3の活性化とその下流でのJNK2活性化を介していることが示された。17β-estradiolは1〜10nMでBSOあるいはBLM誘発アポトーシスを抑制し、この抑制作用は、エストロゲン受容体拮抗薬によって遮断された。また、17β-estradiolはBLM,BSO刺激によるcaspase-3活性化やJNK2増大に影響を与えなかった。これらの点から、17β-estradiolはERβを介し、caspase-3やJNKの活性化の下流で抗アポトーシス作用を呈すると考えられた。ERはEREを介した転写調節ではダイマー形成を必要とするが、AP-1 consensus elementを介し転写調節をする際には二量体を形成しないことから、ERのダイマー形成を合成ペブチドで抑制してその影響を調べた。その結果、抗アポトーシス作用はダイマー阻害薬によっては抑制されず、AP-1 siteを介した転写調節である可能性が示された。また、BSO刺激によってAP-1産物であるTNF-αが増大したが、17β-estradiolはこれを抑制した。17β-estradiolはERβに結合し、AP-1 siteを介した抑制的転写調節により抗アポトーシス作用を示すものと考えられた。

我们研究了17β-雌二醇对使用大鼠的腹中脑的原发性培养物是由硫酸盐（BLM）或丁丁氨酸硫酸硫酸硫酸盐（BLM）引起的凋亡作用。 BLM和BSO神经元死亡通过DNA片段化和核染色质聚集，caspase-3抑制剂和姜黄素（JNK/AP-1激活抑制剂）拮抗。 Curmin并未抑制caspase-3激活，但是caspase-3拮抗剂抑制了JNK2的增加，表明它们是通过下游caspase-3和JNK2激活的激活而介导的。 17β-雌二醇在1-10 nm处抑制BSO或BLM诱导的凋亡，并且这种抑制作用被雌激素受体拮抗剂阻断。此外，17β-雌二醇对BLM或BSO刺激对Caspase-3激活或JNK2的增加没有影响。从这些角度来看，人们认为17β-雌二醇通过ERβ和caspase-3和JNK的下游激活表现出抗凋亡作用。尽管ER需要通过ERE进行转录调控中的二聚体形成，但是当通过AP-1共有元件进行转录调控时，ER不会形成二聚体，但我们抑制了与合成pestides一起在ER中形成二聚体的形成，以研究效果。结果表明，抗凋亡效应不会被二聚体抑制剂抑制，并且可以通过AP-1位点进行转录调节。此外，BSO刺激增加了AP-1产物TNF-α，这是AP-1产物，但是17β-雌二醇抑制了这一点。 17β-雌二醇与ERβ结合，被认为通过AP-1部位介导的抑制转录调节表现出抗凋亡作用。