サイトメガロウイルス感染に対する細胞応答のトランスクリプトーム解析に関する研究

巨细胞病毒感染细胞反应的转录组分析研究

• 批准号: 13226023
• 负责人: 渡辺 慎哉
• 金额: --
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226023/
• 关键词: ヒトサイトメガロウイルス; マイクロアレイ; 宿主遺伝子

ヒトサイトメガロウィルス(HCMV)感染にともなう宿主側の細胞応答を網羅的に解析し、ウイルス感染に対するトランスクリプトーム解析の先駆的モデルを提出することを目標として、平成13年度は以下のことを行った。平成13年7月までにhuman RefSeq9,600遺伝子、平成14年1月までにhuman RefSeq12,000遺伝子からなる合成DNAマイクロアレイの作製を完了した。合成DNAマイクロアレイに特化したハイブリダイゼーションにおいてシグナル・ノイズ比を極大化する装置を開発し、特許出願した(特願2001-323412;スライドガラスハイブリダイゼイションチャンバ)。HCMVおよびUV不活化HCMV感染後4、8、24、48、72時間のヒト正常線維芽細胞からmRNAを抽出し、作製した合成DNAマイクロアレイとハイブリダイズさせ、遺伝子発現プロファイルを取得した。さらに、HCMVおよびUV不活化HCMV感染後24時間の培養上清からウイルス粒子を除いたものを培地として24時間培養した正常線維芽細胞から同様にして遺伝子発現プロファイルを得た。これらのプロファイルを集積してクラスタ解析を行い、HCMV粒子の細胞への結合・侵入が急速な宿主細胞応答をひき起こし、細胞外に放出される種々の宿主因子の遺伝子発現が上昇すること、さらにそれらの宿主反応はウイルス遺伝子の発現に従属して低下することを明らかにした。すなわち、これらの結果は、HCMV遺伝子の発現によりそれに先立っておきる宿主側の応答が抑制されることを示している。HCMV粒子の許容細胞表面への結合あるいは細胞内への侵入を契機として主として炎症に関与する多くの宿主遺伝子が発現され、ウイルス遺伝子の発現および複製サイクルの始動がない場合はそれらの高発現レベルが維持されることから、これらの宿主反応を抑制できるどうかがHCMVの許容性決定のひとつの指標となるのではないかと考える。

The aim of this study is to analyze the cellular response of host cells to HCMV infection and to provide information on HCMV infection. Human RefSeq9,600 DNA fragments in July, 2013, and human RefSeq12,000 DNA fragments in January, 2014. A device for maximizing the ratio of synthetic DNA was developed and licensed (Japanese Patent Application No. 2001-323412). HCMV and UV did not activate HCMV infection at 4, 8, 24, 48, 72 hours after normal line cells mRNA extraction, production and synthesis of DNA, gene expression and protein production were obtained. HCMV and UV did not activate HCMV infection 24 hours after the culture supernatant to remove the virus particles and culture 24 hours after the normal line of cells to remove the virus particles. The accumulation of HCMV particles, the binding of HCMV particles to cells, the rapid invasion of host cells, the increase in the expression of host factors, and the decrease in the expression of HCMV particles in host cells. The result is that HCMV gene expression is inhibited by host side response. The binding of HCMV particles to the surface of permissive cells is an opportunity for intracellular invasion, and is associated with inflammation. Many host genes are produced, and many host genes are produced. In some cases, high levels of HCMV expression are maintained, and host responses are inhibited.

项目成果

今井順一: "基本から先端までの遺伝子工学がわかる"羊土社. 125 (2001)

Junichi Imai：“从基础到最先进的基因工程理解”Yodosha 125 (2001)。

Ohmori, Y.: "CREB-H: a novel mammalian transcription factor belonging to the CREB/ATF family and functioning via the box-B element with a liver-specific expression"Nucleic Acids Res.. 15 ; 29(10). 2154-2162 (2001)

Ohmori, Y.：“CREB-H：一种属于 CREB/ATF 家族的新型哺乳动物转录因子，通过具有肝脏特异性表达的 box-B 元件发挥作用”《核酸研究》15；