メラノーマに対するフュージョン及びコンビネーションDNAワクチン療法の新規開発

黑色素瘤融合和组合DNA疫苗疗法的新进展

• 批准号: 13218090
• 负责人: 姫野 國祐
• 金额: $ 2.94万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218090/
• 关键词: メラノーマ; DNAワクチン; サイトカイン遺伝子治療; IL-12; TRP-2; フュージョンDNA; コンビネーションDNAワクチン; ユビキチン遺伝子

「今年度の成果」マウスメラノーマ(B16)に対するDNAワクチン.サイトカイン遺伝子治療法の新規開発1)ホルマリン固定B16とIL-12遺伝子のコンビネーションによるメラノーマに対する抗腫瘍免疫誘導i)1%ホルマリンで処置した2x10^6個のメラノーマ(B16)を皮下に接種後、IL-12plasmidDNAを遺伝子銃を用いて皮下投与を行った。この操作を1週間間隔で3度行った後に2x10^5のメラノーマ細胞を移植したところ、強い腫瘍増殖抑制が認められた。ii)メラノーマ腫瘍を移植後に治療としてi)と同様の処置を行ったところ、強い治療効果が認められた。i),ii)ともCD8^+T細胞が直接の効果細胞であった。これらの実験系では自家癌を抗原としてIL-12とともに免疫した場合に、メラノーマに対する免疫学的治療の有効な抗原となりうることを示している。2)メラノーマ抗原遺伝子(TRP-2)とGFP(green fluorescent protein)遺伝子とのフュージョン遺伝子による遺伝子銃を用いたメラノーマに対する抗腫瘍免疫の誘導TRP-2とGFPのフュージョン遺伝子で免疫することにより非常に強いメラノーマに対する抗腫瘍効果が得られた。この系における効果細胞はCD4^+T細胞とCD8^+T細胞であった。この系においてGFP遺伝子産物はCD4^+T細胞を誘導するキャリアータンパク質として機能していることが推定された。3)TRP-2遺伝子とユビキチン遺伝子のフュージョン遺伝子による遺伝子銃を用いたDNAワクチンによるメラノーマに対する抗腫瘍免疫の誘導この系においても非常に強い抗腫瘍免疫が得られた。この系ではユビキチンが選択的にクラスIへの抗原提示に働くため、効率良くTRP-2に対するCD8^+T細胞による抗腫瘍免疫が獲得された。「今後の研究方針」以上のような今期の研究結果を踏まえて、今後フュージョン遺伝子,コンビネーション遺伝子、および自家癌を抗原として用いたメラノーマに対する免疫誘導法に基づいた,より強力な免疫学的治療法の確率をめざす。

