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プリオンの増殖を規定する正常型-異常型プリオン蛋白質の分子間相互作用に関する研究

调节朊病毒增殖的正常和异常朊病毒蛋白之间的分子间相互作用研究

基本信息

批准号：
13226004
负责人：
堀内基広
金额：
--
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

病原性プリオン蛋白質(PrPSc)と正常型プリオン蛋白質(PrPC)が直接会合することが、PrPScの増殖の第一段階である。そこで、PrPCとPrPScの結合に関与するPrP分子上のドメインを調べることを目的として、各種PrP合成ペプチドがPrPC-PrPSc間の相互作用を阻害するか否かについて検討した。PrPCがPrPSc存在下でPrPSc様のProteinase K(PK)抵抗性分子(PrP-res)に転換する試験管内転換反応で、PrP合成ペプチドaa117-141、aa166-179、aa200-223はPrPCがPrP-resに転換するのを阻害した。これらのPrPペプチドはPrPCと結合することにより、PrPCとPrPScの結合を阻害することが判明した。結合阻害活性を示すPrPペプチドは反応条件下ではβシート構造をとる傾向があることから、PrPペプチドがPrPScのPrPCへの結合ドメインを模倣することでPrPCと結合し、PrPC上のPrPSc結合ドメインを占拠する結果、PrPCとPrPScの結合を阻害する可能性が示唆された。PrPCとPrPScの分子間相互作用を解析する道具として、PrP分子に対するモノクローナル抗体(mAb)パネルを作製した。計34のmAbは認識するエピトープから9群に分類された。グループI〜VIはPrP分子上のリニアエピトープを認識する抗体、グル-プVII、VIIIはPrP分子上の構造エピトープを認識する抗体であった。また、グループIXはPrPSc特異的エピトープを認識する抗体である可能性が強く示唆された。aa59-89のリニアエピトープを認識するmAb、aa143-151を認識するmAb、およびaa1555-231領域内の構造エピトープを認識するmAbはプリオン感染細胞におけるPrPScの合成を阻害した。これらの抗体は細胞膜上に発現するPrPCと強く反応することから、抗体が細胞膜上のPrPCと結合することで正常なPrPC代謝経路が影響を受けるために、PrPSc合成の基質となるPrPCの供給が阻害された結果であると考えられる。

Pathogenic protein (PrPSc) and normal protein (PrPC) meet directly in the first stage of PrPSc reproduction. The binding of PrPC and PrPSc is related to the regulation of PrP molecules, and the interaction between PrPC and PrPSc is blocked by various PrP synthesis molecules. In the presence of PrPC and PrPSc, Proteinase K(PK)-resistant molecules (PrP-res) of PrPSc are involved in the conversion of PrP into PrP-res. PrP synthesis is inhibited by aa117-141, aa166-179, aa200-223. PrP and PrP are not compatible. The binding resistance activity shows the tendency of PrP to bind to PrPSc and PrPC under reverse conditions. The binding resistance of PrPC to PrPC is shown. The binding resistance of PrPC to PrPC is shown. The molecular interaction between PrPC and PrPSc was analyzed and the molecular interaction between PrP and PrPSc was controlled. The 34 mAb was classified into 9 groups. The structure of PrP molecules is recognized by antibodies from I to VI. The possibility of recognizing antibodies against PrPSc is strong. aa59-89 mAb, aa143-151 mAb, aa1555-231 mAb, and aa1555-231 mAb block PrPSc synthesis in infected cells. PrPC binding on the cell membrane is affected by PrPC synthesis matrix.