アデノウイルス受容体CARと相同性を有する可溶性新規タンパク質sCARの機能解析

与腺病毒受体CAR同源的可溶性新型蛋白sCAR的功能分析

• 批准号: 17659023
• 负责人: 水口 裕之
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: 独立行政法人医薬基盤研究所
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659023/
• 关键词: 遺伝子治療; アデノウイルス; 受容体; CAR

高効率な遺伝子治療用ベクターとして繁用されているアデノウイルス(Ad)ベクターは、細胞表面受容体であるCAR(coxsackievirus and adenovirus receptor)を介して感染することが知られている。CARは免疫グロブリンスーパーファミリーに属する細胞接着分子であり、このファミリーに属する分子は互いに相同性を有することが知られている。そこで、CARと相同性を有する新規タンパク質を探索するため、ESTデータベースを検索したところ、CARと非常に相同性の高い新規タンパク質sCAR(similar to CAR)を同定することができた。sCARは3つの免疫グロブリン様領域を有した390アミノ酸から成る可溶性タンパク質であった。マウスにおけるsCARの発現をRT-PCRにより検討したところ、肺や心臓、腎臓など多くの組織で発現が見られ、特に脳および卵巣で高い発現が見られた。sCARはCARのAdベクター結合部位とほぼ同様の一次構造を有していたため、次に、Adベクター感染におよぼすsCARの影響を調べた。SK HEP-1細胞にsCAR遺伝子を導入しAdベクターを感染させたところ、親株に比較し有意に感染が阻害された。また、sCAR導入SK HEP-1細胞の培養上清にもAdベクター感染阻害活性が見られた。したがって、sCARはAdベクターおよび野生型Adの生理的感染阻害タンパク質である可能性が示唆された。この可能性をさらに確認するため、現在、sCARのリコンビナントタンパク質を大腸菌あるいはバキュロウイルス等で作成し、このタンパク質によるAdベクターの感染におよぼす影響を検討しているところである。

High rate virus therapy is used to detect infection by CAR(coxsackievirus and adenovirus receptor). CAR is a cell adhesion molecule that belongs to the same family. CAR (similar to CAR) is the same as the new model. sCAR has 3 kinds of immune systems, and its soluble system is available in 390 kinds of acid systems. The expression of sCAR was detected by RT-PCR in the tissues of lung, heart and kidney. sCAR has the same primary structure as the ad-hoc binding site, and its secondary structure has the same effect as the ad-hoc binding site. SK HEP-1 cells were infected with sCAR gene and their parents were infected with sCAR gene Anti-infection activity of culture supernatant of SK HEP-1 cells transfected with sCAR was observed. The possibility of physiological infection resistance of Ad and wild-type Ad is demonstrated. The possibility of this is confirmed by the following discussion on the impact of the infection caused by Escherichia coli on sCAR:

项目成果

Approaches to improve the kinetics of adenovirus delivered gene and gene product.

改善腺病毒传递基因和基因产物动力学的方法。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Adv.Drug.Deli.Rev. 57
• 作者: Xu Z.L.;Mizuguchi H.;Koizumi N.;Sakurai F.;Hosono T.;Kawabata K.;Watanabe Y.;Yamaguchi T.;Hayakawa T.
• 通讯作者: Hayakawa T.