"Our の achievement" マ ウ ス メ ラ ノ ー マ (B16) に す seaborne る DNA ワ ク チ ン. サ イ ト カ イ ン heritage 伝 child therapy の new rules 発 1) ホ ル マ リ ン fixed B16 と traces of IL - 12 伝 son の コ ン ビ ネ ー シ ョ ン に よ る メ ラ ノ ー マ に す seaborne る swollen sores immune induced resistance I) 1% ホ ル マ リ ン で 処 buy し た 2 x10 ^ 6 の メ ラ ノ ー マ (B16) を subcutaneous に after inoculation, IL - 12 plasmiddna を posthumous son 伝 spear を with い cast with を っ て subcutaneous た. こ の を operation 1 week interval between で line 3 degrees っ た に after 2 x10 ^ 5 の メ ラ ノ ー を マ cells transplantation し た と こ ろ, strong inhibition い swollen sores raised colonization が recognize め ら れ た. Ii) メ ラ ノ ー マ swollen sores を に treatment after transplantation と し て I) と with others の 処 line buy を っ た と こ ろ, strong い treatment services fruit が め ら れ た. i),ii)と と CD8^+T cells が directly <s:1> effector cells であった. こ れ ら の be 験 department で は を their cancer antigen と し て IL - 12 と と も に immune し た に, メ ラ ノ ー マ に す seaborne る immunological treatment の have sharper な antigen と な り う る こ と を shown し て い る. 2)メラノ メラノ メラノ 伝 antigenic precursor 伝 (TRP-2)とGFP(green fluorescent Protein) posthumous son 伝 と の フ ュ ー ジ ョ ン posthumous son 伝 に よ る posthumous son 伝 spear を with い た メ ラ ノ ー マ に す seaborne る swollen sores immune の inducing TRP - 2 と GFP の フ ュ ー ジ ョ ン posthumous son 伝 で immune す る こ と に よ り very strong に い メ ラ ノ ー マ に す seaborne る resistance swollen sores fruit comes unseen が ら れ た. The <s:1> is a における active cell における CD4^+T cell とCD8^+T cell であった. こ の is に お い て GFP heritage 伝 zi chan content は CD4 + T cells を ^ induced す る キ ャ リ ア ー タ ン パ ク qualitative と し て function し て い る こ と が presumption さ れ た. 3) TRP - 2 heritage 伝 son と ユ ビ キ チ ン posthumous son 伝 の フ ュ ー ジ ョ ン posthumous son 伝 に よ る posthumous son 伝 spear を with い た DNA ワ ク チ ン に よ る メ ラ ノ ー マ に す seaborne る swollen sores immune の inducing こ の is に お い て も very strong に い swollen sores immune が resistance to ら れ た. こ の is で は ユ ビ キ チ ン が sentaku of に ク ラ ス I へ の antigen prompt に 働 く た め, good working rate く TRP - 2 に す seaborne る CD8 + T cells に ^ よ る resistance swollen sores immune が get さ れ た. "の research approach in the future" above の よ う な in this issue の results を tread ま え て, future フ ュ ー ジ ョ ン heritage 伝, コ ン ビ ネ ー シ ョ ン heritage 伝, お よ び を their cancer antigen と し て in い た メ ラ ノ ー マ に す seaborne る immune candidated に base づ い た, よ り powerful な の immunological therapy of probabilistic を め ざ す.

项目成果

Nishitani, M., Himeno, K.et al.: "Cytokine gene therapy for cancer with naked DNA"Molecular Urology. 4. 47-50 (2000)

Nishitani, M., Himeno, K.等人：“用裸DNA治疗癌症的细胞因子基因疗法”分子泌尿学。

Nakano, Y., Himeno, K.et al.: "Roles of NKT cells in resistance against infection with Toxoplasma gondii and in expression of heat shock protein 65 in the host macrophages"Microbes and Infection. 4・1. 1-11 (2002)

Nakano, Y., Himeno, K.等人：“NKT 细胞在抵抗弓形虫感染和宿主巨噬细胞中表达热休克蛋白 65 中的作用”微生物与感染 1-11。 2002）

Nakano, Y., Himeno, K.et al.: "Granule-dependent killing of Toxoplasma gondii by CD8^+ T cells"immunology. 104・3. 289-298 (2001)

Nakano, Y., Himeno, K.等：“CD8^+ T 细胞对弓形虫的颗粒依赖性杀伤”免疫学 104・3（2001）。

Nshitani, M., Himeno, K.et al.: "A convenient cancer vaccine therapy with in vivo transfer of interleukin 12 expression plasmid using gene gun technology after priming with irradiated carcinoma cells"Cancer Gene Therapy. (in press). (2001)

Nshitani, M., Himeno, K.等人：“一种方便的癌症疫苗疗法，在用受辐射的癌细胞引发后，使用基因枪技术体内转移白细胞介素 12 表达质粒”癌症基因疗法。

Dainichi, T., Himeno, K.et al.: "Nippocystatin, a cysteine protease inhibitor from Nippostrongylus brasiliensis, inhibits antigen processing and modulates antigen-specific immune response"Infection and Immunity. 69・12. 7380-7386 (2001)

Dainichi, T., Himeno, K. 等人：“Nippocystatin，一种来自巴西圆线虫的半胱氨酸蛋白酶抑制剂，抑制抗原加工并调节抗原特异性免疫反应”《感染与免疫》69・12。 ）