IGF-I受容体を標的として放射線増感に関する研究

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IGF-I受容体遺伝子ノックアウトマウス由来細胞(R-)に、種々の変異を導入したヒトIGF-IRを発現させ、IGF-I受容体が放射線抵抗性を付与するために必須のドメインを同定した。その結果、膜直下にあるTyr950と1245番目以降のC末端が、それぞれ独立に放射線抵抗性を付与できることがわかった。ところが、C末端に存在するTyr1250/Tyr1251に変異を導入すると、他の生存シグナルは野生型と変わらないにもかかわらず、放射線抵抗性が完全に喪失した。さらに、この変異体をC末から少しづつ欠失していくと、1293番目で欠失したとき抵抗性になることが判明した。IGF-IRのC末端は、膜の内側に付着させて発現すると、細胞死を引き起こすことが知られており、その際、His1293/Lys1294が重要な役割を果すとされる。この部分は、上記のC末中に存在することから、Tyr1250/Tyr1251/His1293/Lys1294に変異を導入した受容体を作製してその放射線感受性を調べると、野生型と同程度を示した。このことは、IGF-IR分子全体では、Tyr1250/Tyr1251によりC末の細胞死シグナルが抑制されているが、この部分に変異を導入すると、細胞死シグナルが発生するという可能性が示唆された。現在、これらの結果をふまえ、Tyr1250/Tyr1251変異体をHeLa細胞に発現させ、放射線による細胞死がどのように影響を受けるのか、コロニー法による放射線増感が起こるのかについて検討を進めている。さらに、可溶型IGF-IRをHeLa細胞に発現させ、IGE-Iのスカベンジと内因性IGF-IRの機能抑制を狙う実験も進行中で、発現プラスミドの構築を完了した。