クロマチン構造の変化とその維持による遺伝子状態のエピゲノム性調節とその伝達

基因状态的表观基因组调控及其通过染色质结构变化及其维持的传递

• 批准号: 13206035
• 负责人: 清水 章
• 金额: $ 2.88万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206035/
• 关键词: 転写抑制; ヘテロクロマチン; KRAB; co-repressor; 遺伝子組換え; T細胞受容体; ヒストンアセチル化; ヒストン脱アセチル化酵素

数多くの遺伝子が協調して働き、細胞が機能を果たすためには、クロマチンあるいは染色体の部分構造が変化する必要がある。本研究では、転写抑制を解除すると標的遺伝子の核内局在が変化するか、胎児性と成体性幹細胞の間では異なった形で保持されている遺伝子組換えの特異性がヒストンのアセチル化によって制御されているかなどを解析し、遺伝子状態のエピゲノム性制御の実体を明らかにしようと試み、以下の成果をえた。(1)ヒストン脱アセチル化酵素の阻害剤(TSA)の効果によってKRAZ-1、2やKAP-1の核内局在様式と転写抑制が同時に変調されることを、共焦点レーザー顕微鏡観察ならびに転写活性測定で確認した。また、この局在様式の変化に伴うクロマチン状態の変化には新たな転写が必要であることを見い出した。(2)胎児胸腺組織培養系で胎児由来、成体由来の血液幹細胞をTリンパ球へ分化させ、γδ型T細胞のV断片遺伝子の組換え選択性が、アセチル化ヒストンを多く含むクロマチンへの移行様式に相関していることを、抗アセチル化ヒストン抗体によるChIP法によって確認した。(3)上記組織培養系にTSAを添加することにより、クロマチン活性化様式、すなわち組換え標的遺伝子特異性が変調され、成体由来血液幹細胞から胎児特異的V断片の組換えを起こした細胞を誘導できた。これは、組換え標的遺伝子特異性というエピゲノム性調節の実体がヒストンアセチル化によって担われていることを意味している。転写の脱抑制によるヘテロクロマチン領域からの離脱の発見は、制御される遺伝子の側の動き(場の移動)によって遺伝子の転写状態が変化するという新規の概念をもたらした。組換え標的遺伝子の特異性調節がヒストンアセチル化制御によって担われていることの発見は、エピゲノム性調節の実体を世界に先駆けて明らかにしたものである。

A number of genes are coordinated, and the function of the cell is affected. In this study, the nuclear structure of the target gene was analyzed and the nuclear structure of the target gene was analyzed. The differences between fetal and adult stem cells were maintained. The specificity of the gene structure was analyzed and the nuclear structure of the target gene was analyzed. The results are as follows. (1)The effect of TSA on KRAZ-1, 2 and KAP-1 was confirmed by simultaneous modulation and confocal microscopy. The change of the state of affairs is necessary. (2)Fetal thymus tissue culture system: fetal origin, adult origin, T cell differentiation, gamma delta T cell V fragment composition, selection, migration, correlation, anti-T cell antibody identification (3)In tissue culture lines, TSA is added to the cells, and the activation of TSA is regulated by the expression of TSA. Adult derived blood stem cells and fetal specific V-fragments are induced by TSA. The gene specificity of the target gene is different from that of the target gene. The gene specificity is different from that of the target gene. The new concept of the new method is to change the writing state of the new method and to control the movement of the new method. The specific regulation of gene expression of the target gene is the first time in the world that the gene expression of the target gene has been detected.

项目成果

H.Gonda, et al.: "DNA polymerase β is not essential for the formation of palindromic (P) region of T cell receptor gene"Immunology Letters. 78・1. 45-49 (2001)

H. Gonda 等人：“DNA 聚合酶 β 对于 T 细胞受体基因的回文 (P) 区域的形成不是必需的”《免疫学快报》78・1 (2001)。

E.Matsuda, et al.: "Targeting of Kruppel-associated box-containing zinc-finger proteins to centromeric heterochromatin : implication for the gene silencing mechanisms"Journal of Biological Chemistry. 276・17. 14222-14229 (2001)

E. Matsuda 等人：“Kruppel 相关框锌指蛋白靶向着丝粒异染色质：基因沉默机制的意义”《生物化学杂志》276・17（2001 年）。

Y.Agata, et al.: "Histone acetylation determines the developmentally regulated accessibility for T cell receptor-γ gene recombination"Journal of Experimental Medicine. 193・7. 873-879 (2001)

Y.Agata 等：“组蛋白乙酰化决定了 T 细胞受体-γ 基因重组的发育调节可及性”实验医学杂志 193·7（2001）。

S.-K.Ye, et al.: "The IL-7 receptor controls the accessibility of the TCRγ locus by Stat5 and histone acetylation"Immunity. 15・5. 813-823 (2001)

S.-K.Ye 等人：“IL-7 受体通过 Stat5 和组蛋白乙酰化控制 TCRγ 位点的可及性”15・5 (2001)。