ヒト透過性細胞を用いたDNA複製装置の免疫組織化学的解析

使用人透化细胞对 DNA 复制装置进行免疫组织化学分析

• 批准号: 12218217
• 负责人: 吉田 松年
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12218217/
• 关键词: Rbタンパク; DNAポリメラーゼα; 細胞周期; 複製忠実度; DNAポリメラーゼδ; DNAポリメラーゼε; 発がん; SNP

我々は、Rb蛋白の低リン酸化型が転写を抑制して細胞周期を負に調節するのに対して、高リン酸化型RbはDNAポリメラーゼαの活性を促進する事によりS期の進行に正の調節をする可能性を示した。今年度は、高リン酸化Rb蛋白の核内局在を特異抗体を用いて解析した結果、807番目あるいは811番目のセリン残基がリン酸化されたRb蛋白は、ヒト正常繊維芽細胞においてS期の進行に伴って量が増大し、さらにS期の中期から後期にかけて核小体へと移行することを見い出した。一方、DNAポリメラーゼの複製忠実度がヒト癌細胞においてもmutator phenotypeをもたらし、発がんに関与しているとの仮説を検証するため、ヒト癌組織からDNAを抽出してDNAポリメラーゼα、δ、εの複製忠実度に関与するドメインの変異に焦点を当て変異を検出すべくスクリーニングを開始した。予備的な結果として7ケ所のターゲットのうちイントロン部位に複数の変異(おそらくSNP)を見い出した。エキソン部位については癌特異的な変異の存在につき検討中である。

We show the possibility of negative regulation of Rb protein in the cell cycle and positive regulation of Rb protein in the cell cycle. This year, the analysis of Rb protein in the nuclear domain with specific antibodies showed that Rb protein in 807 - 811 residues was acidified, and the amount of Rb protein in normal human embryonic cells increased during the middle and late stages of S phase. One side, DNA replication loyalty, and replication loyalty to the cancer cell, the mutator phenotype, and development related to the identification of cancer tissue DNA extraction, DNA replication loyalty, and replication loyalty related to the alpha, delta, and epsilon focus, and when different, and the start of the detection. The results of the preparation are as follows: There are different kinds of cancer in different parts of the body.

项目成果

Okada Yoshito: "Assignment of functional amino acids around the active site of human DNA topoisomerase II α."J.Biol.Chem.. 275(32). 24630-24638 (2000)

Yoshito Okada：“人 DNA 拓扑异构酶 II α 活性位点周围的功能酸氨基酸分配”。J.Biol.Chem.. 275(32) (2000)。

Mizushina Yoshiyuki: "Dehydroaltenusin : a mammalian DNA polymerase alpha inhibitor."J.Biol.Chem.. 275. 33957-33961 (2000)

Mizusina Yoshiyuki：“脱氢altenusin：一种哺乳动物DNA聚合酶α抑制剂。”J.Biol.Chem.. 275. 33957-33961 (2000)

Kurumiya Yastuhiro: "Differential suppression of liver-specific genes in regenerating rat liver induced by extended hepatectomy."J.Hepatol.. 32. 636-644 (2000)

Kurumiya Yastuhiro：“扩大肝切除术诱导的大鼠肝脏再生中肝脏特异性基因的差异抑制。”J.Hepatol.. 32. 636-644 (2000)

Sakaguchi Kenji: "DNA polymerase and Ki-67 nuclear antigen are induced in correlation with the resected mass of rat liver up to 90%."Langenbeck's Arch.Surg.. 385. 135-142 (2000)

坂口％20健二：％20“DNA％20聚合酶％20和％20Ki-67％20核％20抗原％20是％20诱导％20in％20相关性％20与％20％20切除％20质量％20of％20rat％20肝脏％20up％20至％2090％。

Nozawa Katsura: "In vitro expansion of mammalian telomere repeats by DNA polymerase α-primase."Nucleic Acids Research. 28(16). 3117-3124 (2000)

Nozawa Katsura：“通过 DNA 聚合酶 α-引物酶体外扩增哺乳动物端粒重复序列。”28(16) 3117-3124 (2000)。