HTLV-Iの感染と感染後の細胞内動態に影響を与える細胞性因子の解析

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1.HTLV-1とGFP組換え牛水胞性口内炎ウイルス(VSVΔG^*-G)との間で、高力価のシュードタイプウイルスを作製できた。2.VSVG^*/HTLV-1シュードタイプウイルスを用いて種々の培養細胞へのHTLV-1の感染性を検討した。3.HTLV-1高感受性ヒト培養細胞株のcDNAライブラリーを作製し、HTLV-1低感受性培養細胞株へ導入した。このcDNAライブラリ発現細胞株のうち、HTLV-1の感染性が高いものをVSVG^*/HTLV-1シュードタイプウイルスウイルスを用いてスクリーニングし、HTLV-1高感受性cDNAライブラリー発現細胞をクローニングした。4.HTLV-1高感受性cDNAライブラリ発現細胞クローンより、導入したcDNAを回収し塩基配列を調べ、遺伝子を同定した。今回同定した遺伝子は2つあり、これらは同じ遺伝子のグループに入ることが明らかとなった。5.HTLV-1高感受性cDNAライブラリー発現細胞クローンから回収したcDNAのORF(open reading frame)を発現プラスミドにクローニングし、HTLV-1低感受性培養細胞株へ導入したところ、導入した細胞でHTLV-1感染の感受性が亢進した。6.今回同定した遺伝子のコードしている蛋白は細胞表面膜蛋白であり、HTLV-1レセプター遺伝子(HTLV1-R)と考えられた。またこれらの遺伝子と同じグループにはいる遺伝子の1つが同様にHTLV-1レセプター遺伝子としての機能を有していることが明かとなった。7.種々の培養細胞でのHTLV1-Rの発現をmRNAの発現や、フローサイトメトリー等で調べ、これらの細胞でのHTLV-1の感受性とあわせて、比較検討した。