クロマチン構造の変化とその維持による遺伝子状態のエピゲノム性調節とその伝達

基因状态的表观基因组调控及其通过染色质结构变化及其维持的传递

• 批准号: 12206046
• 负责人: 清水 章
• 金额: --
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12206046/
• 关键词: 転写抑制; ヘテロクロマチン; KRAB; Znフィンガー因子; co-repressor; KAP-1; ヒストンアセチル化; ヒストン脱アセチル化酵素

遺伝子領域全体がグローバルな制御を受ける結果、これを含むクロマチン成分に差が生じて核内における局在が変化し、場の制御を受けると予想される。そこで本研究では、転写抑制因子KAP-1あるいはKRAZ-1/2が転写を抑制する場がセントロメア近傍ヘテロクロマチン領域ではないかとの仮説の検証を行った。Tagを付加した全長のKRAZ1および2などを、transfectionによりNIH3T3細胞で発現させ、蛍光染色したのち、共焦点レーザー顕微鏡を用いて観察した。その結果、(1)全長のKRAZ1および2は核内でdot様構造を形成する。(2)dotの分布はcentromeric heterochromatinに局在すKAP-1とHP1αのそれと一致する。(3)KRAZ1のcentromeric heterochromatinへの局在はKRABに依存し、転写抑制と相関する。(4)KAP-1のcentromeric heterochromatinへの局在にはHP1結合ドメインとoligomerizationドメイン(RBCC)が必要であり、転写抑制と相関する。(5)KRAZ1およびKAP-1のcentromeric heterochromatinへの局在および転写の抑制はhistone deacetylaseの阻害剤(TSA)で解除される、などの点が明かとなった。以上の結果から、KRAZと結合した制御対象遺伝子領域が、KRAZとKAP-1およびHP1との相互作用を介して核内において転写の不活性な場であるcentromeric heterochromatinに運ばれることが、KRAZ・KAP-1複合体による転写抑制メカニズムのひとつであり、この機構はhistoneの脱アセチル化に依存してと考えらる。

The result of the control of the whole sub-domain is that the sub-domain contains the components of the sub-domain and the sub-domain contains the components of the sub-domain. The sub-domain contains the components of the sub-domain and the sub-domain. In this study, the inhibition factor KAP-1 was used to inhibit the expression of KRAZ-1/2. The expression of KAP-1/2 was used to inhibit the expression of KRAZ-1/2. The full length of KRAZ1 was observed by microscopy, fluorescence staining and confocal microscopy. The results are as follows: (1) The total length of KRAZ1 and 2 is formed by the dot structure in the nucleus. (2) The dot distribution is consistent with that of centromeric heterochromatin. (3) KRAZ1's centromeric heterochromatin is dependent on KRAB and related to KRAB inhibition. (4)KAP-1 centromeric heterochromatin is essential for HP1 binding, oligomerization and correlation (RBCC). (5)KRAZ1 and KAP-1 are the most important inhibitors of histone deacetylase (TSA). The results above show that the interaction between KRAZ and KAP-1 and HP1 is mediated by the interaction between KRAZ and KAP-1, and the interaction between KRAZ and KAP-1 and HP1 is mediated by the interaction between KRAZ and KAP-1.

项目成果

E.Matsuda, et al.: "Targeting of Kruppel-associated box-containing zinc-finger proteins to centromeric heterochromatin : implication for the gene silencing mechanisms."Journal of Biological Chemistry. 276(印刷中). (2001)

E. Matsuda 等人：“Kruppel 相关盒锌指蛋白靶向着丝粒异染色质：对基因沉默机制的影响”，《生物化学杂志》276（出版中）。

Y.Zhao, et al.: "Mapping of the chicken immunoglobulin heavy chain constant region gene locus reveals an inverted α gene upstream of a condensed υ gene."Immunology. 101・3. 348-353 (2000)

Y.Zhao 等人：“鸡免疫球蛋白重链恒定区基因座的定位揭示了浓缩 υ 基因上游的倒转 α 基因。”免疫学 101・3 348-353 (2000)。

H.Kitao, et al.: "Class switch recombination of the chicken immunoglobulin heavychain genes : implications for the primordial switch region repeats."International Immunology. 12・7. 959-968 (2000)

H.Kitao 等人：“鸡免疫球蛋白重链基因的类别转换重组：对原始转换区域重复的影响。”国际免疫学 12・7 (2000)。