ターゲッティング能を有したアデノウイルスベクターシステムの開発
具有靶向能力的腺病毒载体系统的开发
基本信息
- 批准号:12217162
- 负责人:
- 金额:$ 2.62万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
アデノウイルスベクターは感染域が広く、多くの種類の細胞に遺伝子導入が可能であるが、本ベクターの問題点のひとつに、ベクターの感染域に組織特異性がないことや、アデノウイルス受容体(coxsackievirus and adenovirus receptor;CAR)の発現がない細胞には感染できないことがあげられる。そこで本研究では、任意の挿入したい外来ペプチドに相当するDNAをウイルス表面タンパク質のファイバーDNA領域に導入し、CARだけでなく、挿入したペプチドに親和性のある細胞表面上の受容体(タンパク質)を認識しても感染できるファイバーミュータントアデノウイルスベクターシステムの開発を行った。本年度は以下の結果を得た。1)アデノウイルス全ゲノムを含むベクタープラスミドのファイバータンパク質のHIloopをコードしている遺伝子配列部分に、ユニークな制限酵素部位を挿入し、任意の挿入したい外来ペプチドに相当する合成オリゴDNAを、ワンステップのin vitroライゲーションでアデノウイルスDNAに導入できるシステムを開発した。2)モデルとして作製したαvβ3あるいはαvβ5インテグリンとの結合能を有するRGD配列をファイバーに導入したアデノウイルスベクターが、野生型のファイバーを有したベクターと比較し、アデノウイルス受容体の発現が乏しい種々の細胞(癌細胞、マウス由来細胞、血管平滑筋細胞、血球系細胞など)において10-1000倍の遺伝子導入活性を示すことを明らかにした。現在RGD配列をファイバーに導入したアデノウイルスベクターを用いた癌遺伝子治療モデル研究を行うと共に、真にターゲッティング能を有したベクターシステムの開発にも焦点を当てて、研究を進めている。
The infection domain is different, and the cell types are different. The gene introduction is possible, and the problem points are different. The infection domain is tissue specific, and the coxsackievirus and adenovirus receptor (CAR) is different. In this study, we investigated the introduction of DNA into the surface of cells and the development of receptors on the surface of cells. The following results were achieved during the year. 1) The full range of DNA needs to be included in the sequence of genes, the restriction enzyme site, and the introduction of any foreign DNA into the genome. 2) The binding energy of RGD is the binding energy of αvβ3, αvβ5, αvβ3, α v β 3, α v β 5, α v β 3, α v (Cancer cells, stem cells, vascular smooth muscle cells, blood lineage cells) 10-1000 fold higher gene transfer activity Now RGD alignment can be used to improve the quality of cancer treatment.
项目成果
期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
N.Okada,Y.Tsukada,S.Nakagawa,H.Mizuguchi,K.Mori,T.Saito,T.Fujita,A.Yamamoto,T.Hayakawa,T.Mayumi.: "Efficient gene delivery into dendritic cells by fiber-mutant adenovirus vectors."Biochem.Biophys.Res.Commun.. (in press).
N.Okada,Y.Tsukada,S.Nakakawa,H.Mizuguchi,K.Mori,T.Saito,T.Fujita,A.Yamamoto,T.Hayakawa,T.Mayumi.:“通过纤维将基因有效传递到树突状细胞中
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Y.Nagayama,E.Nishihara,H.Namba,H.Yokoi,M.Hasegawa,H.Mizuguchi,T.Hayakawa,H.Hamada,S.Yamashita,M.Niwa.: "Targeting the replication of adenovirus to p53-defective thyroid carcinoma with a p53-regulated cre/loxP system."Cancer Gene Ther.. 8. 36-44 (2001)
Y.Nagayama、E.Nishihara、H.Namba、H.Yokoi、M.Hasekawa、H.Mizuguchi、T.Hayakawa、H.Hamada、S.Yamashita、M.Niwa.:“将腺病毒复制靶向 p53-
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
H.Mizuguchi,T.Hosono,,T.Hayakawa: "Long-term replication of Epstein-Barr virus-derived episomal vectors in the rodent cells."FEBS Letter. 472. 173-178 (2000)
H.Mizuguchi、T.Hosono、T.Hayakawa:“Epstein-Barr 病毒衍生的附加型载体在啮齿动物细胞中的长期复制。”FEBS 信函。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
H.Mizuguchi,N.Koizumi,T.Hosono,N.Utoguchi,Y.Watanabe,M.A.kay,T.Hayakawa.: "A simplified system for constructing recombinant adenoviral vectors containing heterologous peptides in the HI loop of their fiber knob"Gene Ther.. (in press).
H.Mizuguchi、N.Koizumi、T.Hosono、N.Utoguchi、Y.Watanabe、M.A.kay、T.Hayakawa.:“用于构建重组腺病毒载体的简化系统,其纤维旋钮的 HI 环中含有异源肽”基因
- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
H.Mizuguchi,Z.Xu,A.Ishii-Watabe,E.Uchida,T.Hayakawa: "IRES-dependent second gene expression is significantly lower than cap-dependent first gene expression in a bicistronic vector."Mol.Ther.. 1. 376-382 (2000)
H.Mizuguchi、Z.Xu、A.Ishii-Watabe、E.Uchida、T.Hayakawa:“双顺反子载体中,IRES 依赖性第二基因表达显着低于 cap 依赖性第一基因表达。”Mol.Ther..
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