权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

DNAプライマーゼ及びテロメラーゼを標的とする新規阻害物質のがん細胞増殖制御

使用针对 DNA 引物酶和端粒酶的新型抑制剂控制癌细胞增殖

基本信息

批准号：
09255219
负责人：
吉田松年
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

研究目的 DNAプライマーゼ及びテロメラーゼを分子標的とする新たな阻害剤を探索する。DNAプライマーゼは基質類似体ではRNAポリメラーゼも同時に阻害してしまい、特異的阻害は困難である。したがって基質とは構造が異なるスフィンゴシンは有望な候補である。テロメラーゼは、複製に際して短縮するクロマチンの末端テロメア構造を伸長して長さを確保するための逆転写酵素であり、正常組織には極めて低いが、がん細胞は一般に高活性を示す。従って、本酵素はがんと非がん部を鑑別するための有力な手段となり得ると同時に、がんに対する特異的増殖阻害剤の標的として有望である。成果スフィンゴシン及びその各種の誘導体を用いてDNAプライマーゼ阻害と細胞増殖抑制活性との相関を検討した。sphingosine,phyto-sphingosine,N,N'-dimethyl-sphingosineはDNAプライマーゼのin vitro反応を強く阻害し(Ki=1.5-3.0μM)、cis-sphingosineとdihydro-sphingosineは中程度の阻害を示し(Ki=10-15μM),C-2 ceramide,C-8 ceramide,ceramideは全く阻害しなかった。これらはプライマーゼ阻害の強さと比例してヒト白血病細胞HL60の増殖を阻害し、細胞はアポトーシスに陥った。スフィンゴシンによるDNAプライマーゼ阻害が細胞死の機構の一つであることが示唆された。又、DNAポリメラーゼβ阻害物質として極めて強い阻害活性を示す海洋性古細菌由来のエーテル脂質KN208を見い出した。KN208はヒト白血病細胞のDNAメチル化剤MMS感受性を増大させた。このことは、メチル化DNAの修復に関与するDNAポリメラーゼβを阻害することにより、薬剤感受性を高める可能性を示すものである。テロメラーゼに関しては阻害剤のスクリーニングを行った。テロメラーゼはラット腹水がん細胞(AH7974)の抽出物をゲルろ過カラムによりヌクレアーゼを除去し用いた。阻害物質は化学合成物質、天然物を中心として約15000種類をスクリーニングし、5種類の候補物質を得た。又、阻害の酵素特異性についてDNAポリメラーゼα、β、δ、ε、γ、HIV-RT、大腸菌DNAポリメラーゼI等の阻害と比較して検討した。

The purpose of this study is to explore new molecular targets. DNA matrix analogues are difficult to detect at the same time and specifically. The structure is different. The activity of reverse transcription enzymes is low in normal tissues and generally high in cells. This enzyme is a powerful means of identifying and identifying specific reproductive inhibitors. A study of the correlation between DNA and proliferation inhibition Sphingosine,phyto-sphingosine,N, N'-dimethyl-sphingosine strongly inhibits DNA degradation in vitro (Ki=1.5-3.0μM), cis-sphingosine moderately inhibits DNA degradation (Ki =10-15μM),C-2 ceramide,C-8 ceramide,ceramide completely inhibits DNA degradation. The growth of leukemia cell line HL60 is inhibited by the presence of a strong inhibitor. The DNA of a cell is not protected from death. In addition, the DNA sequence of β-inhibiting substances and their strong inhibitory activity show the origin of marine archaea and the presence of lipid KN208. KN208 has increased susceptibility to DNA methylation of leukemia cells. This is the first time that DNA repair has been shown to be sensitive to DNA damage. The first step is to reduce the risk of damage. The extract of ascites (AH7974) was removed from the cell. About 15000 kinds of chemical synthetic substances and natural substances were obtained. In addition, the enzyme specificity of inhibition is compared with the inhibition of DNA diversity in α, β, δ, ε, γ, HIV-RT and E. coli DNA diversity.